基于毛细管电泳荧光SSR指纹图谱鉴别刺槐品种的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于毛细管电泳荧光SSR指纹图谱鉴别刺槐品种的方法，构建方法步骤包括：(1)刺槐总DNA提取，(2)利用SSR引物进行PCR扩增，(3)PCR扩增产物毛细管电泳，(4)指纹图谱构建；其中：步骤(2)利用公开的四对SSR引物进行刺槐DNA的PCR扩增，所得产物经毛细管电泳检测所得的带型结果，组合形成每个品种或者无性系的SSR指纹图谱，根据指纹图谱的差异，再区分无性系。本发明专利技术可以快速、准确、高效的从分子水平为刺槐品种鉴定、新品种选育和遗传改良提供可靠的依据，为中国刺槐遗传资源保存、评价与利用提供参考。

【技术实现步骤摘要】
基于毛细管电泳荧光SSR指纹图谱鉴别刺槐品种的方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种基于毛细管电泳荧光SSR指纹图谱鉴别刺槐品种的方法。
技术介绍
刺槐(RobiniapseudoacaciaL.)为豆科(Leguminosae)刺槐属(Robinia)阔叶乔木，耐干旱、耐瘠薄、耐轻度盐碱、抗污染能力强、自然更新能力强，是荒山造林和水土保持先锋树种，且具有观赏、材用、蜜源和饲用价值。刺槐作为外来物种，在我国已经栽培了近120年，中国各地区栽培的刺槐无性系来源记载不清，遗传关系不明，遗传多样性状况信息甚少，同物异名现象时有发生，急需系统开展刺槐无性系遗传多样性分析和指纹图谱构建，对于下一步开展新品种选育、遗传改良和品种鉴定具有重要意义。传统的刺槐品种鉴定主要依靠营养器官和生殖器官的形态性状差异，受环境和生长阶段的影响很大，该方法无法有效的在幼树早期进行应用，并且对于表型性状相似或亲缘关系很近的品种，极易出现无意识的混种、混系、混株现象，或者有意识的侵权现象，给生产、科研和植物新品种保护等工作带来极大的不方便，所以利用SSR标记从分子水平进行品种鉴定稳定性高、重复性好、更有说服力本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于毛细管电泳荧光SSR指纹图谱的构建方法，其特征是：包括以下步骤：(1)刺槐总DNA提取；(2)利用SSR引物进行PCR扩增：以步骤(1)提取的刺槐总DNA样品为模板，采用如下四对引物进行SSR‑PCR扩增，所述四对引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1‑8所示；(3)PCR扩增产物毛细管电泳；(4)根据步骤(3)中的电泳结果构建刺槐SSR指纹图谱。

【技术特征摘要】
1.一种基于毛细管电泳荧光SSR指纹图谱的构建方法，其特征是：包括以下步骤：(1)刺槐总DNA提取；(2)利用SSR引物进行PCR扩增：以步骤(1)提取的刺槐总DNA样品为模板，采用如下四对引物进行SSR-PCR扩增，所述四对引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1-8所示；(3)PCR扩增产物毛细管电泳；(4)根据步骤(3)中的电泳结果构建刺槐SSR指纹图谱。2.如权利要求1所述的构建方法，其特征是：所述步骤(2)中的扩增体系采用10μL体系：DNA(20ng·μL-1)0.5μL，灭菌去离子水4.3μL，2×TaqPCRMasterMix5μL，正反引物各0.1μL。3.如权利要求1所述的构建方法，其特征是：所述步骤(2)中PCR扩增的反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸40s，14个循环；95℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸40s，20个循环；72℃延伸10min。4.如权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛秀红，荀守华，郑勇奇，孙百友，张元帅，韩丛聪，董玉峰，
申请(专利权)人：山东省林业科学研究院，中国林业科学研究院林业研究所，费县国有大青山林场，
类型：发明
国别省市：山东,37