一种肉葡萄球菌合成培养基及其发酵液的制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种肉葡萄球菌合成培养基及其发酵液的制备方法及应用。其中肉葡萄球菌(

【技术实现步骤摘要】
一种肉葡萄球菌合成培养基及其发酵液的制备方法与应用
本专利技术属于微生物培养基和发酵
，涉及一种肉葡萄球菌(Staphylococcuscarnosus)合成培养基及其发酵液的制备方法及应用。
技术介绍
葡萄球菌（Staphylococcus）为平均直径在0.5-1.0μm的革兰氏阳性菌，因其堆叠起来的形状类似葡萄串珠而得名，一般不具有致病性。代表种有表皮葡萄球菌（Staphylococcusepidermidis）、金黄色葡萄球菌（StaphyloccocusaureusRosenbach）和腐生葡萄球菌（Staphyloccocussaprophyticus）等。长期以来，人们将葡萄球菌用于干肠的发酵。起初，它们被认为是微球菌，但事实证明，这些微球菌被错误分类了，实际上是葡萄球菌。基于DNA/DNA杂交，生化特性和细胞壁组成，这些葡萄球菌形成了一种新的物种，命名为肉葡萄球菌（Staphylococcuscarnosus），其可以从肉类发酵产物中分离出来，并于1950年开始被用作发酵起始剂。肉葡萄球菌（S.carnosus）因为其不产生任何溶血素蛋白、毒素、凝固酶、蛋白质A或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组质粒pBT2‑ET‑5R‑EGFP的构建方法，其特征在于按如下的步骤进行：穿梭载体pBT2‑ET‑5R‑EGFP：以pBT2质粒为骨架，在其

【技术特征摘要】
1.一种重组质粒pBT2-ET-5R-EGFP的构建方法，其特征在于按如下的步骤进行：穿梭载体pBT2-ET-5R-EGFP：以pBT2质粒为骨架，在其KpnI和NheI克隆位点之间插入一个tat-egfp融合基因制备得到；该EGFP融合基因的启动子为肉葡萄球菌ATCC51365的eftu基因的启动子序列（GenBankAccessionNo:7551602），信号肽采用肉葡萄球菌ATCC51365的efeB基因的tat信号肽序列（GenBankAccessionNo:AM295250），并在后续的EGFP基因（GenBankAccessionNo:AF302837）的N-末端加入一个含有5个连续精氨酸序列（5R）的链接肽linker；其中从tat信号肽起始密码子到EGFP蛋白的碱基序列参照图5，其碱基序列如SEQIDNO.1所示，氨基酸序列参照图6，如SEQIDNO.2所示。2.一种肉葡萄球菌合成培养基，其特征在于，按1L体积计算，是由如下重量的原料组成：无水葡萄糖10~50g，赖氨酸0.1~1.5g，缬氨酸1.0~5.0g，甘氨酸0.1~1.5g，精氨酸1.0~5.0g，脯氨酸1.0~5.0g，谷氨酸5~10.0g，胱氨酸0.1~1.5g色氨酸0.1~0.5g，盐酸硫胺素1.0~3.0mg，泛酸钙1.0~3.0mg，烟酸1.0~3.0mg，硫酸锰1.0~3.0mg，磷酸二氢钾0.1~1.0g，七水硫酸镁0.1~0.8g，七水硫酸亚铁0.005~0.010g，三水磷酸氢二钾1.0~5.0g，3-(N-吗啉)丙磺酸6~10g，剩余为水。3.根据权利要求2所述的肉葡萄球菌合成培养基，其特征在于：所述肉葡萄球菌合成培养基的pH=6.5~8.0。4.根据权利要求2所述的肉葡萄球菌合成培养基，其特征在于：无水葡萄糖40g，赖氨酸1.0g，缬氨酸3.0g，甘氨酸1.0g，精氨酸2.0g，脯氨酸2.0g，谷氨酸7.0g，色氨酸0.4g，胱氨酸1.0g，泛酸钙2mg，烟酸2mg，盐酸硫胺素2mg，硫酸锰2mg，磷酸二氢钾0.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：高强，唐巧巧，张变强，朱燕，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津,12