通过罗杰斯无性穗霉固体发酵处理香青藤制备化合物的方法及应用技术

本发明专利技术公开一种通过罗杰斯无性穗霉(Clonostachys rogersoniana 828H2)固体发酵处理香青藤(Illigera aromatica)产生新的抗肿瘤细胞毒活性化合物dimericilligerates E‑F的方法。即：中药材香青藤经罗杰斯无性穗霉固体发酵，经过超声提取，过滤，浓缩后得到粗提物，对粗提物进行分离纯化得到两个化合物，经NMR和HR‑ESI‑MS鉴定它们为dimericilligerates E‑F。dimericilligerates E‑F具有显著的抗肿瘤细胞毒活性。该方法是一种高效的，创新性的，条件温和的，绿色无污染的，易扩大化生产的，操作设备简单的产生抗肿瘤细胞毒活性的新化合物dimericilligerates E‑F的方法；dimericilligerates E‑F是一类新的药物先导化合物，为进一步的药物开发提供了理论基础；同时，该发酵方法是一种香青藤炮制的有效方法。

Preparation and application of the compounds from sweet scented Ivy treated by solid state fermentation of Rodgers

The invention discloses a Rodgers clone spike (Clonostachys rogersoniana by Trichoderma 828H2) solid fermentation treatment of sinomenine (Illigera incense aromatica) method to produce new antitumor cytotoxic compounds dimericilligerates E F. Namely: Chinese herbal incense Ivy by Rodgers ear by asexual solid fermentation, after ultrasonic extraction, filtration, concentration to obtain crude extract of crude extracts were isolated and purified two compounds by NMR and HR ESI MS identified them as dimericilligerates E F. Dimericilligerates E F has significant anti tumor cytotoxic activity. This method is an efficient, innovative, mild conditions, pollution-free, easy to expand production, method of anti tumor cytotoxic activity to produce simple operating equipment of the compound dimericilligerates E F; dimericilligerates E F is a kind of new drug lead compounds, provide the theoretical basis for further drug development; at the same time, the fermentation is an effective method for processing the fragrant ivy.

【技术实现步骤摘要】
通过罗杰斯无性穗霉固体发酵处理香青藤制备化合物的方法及应用
本专利技术涉及中药材的微生物发酵炮制领域，具体来说是建立了一种通过土壤内生真菌罗杰斯无性穗霉(Clonostachysrogersoniana828H2)固体发酵处理香青藤(Illigeraaromatica)产生抗肿瘤细胞毒二聚烷dimericilligeratesE-F的方法。本专利技术使用的微生物罗杰斯无性穗霉：[Clonostachyssp828H2(保藏号：CGMCCNo.12073)]保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏时间：2016年1月15日。
技术介绍
：香青藤(IlligeraaromaticaS.Z.HuangetS.L.Mo)是莲叶桐科(Hernandiaceae)青藤属(IlligeraBI.)植物，主要生长于广西和云南等地，是一种特色民间药用植物。发酵是传统中药加工炮制的重要方法之一，在我国具有悠久的历史。中药通过发酵炮制可达到提高中药药效、改变药性、降低毒副作用等目的。《本草纲目》记载：“古人用麴，多是造酒之麴。后医乃造神麴，专以供本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种通过罗杰斯无性穗霉固体发酵处理香青藤获得的化合物dimericilligerates E‑F，其特征在于化合物dimericilligerates E‑F的化学结构式如下：

【技术特征摘要】
1.一种通过罗杰斯无性穗霉固体发酵处理香青藤获得的化合物dimericilligeratesE-F，其特征在于化合物dimericilligeratesE-F的化学结构式如下：。2.一种通过罗杰斯无性穗霉固体发酵制备化合物dimericilligeratesE-F的方法，其特征在于中药材香青藤经罗杰斯无性穗霉固体发酵，经过超声提取，过滤，浓缩后得到粗提物，对粗提物进行分离纯化得到两个化合物NMR和HR-ESI-MS，经鉴定它们为dimericilligeratesE-F。3.根据权利要求2所述的通过罗杰斯无性穗霉固体发酵制备化合物dimericilligeratesE-F的方法，其特征在于按如下步骤进行固体发酵处理香青藤：（1）将拟用微生物罗杰斯无性穗霉首先进行活化，即：将罗杰斯无性穗霉接种到经过121°C高温灭菌处理的PDA斜面培养基后，于恒温培养箱中培养3-7d后，置于4°C冰箱中；（2）将活化的菌种接到PDB种子培养基中，于恒温摇床中培养3-7d；（3）取干燥的中药材香青藤粉碎后，取适量的药材粉末置于锥形瓶中，加入自来水浸润后，观察药材的湿润度；将装有药材的锥形瓶加塞包装后置于121°C高温灭菌箱中灭菌30min，取出后将药材冷却；（4）将步骤（2）的种子培养基在无菌环境下接种到经过步骤（3）前处理的香青藤上，加塞包装后置于恒温培养箱或室温中培养20-60d后取出；（5）经微生物罗杰斯无性穗霉发酵后的香青藤经过甲醇溶液超声提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡乐，罗伟，丁中涛，董建伟，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：云南,53