The present invention relates to a method for rapid determination of sterilizing effect and a biological indicator. The method is to detect the ATP of the spores directly after sterilization, and detect the spores' ATP by bioluminescence, and the sterilization effect can be determined in a few minutes. This method directly detects the ATP from the surviving spore, which is more accurate than the indirect method of detecting the related parameters of the spores. The biological indicator is based on this method, which contains spore and spore ATP detection reagents, which can provide an evaluation result of the sterilization process in about 5 minutes.
【技术实现步骤摘要】
快速确定灭菌效果的方法和生物指示剂
:本专利技术涉及一种快速确定灭菌效果的方法。本专利技术还涉及一种快速确定灭菌效果的生物指示剂。
技术介绍
:本领域众所周知,微生物芽孢(endospores,亦或芽胞)与绝大多数其他类型的微生物相比,更难灭活。测定经灭菌处理后的芽孢的存活情况,是确定灭菌是否彻底最有力的证据。生物指示剂已被广泛用于测试和(或)确定灭菌方法的有效性。典型地,将含有微生物芽孢的生物指示剂暴露于某种选定的灭菌剂或灭菌方法,然后将暴露处理过的芽孢置于能够维持芽孢发芽和微生物生长的培养环境中,从而确定暴露处理过的芽孢的存活率。目前市售的生物指示剂主要可以分为常规生物指示剂和快速生物指示剂。常规生物指示剂是依据芽孢恢复生长时,新陈代谢产生酸性代谢产物引起培养基pH变化,通过添加pH指示剂如溴甲酚紫,根据其颜色变化来判读结果,微生物培养时间为24-48h。常规生物指示剂结果可靠,但耗时过久,无法实现快速判读,无法满足医院迫切需要知道灭菌结果的需求,在临床应用中有极大的限制。快速生物指示剂主要依据芽孢恢复生长时产生的α-葡萄糖苷酶,水解底物产生荧光物质,通过检测 ...
【技术保护点】
一种快速确定灭菌效果的方法,其特征是通过检测芽孢ATP确定灭菌处理后存活芽孢的量。
【技术特征摘要】
1.一种快速确定灭菌效果的方法,其特征是通过检测芽孢ATP确定灭菌处理后存活芽孢的量。2.权利要求1所述的方法,是通过生物发光法检测芽孢ATP。3.权利要求2所述的方法,其特征是:直接检测灭菌处理后芽孢的发光值,根据发光值确定芽孢的存活情况评价灭菌的效果。4.一种快速确定灭菌效果的生物指示剂,由芽孢和芽孢ATP检测试剂组成,所述芽孢是活体芽孢。5.权利要求4所述的生物指示剂,所述芽孢选自如下:应用于环氧乙烷灭菌的芽孢:萎缩芽孢杆菌ATCC9372、NCTC10073、NCIMB8058、DSM2277、NRRLB-4418或CIP77.18的芽孢;应用于湿热灭菌的芽孢:嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC7953(NCTC10007、DSM22和CIP52.81)或ATCC12980(同NRRLB-4419)的芽孢;应用于干热灭菌的芽孢:萎缩芽孢杆菌CIP77.18、NCIMB8058、DSM675、NRRLB-4418和ATCC9372或者枯草芽孢杆菌DSM13019的芽孢;应用于低温蒸汽甲醛灭菌的芽孢:嗜热脂肪地芽孢杆菌NCIB8224、DSM6790、ATCC10149或ATCC12980的芽孢。6.权利要求4所述的生物指示剂,所述芽孢ATP检测试剂含有芽孢ATP释放剂和生物发光物质。7.权利要求6所述的生物指示剂,所述芽孢ATP释放剂为表面活性剂;所述生物发光物质包括萤光素酶和D-萤光素。8.权利要求4所述的生物指示剂,所述芽孢ATP检测试剂按照以下A或B或C任一配制:A使用新鲜制备的高纯水配制100mL150-250mM的N-2-羟乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸(HEPES)溶液;加入0.15-1.20g醋酸氯己定,1.5-2.5mL曲拉通X-100(TritonX-100),0.3-0.5g六水合氯化镁,0.7-1.0g二水合乙二胺四乙酸二钠盐(ED...
【专利技术属性】
技术研发人员:羌维兵,童明庆,张怡,
申请(专利权)人:江苏中新医药有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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