一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法技术

本发明专利技术公开了一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，在晴天上午，取牡丹茎段，祛污剥根，浸泡冲洗消毒后，切成小段愈伤组织，在无菌条件下，接种到诱导培养基中进行诱导培育，生出丛生芽后分成单芽，转移到生根培养基上，进行增根，之后在氯化钙溶液中进行浸泡后组合移栽，移栽后全黑暗条件下进行前期培育，之后进行正常光照，展叶施肥。本发明专利技术采用牡丹外植体处理、愈伤组织诱导繁育、分株与增根、生根苗移栽、生根苗养护，可在短期内能够快速有效地将牡丹愈伤组织诱导出丛芽，并将诱导增根，移栽后成活率高，生产周期短、简便易行。

A rapid breeding method for the induction and regeneration of peony

The invention discloses an induction and regeneration of peony fast breeding method, in the sunny morning, the peony stems, remove dirt stripping, immersion rinse after disinfection, cut into small pieces of callus, under sterile conditions, inoculated into induction medium induced cultivation, grow buds were divided into single bud, transfer to the rooting medium, are roots, after soaking in calcium chloride solution after transplanting combined, after transplanting under the dark condition after pre cultivation, normal light, leaf fertilization. The invention adopts peony explants, callus induction, breeding ramets and root, rooting plantlets, rooting seedlings maintenance, can be in the short term can effectively induce callus of peony buds, and the induction of roots, high survival rate after transplanting, the production cycle is short and simple.

