一种提高西罗莫司发酵产量的方法技术

本发明专利技术提供了一种提高西罗莫司发酵产量的方法，在本发明专利技术中，通过添加不加同种类的碳源和氮源来保证前期菌体的生产及后期产物的合成，并且通过添加无机盐对吸水链霉菌代谢系统进行调控，适时的添加前体物质及小分子化合物来强化产物合成的代谢通路；同时对发酵工艺进行优化，在发酵过程中补料流加强化产物的合成途径，通过本发明专利技术所述方法得到的西罗莫司发酵液产量提高60％～90％，降低了采用发酵法制备西罗莫司的生产成本。

A method to improve the fermentation yield of sirolimus

The present invention provides a method for improving the fermentation yield of sirolimus, in the invention, the carbon source and nitrogen source added without the same kind of product to ensure the production and synthesis of late pre strain, and the addition of inorganic salts on the metabolism of Streptomyces hygroscopicus system regulation, timely adding precursor substances and small molecules to strengthen the metabolic pathway of compounds synthesized; and to optimize the fermentation process, feeding flow pathway strengthening products in the fermentation process, the fermentation liquid of sirolimus yields through the method of the invention is increased by 60% ~ 90%, reduce the preparation of sirolimus by fermentation method production cost.

【技术实现步骤摘要】
一种提高西罗莫司发酵产量的方法
本专利技术涉及生物制药中的发酵工程
，尤其涉及一种提高西罗莫司发酵产量的方法。
技术介绍
西罗莫司(Sirolimus，又称雷帕霉素，Rapamycin)是由吸水链霉菌(streptomycesgroscopicus)发酵产生的一种含氮三烯大环内酯新型强效免疫抑制剂，可用于肾移植的抗排斥反应和自身免疫性疾病的治疗，其分子式C51H79NO13，分子量为914，分子结构式如下式(1)所示：惠氏制药研制的西罗莫司口服液于1999年10月首次在美国上市，并且获得FDA批准，允许其作为一种安全性较高的药物用于临床防治肾移植排斥反应。随后西罗莫司片剂(1mg)在美国上市成功，获准与环孢菌素、类固醇联合用于肾移植病人的抗排异。之后，FDA又批准本Wyeth公司的免疫抑制剂Rapamune(Ⅰ)(sirolimus)的新标签，用于使用鸡尾酒疗法病人中撤除环孢霉素后预防肾移植排斥的维持使用。2000年雷帕霉素产品相继在英国、德国、丹麦、挪威、瑞士等国上市，用于成人肾移植抗排斥。2001年，奥地利、德国、丹麦和瑞典分别获批与CsA、皮质甾类激素合用于肾移植病人抗排本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高西罗莫司发酵产量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)：将西罗莫司发酵菌丝体斜面接种于种子培养基中，26～30℃，200～300rmp的条件下在摇床上培养40～50h；步骤(2)：按照2％～15％的接种量接种于一级种子罐的种子培养基上，温度26～30℃，摇床转速200～300rmp，罐压0.03～0.05Mpa，通气量为1:0.5～1:1.5vvm，培养时间20～28h；步骤(3)：按照2％～15％的接种量接种于发酵培养基后置入发酵罐，温度26～30℃，通过改变转速的方式维持发酵罐内的溶解氧浓度保持在设定值之上，罐压0.03～0.05Mpa，通气量为1:0.5～1:1.5vvm，...

【技术特征摘要】
1.一种提高西罗莫司发酵产量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)：将西罗莫司发酵菌丝体斜面接种于种子培养基中，26～30℃，200～300rmp的条件下在摇床上培养40～50h；步骤(2)：按照2％～15％的接种量接种于一级种子罐的种子培养基上，温度26～30℃，摇床转速200～300rmp，罐压0.03～0.05Mpa，通气量为1:0.5～1:1.5vvm，培养时间20～28h；步骤(3)：按照2％～15％的接种量接种于发酵培养基后置入发酵罐，温度26～30℃，通过改变转速的方式维持发酵罐内的溶解氧浓度保持在设定值之上，罐压0.03～0.05Mpa，通气量为1:0.5～1:1.5vvm，培养时间20～28h；步骤(4)：在发酵进行至20～28h时补加小分子化合物，在发酵培养至40～52h时流加第一补料，发酵培养至于68～76h时流加第二补料，当培养时间至116～122h时发酵结束。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)及步骤(2)中的种子培养基的组成为：玉米淀粉1.0～2.0g/L，葡萄糖0.5～1.0g/L，黄豆饼粉1.0～2.0g/L，酵母抽提物0.5～1.0g/L，KH2PO40.01～0.03g/L，K2HPO40.01～0.03g/L，所述种子培养基pH呈6.5～7.5。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的发酵培养基的组成为：玉米淀粉1.0～3.0g/L，...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹峥，付静，成梁，杨亮，朱程琳，郑缘，徐新冬，陆敏珠，
申请(专利权)人：无锡福祈制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32