智利小植绥螨雄螨精包扫描电镜观察方法技术

本发明专利技术涉及智利小植绥螨雄螨精包扫描电镜观察方法，其特征是先获得容易看到精包的智利小植绥螨雄螨，然后制作并在扫描电镜下观察精包的方法，包含交配中雌雄螨的获取、雌雄螨的定型、雌雄螨的分离、雄螨的储存、精包扫描电镜标本制备与观察5部分。本发明专利技术利用十分简易巧妙的方法就可以获得智利小植绥螨雄螨精包，并能实现在扫描电镜下观察精包细微外部结构的目的，精包的获得能为扫描电镜下观察精包结构提供原材料，而扫描电镜的结果又有利于对精包其它方向的研究打下基础、提供启示。

Phytoseiulus persimilis male sperm packet scanning electron microscope method

The present invention relates to Phytoseiulus persimilis male sperm packet scanning electron microscope method, which is easy to see the first spermatophore Phytoseiulus persimilis male mites, and then making method to observe the sperm packet under the scanning electron microscope, including mating male and female mite mite acquisition, male and female stereotypes, male and female, male mites mites isolated the storage, spermatophore scanning electron microscope specimen preparation and observation of the 5 part. The invention uses very simple ingenious methods can get Phytoseiulus persimilis male sperm packet, and can realize the observation of fine structure of the objective external spermatophore in scanning electron microscope, fine package can be obtained to provide raw materials for the package structure observed by scanning electron microscope and scanning electron microscope, and the result is helpful to the study of other packages the direction of fine foundation, to provide inspiration.

【技术实现步骤摘要】
智利小植绥螨雄螨精包扫描电镜观察方法
本专利技术涉及智利小植绥螨雄螨精包扫描电镜观察方法，属于智利小植绥螨生物学基础研究领域。
技术介绍
智利小植绥螨是雌雄异体动物，须经过雌雄螨交配受精后才会产卵繁育后代，后代无论雌雄均从受精卵发育而来。现有资料对于智利小植绥螨雌雄螨交配形成受精卵的了解是：雄螨精子在进入雌螨体内前储存在精包中，雌螨把精包塞入雌螨交配孔（参考文献：梁来荣，1979年，植物保护，螨类是怎么生活的），精子再从精包慢慢释放出来，转移到受精囊和卵结合，形成受精卵。但对于智利小植绥螨雄螨精子如何进入雌螨体内、及雄螨精子是否存在二态性均没有报道，若要研究解决这一系列问题，首先需要获得精包，对精包进行观察研究。由于智利小植绥螨个体非常微小只有几百个微米，其精包只有雌雄螨交配时才出现，交配过程中雌雄螨非常紧密的叠合在一起，交配时间也非常短仅有1小时左右，而精包大小仅有十几个微米且隐藏在雌雄螨身体紧密接触的腹面之间，直观上很难看到，现有资料也没有如何获得精包的方法。因此想获得精包十分困难，对精包进行扫描电镜观察更困难，需要开拓一种获得智利小植绥螨精包并对精包进行扫描电镜观察的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种制作并在扫描电镜下观察智利小植绥螨雄螨精包的方法，应用本方法在能够更细微的观察到智利小植绥螨精包外部结构。本专利技术是获得容易看到精包的智利小植绥螨雄螨，然后制作并在扫描电镜下观察精包的方法，包含交配中雌雄螨的获取、雌雄螨的定型、雌雄螨的分离、雄螨的储存、精包扫描电镜标本制备与观察5部分，具体操作为：（1）交配中雌雄螨的获取：在显微镜下，从智利小植绥螨饲养种群内，挑出智利小植绥螨的卵单独饲养至成螨后进行雌雄螨配对，配对10分钟左右雌雄螨即可交配，从而获得交配中雌雄螨；（2）交配中雌雄螨的定型：在智利小植绥螨交配后0-120分钟内，将正处在交配过程中的雌雄个体连同饲养装置一起放置于-80℃超低温冰箱或液氮中3-5分钟，进行雌雄螨定型；（3）定型后雌雄螨的分离：定型后将雌雄螨连同饲养装置一起取出，再在显微镜下，用细毛笔从饲养装置中将交配的雌雄螨挑入载玻片上，再利用0号昆虫针和细毛笔等工具将交配的雌雄螨轻轻分开，防止破坏精包；（4）雄螨的储存：雌雄螨成功分开后，用细毛笔尖将雄螨挑出放入70%酒精于指形管内保存；（5）精包扫描电镜标本制备与观察：包含脱水、干燥、粘台、喷金与观察5个步骤，具体为：1）脱水：对储存于指形管中的雄螨进行梯度酒精脱水，酒精的浓度分别为：80％，90％，100％，先用胶头滴管将上层酒精吸出，然后再加入下一梯度的酒精，如此循环直到100％的酒精；2）干燥：将样品置于样品台上，利用真空干燥仪进行干燥2～3小时；3）粘台：在显微镜下用细毛笔将雄螨挑入至粘台上，使其腹面朝上，用昆虫针轻轻按压腹面，以确保虫体与导电胶能够紧密接触具有良好导电性能；4）喷金：利用离子溅射仪对螨全身镀金；5）电镜观察：在扫描电镜下观察精包，精包位于雄螨的导精趾下方。本专利技术利用十分简易巧妙的方法就可以获得智利小植绥螨雄螨精包，并能实现在扫描电镜下观察精包细微外部结构的目的，精包的获得能为扫描电镜下观察精包结构提供原材料，而扫描电镜的结果又有利于对精包其它方向的研究打下基础、提供启示。具体实施方式实施例智利小植绥螨精包扫描电镜观察方法本方法是人为从正在交配中的智利小植绥螨雄螨颚体上获得精包后，在扫描电镜下观察精包的方法，包含交配中雌雄螨的获取、雌雄螨的定型、雌雄螨的分离、精包的获得、扫描电镜观察5部分，具体操作为：（1）交配中雌雄螨的获取：在显微镜下，从智利小植绥螨饲养种群内，挑出智利小植绥螨的卵单独饲养至成螨后进行雌雄螨配对，配对10分钟左右雌雄螨即可交配，从而获得交配中雌雄螨；（2）交配中雌雄螨的定型：在智利小植绥螨交配后0-120分钟内，将正处在交配过程中的雌雄个体连同饲养装置一起放置于-80℃超低温冰箱或液氮中3-5分钟，进行雌雄螨定型；（3）定型后雌雄螨的分离：定型后将雌雄螨连同饲养装置一起取出，再在显微镜下，用细毛笔从饲养装置中将交配的雌雄螨挑入载玻片上，再利用0号昆虫针和细毛笔等工具将交配的雌雄螨轻轻分开，防止破坏精包；（4）雄螨的储存：雌雄螨成功分开后，用细毛笔尖将雄螨挑出放入70%酒精于指形管内保存；（5）精包扫描电镜标本制备与观察：包含脱水、干燥、粘台、喷金与观察5个步骤，具体为：1）脱水：对储存于指形管中的雄螨进行梯度酒精脱水，酒精的浓度分别为：80％，90％，100％，先用胶头滴管将上层酒精吸出，然后再加入下一梯度的酒精，如此循环直到100％的酒精；2）干燥：将样品置于样品台上，利用真空干燥仪进行干燥2～3小时；3）粘台：在显微镜下用细毛笔将雄螨挑入至粘台上，使其腹面朝上，用昆虫针轻轻按压腹面，以确保虫体与导电胶能够紧密接触具有良好导电性能；4）喷金，对螨全身镀金；5）在扫描电镜下观察精包，精包位于雄螨的导精趾下方。本文档来自技高网...

