一种人胚胎干细胞分化成平滑肌细胞的高效方法技术

本发明专利技术属于人胚胎干细胞定向分化技术，旨在提供一种体外诱导人胚胎干细胞定向分化为平滑肌细胞的方法。该方法包括步骤：（１）人胚胎干细胞的培养；（２）用胰蛋白酶和ＥＤＴＡ消化分离成单细胞，培养后差别贴壁法获得纯化的人胚胎干细胞；（３）把分离纯化后的人胚胎干细胞接种在含诱导培养基Ⅰ中培养１０～１５天，然后用诱导培养液Ⅱ继续培养５～１０天后，获得人平滑肌细胞。本发明专利技术具有方法简便、细胞分化均一度高，诱导周期短、效率高的优点。利用全反式维甲酸高效诱导人胚胎干细胞向平滑肌分化的体外系统，使平滑肌细胞在终级分化细胞中的比例达到９３％以上。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种人胚胎干细胞分化成平滑肌细胞的高效方法，其特征在于包括如下步骤：（１）人胚胎干细胞的培养；（２）用０．０５～０．２５％胰蛋白酶和０．０２～０．０４％ＥＤＴＡ消化分离成单细胞，转入培养瓶中培养１．５个小时，差别贴壁法获得纯 化的人胚胎干细胞；（３）把分离纯化后的人胚胎干细胞接种在诱导培养基Ⅰ中，３７℃，５％ＣＯ↓［２］的条件下培养１０～１５天，然后用诱导培养液Ⅱ继续培养５～１０天后，获得人平滑肌细胞。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姚行，张铭，黄华荣，陈良标，戴利成，
申请(专利权)人：湖州市中心医院，浙江大学，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]