【技术实现步骤摘要】
一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法
本专利技术属于牡丹的繁育领域，具体涉及一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法。
技术介绍
我国是牡丹的故乡，种质资源很丰富，大都集中分布在我国西南高山区与中北部黄土高原及丘陵地带，是典型的温带树种。牡丹有着悠久的栽培史，在南北朝时期，牡丹以野生状态转为人工栽培，经过漫长的自然选择和人工选育，培育出了适应性广泛和花色、花型丰富的牡丹品种群。依据野生原种和牡丹栽培地区的不同，可将其分为中原品种群、江南品种群、西北品种群和西南品种群。其中最大的栽培品种群是中原品种群以洛阳和菏泽为代表，也是全国牡丹精品的聚集地，对全国以至世界牡丹栽培有深远的影响。观赏性状极好的牡丹品种，雌雄蕊大都高度瓣化，无结实能力或种子发育不良。因此这些品种生产上大多采用传统繁殖的方法。但传统繁育方法扩繁系数低、成苗速度慢、受季节限制、新品种选育周期长等，从而造成牡丹名优品种繁殖率低，严重制约着牡丹优良品种的繁育进程及商品化、产业化生产。而组织培养技术是植物快繁最有效的方法，不仅能够克服传统繁殖方法的缺点，在短时间内获得大量优良品种，并能够在短期内使用遗传转化技术为定向改良、培育牡丹新品种建立再生体系。因此利用组培方法进行牡丹的繁育是其发展的必然趋势。
技术实现思路
本专利技术提供一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，本专利技术采用牡丹外植体处理、愈伤组织诱导繁育、分株与增根、生根苗移栽、生根苗养护，可在短期内能够快速有效地将牡丹愈伤组织诱导出丛芽，并将诱导增根，移栽后成活率高，生产周期短、简便易行。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，其特征在于，包括如下的步骤：牡丹外植体处理、愈伤组织诱导繁育、分株与增根、生根苗移栽、生根苗养护。所述的牡丹外植体处理：在晴天上午，取粗壮牡丹新生幼嫩带芽茎段，用软刷刷去表面污垢，，剥除外层的老根，浸入含有洗涤剂的水中浸泡5-10分钟，流水冲洗1-2小时，然后置于超净工作台内，用70%酒精进行消毒，用无菌水冲洗3-5遍，用无菌滤纸吸干表面水分，在超净工作台切成0.5-1cm小段愈伤组织。所述的愈伤组织诱导繁育:无菌条件下，将小段愈伤组织接种到愈伤组织诱导培养基中，温度25-30℃，全黑暗条件下，相对湿度为40%-70%培养至出愈，诱导的培养基为：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，L，并添加精氨酸50-100mg/L、天冬氨酸50-100mg/L、谷氨酸50-100mg/L，pH5.7-5.8。所述的分株与增根：当丛生芽长到1-3cm时，从基部切成单个芽后，将其转移到生根培养基上，使单芽的根部位于生根培养基上和基质材料相接部位，且不接触组培容器，然后于自然散射条件下光照时间12-16小时/天条件下培养至牡丹根系贴组培容器底部蔓延，生根培养基为：1/2MS+6mg/LIBA+0.1mg/LNAA+2g/L活性炭。所述的生根苗移栽：将培育的生根苗使用无菌水冲洗3-5遍后在1.0-1.2%的氯化钙溶液中浸泡8-15小时后进行组合，组合后的生根苗的基部直径不大于20cm，将组合好的生根苗放入大棚种植穴中，用土：生物炭：尿素以质量比2:1:1混匀后的土壤进行回填并浇水，第一次浇水浇透。所述的生根苗养护：移栽后的生根苗在温度25-30℃，相对湿度为40%-70%，全黑暗条件下，保持5-10天，进行增加光照，牡丹展叶之后，每7-15天，喷施一次400倍的磷酸二氢钾或其它叶面肥料，连续喷施3-5次。本专利技术的优点是：本专利技术在晴天上午，取牡丹茎段，祛污剥根，浸泡冲洗消毒后，切成小段愈伤组织，在无菌条件下，接种到诱导培养基中进行诱导培育，生出丛生芽后分成单芽，转移到生根培养基上，进行增根，之后在氯化钙溶液中进行浸泡后组合移栽，移栽后全黑暗条件下进行前期培育，之后进行正常光照，展叶施肥。本专利技术采用组织培养技术，克服传统繁殖方法的缺点，在短时间内获得大量优良品种，并能够在短期内使用遗传转化技术为定向改良、培育牡丹新品种建立再生体系。进行植株再生时采用的培养基，培养过程简单易行，采用的为愈伤组织进行繁育，无变异植株的产生，诱导培育时暗处理条件下，生长素的降解过程较慢，有助于调节外植体内生长素和细胞分裂素之间的比例，从而有助于愈伤组织的器官形成，生根后移栽后成活率高，氯化钙可显著提高灌木类植物的株高，移栽后暗处理可促进植株进行扎根与适应环境。本专利技术采用牡丹外植体处理、愈伤组织诱导繁育、分株与增根、生根苗移栽、生根苗养护，可在短期内能够快速有效地将牡丹愈伤组织诱导出丛芽，并将诱导增根，移栽后成活率高，生产周期短、简便易行。具体实施方式一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，其特征在于，包括如下的步骤：牡丹外植体处理、愈伤组织诱导繁育、分株与增根、生根苗移栽、生根苗养护。所述的牡丹外植体处理：在晴天上午，取粗壮牡丹新生幼嫩带芽茎段，用软刷刷去表面污垢，，剥除外层的老根，浸入含有洗涤剂的水中浸泡8分钟，流水冲洗1.5小时，然后置于超净工作台内，用70%酒精进行消毒，用无菌水冲洗4遍，用无菌滤纸吸干表面水分，在超净工作台切成0.5-1cm小段愈伤组织。所述的愈伤组织诱导繁育:无菌条件下，将小段愈伤组织接种到愈伤组织诱导培养基中，温度25-30℃，全黑暗条件下，相对湿度为40%-70%培养至出愈，诱导的培养基为：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，L，并添加精氨酸50-100mg/L、天冬氨酸50-100mg/L、谷氨酸50-100mg/L，pH5.7-5.8。所述的分株与增根：当丛生芽长到1-3cm时，从基部切成单个芽后，将其转移到生根培养基上，使单芽的根部位于生根培养基上和基质材料相接部位，且不接触组培容器，然后于自然散射条件下光照时间12-16小时/天条件下培养至牡丹根系贴组培容器底部蔓延，生根培养基为：1/2MS+6mg/LIBA+0.1mg/LNAA+2g/L活性炭。所述的生根苗移栽：将培育的生根苗使用无菌水冲洗3-5遍后在1.0-1.2%的氯化钙溶液中浸泡12小时后进行组合，组合后的生根苗的基部直径不大于20cm，将组合好的生根苗放入大棚种植穴中，用土：生物炭：尿素以质量比2:1:1混匀后的土壤进行回填并浇水，第一次浇水浇透。所述的生根苗养护：移栽后的生根苗在温度25-30℃，相对湿度为40%-70%，全黑暗条件下，保持7天，进行增加光照，牡丹展叶之后，每10天，喷施一次400倍的磷酸二氢钾或其它叶面肥料，连续喷施4次。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，其特征在于，包括如下的步骤：牡丹外植体处理、愈伤组织诱导繁育、分株与增根、生根苗移栽、生根苗养护。

【技术特征摘要】
1.一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，其特征在于，包括如下的步骤：牡丹外植体处理、愈伤组织诱导繁育、分株与增根、生根苗移栽、生根苗养护。2.根据权利要求1所述的一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，其特征在于，所述的牡丹外植体处理：在晴天上午，取粗壮牡丹新生幼嫩带芽茎段，用软刷刷去表面污垢，，剥除外层的老根，浸入含有洗涤剂的水中浸泡5-10分钟，流水冲洗1-2小时，然后置于超净工作台内，用70%酒精进行消毒，用无菌水冲洗3-5遍，用无菌滤纸吸干表面水分，在超净工作台切成0.5-1cm小段愈伤组织。3.根据权利要求1所述的一种牡丹的诱导与再生的快速繁育方法，其特征在于，所述的愈伤组织诱导繁育:无菌条件下，将小段愈伤组织接种到愈伤组织诱导培养基中，温度25-30℃，全黑暗条件下，相对湿度为40%-70%培养至出愈，诱导的培养基为：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，L，并添加精氨酸50-100mg/L、天冬氨酸50-100mg/L、谷氨酸50-100mg/L，pH5.7-5.8。4.根据权利要求1所述的一种牡丹的诱导与再...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱梅，
申请(专利权)人：寿县正阳油用牡丹种植专业合作社，
类型：发明
国别省市：安徽,34