【技术保护点】
智利小植绥螨雄螨精包扫描电镜观察方法，其特征是先获得产生精包的智利小植绥螨雄螨，然后对雄螨进行一系列处理制作成能在扫描电镜下直接观察精包的方法，这其中包含交配中雌雄螨的获取、雌雄螨的定型、雌雄螨的分离、雄螨的储存、精包扫描电镜标本制备与观察5部分，具体操作为：（1）交配中雌雄螨的获取：在显微镜下，从智利小植绥螨饲养种群内，挑出智利小植绥螨的卵单独饲养至成螨后进行雌雄螨配对，配对10分钟左右雌雄螨即可交配，从而获得交配中雌雄螨；（2）交配中雌雄螨的定型：在智利小植绥螨交配后0‑120分钟内，将正处在交配过程中的雌雄个体连同饲养装置一起放置于‑80℃超低温冰箱或液氮中3‑5分钟，进行雌雄螨定型；（3）定型后雌雄螨的分离：定型后将雌雄螨连同饲养装置一起取出，再在显微镜下，用细毛笔从饲养装置中将交配的雌雄螨挑入载玻片上，再利用0号昆虫针和细毛笔等工具将交配的雌雄螨轻轻分开，防止破坏精包；（4）雄螨的储存：雌雄螨成功分开后，用细毛笔尖将雄螨挑出放入70%酒精于指形管内保存；（5）精包扫描电镜标本制备与观察：包含脱水、干燥、粘台、喷金与观察5个步骤，具体为：1）脱水：对储存于指形管中的雄螨进行梯度酒精脱水，酒精的浓度分别为：80％，90％，100％，先用胶头滴管将上层酒精吸出，然后再加入下一梯度的酒精，如此循环直到100％的酒精；2）干燥：将样品置于样品台上，利用真空干燥仪进行干燥2～3小时；3）粘台：在显微镜下用细毛笔将雄螨挑入至粘台上，使其腹面朝上，用昆虫针轻轻按压腹面，以确保虫体与导电胶能够紧密接触具有良好导电性能；4）喷金：利用离子溅射仪对螨全身镀金；5）电镜观察：在扫描电镜下观察精包，精包位于雄螨的导精趾下方。...

【技术特征摘要】
1.智利小植绥螨雄螨精包扫描电镜观察方法，其特征是先获得产生精包的智利小植绥螨雄螨，然后对雄螨进行一系列处理制作成能在扫描电镜下直接观察精包的方法，这其中包含交配中雌雄螨的获取、雌雄螨的定型、雌雄螨的分离、雄螨的储存、精包扫描电镜标本制备与观察5部分，具体操作为：（1）交配中雌雄螨的获取：在显微镜下，从智利小植绥螨饲养种群内，挑出智利小植绥螨的卵单独饲养至成螨后进行雌雄螨配对，配对10分钟左右雌雄螨即可交配，从而获得交配中雌雄螨；（2）交配中雌雄螨的定型：在智利小植绥螨交配后0-120分钟内，将正处在交配过程中的雌雄个体连同饲养装置一起放置于-80℃超低温冰箱或液氮中3-5分钟，进行雌雄螨定型；（3）定型后雌雄螨的分离：定型后将雌雄螨连同饲养装置一起取出，再在显微镜下，用细毛笔从饲养装置中将交配的雌雄螨挑入载...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜晓环，王伯明，
申请(专利权)人：首伯农北京生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11