一种防治脱发和促进生发的siRNA及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于生物制剂技术领域，具体涉及一种防治脱发和促进生发的ｓｉＲＮＡ及其制备方法和应用。内容包括：构建可以在大肠杆菌中高效表达的与防治脱发和促进生发功能相关的长双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）的表达载体ｐＥＴ－ＳＲＡＲ；转化大肠杆菌后发酵生产该长双链ＲＮＡ，得到ｄｓＲＮＡ；发酵的大肠杆菌菌体经均质机均质化破壁抽提大肠杆菌总ＲＮＡ，抽提物经纯化获得ｄｓＲＮＡ；再经水解纯化得到小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡｓ）；用脂质体包埋ｓｉＲＮＡｓ，复配后得到防治脱发和促进生发的ｓｉＲＮＡｓ制剂。本发明专利技术制备的制剂具有明显防治脱发和促进生发的作用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种防治脱发和促进生发的ｓｉＲＮＡ，其特征在于它由下述方法获得：将基因片断ＳＲ和ＡＲ连接而成的人工基因构建到表达有颈环结构ＳＲ－ＡＲ双链ＲＮＡ的表达载体ｐＥＴ－ＳＡＡＫ上；转化大肠杆菌后进行发酵，表达生产ｄｓＲＮＡ；离心收集大肠杆菌菌体，以均质机破碎法破菌，得到ＲＮＡ抽提物，该抽提物用ＣＦ－１１树脂进行吸附，洗去单链ＲＮＡ和ＤＮＡ分子，洗脱收集ｄｓＲＮＡ部分，洗脱液通过酒精沉淀回收得到ｄｓＲＮＡ；再以ＲＮａｓｅⅢ将长链的ｄｓＲＮＡ切成１８－２５ｂｐ的ｓｉＲＮＡｓ，除去ＲＮａｓｅⅢ，获得防治脱发和促进生发的ｓｉＲＮＡｓ；其中，ＳＲ为睾丸激素还原酶基因片段，ＡＲ为雄激素受体基因片段。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王维荣，黄伟达，黄勇前，谢承光，
申请(专利权)人：上海复旦新杨生物科技有限责任公司，上海复远生物化学研究所有限公司，复旦大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]