The invention discloses a malt oligosaccharide trehalose synthetase mutant and its application, which belongs to the field of genetic engineering and enzyme engineering. The present invention provides a series of mutants of malt oligosaccharide - based trehalose synthase with increased enzyme activity.
【技术实现步骤摘要】
一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用
本专利技术涉及一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程
技术介绍
海藻糖(Trehalose)由两个吡喃葡萄糖分子通过α,α-1,1-糖苷键连接而成，是一种稳定的非还原性寡糖，同时具有高度安全性和有良好的稳定性，被广泛应用于医药、食品、化妆和农业等领域。自1995年以来，日本、美国和欧盟等先后批准海藻糖可以用作食品添加剂。2005年，我国卫生部正式批准海藻糖为新资源食品。1993年日本林原生化研究所首次发现麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)，以液化淀粉作为底物，这两种酶协同作用，可以生成海藻糖，并且率先实现了海藻糖工业化生产。目前，我国已有公司开始生产海藻糖，但产品性能、产率与进口产品存在一定差距，并且生产成本一直居高不下。更为严峻的是，为了迎合市场需求，海藻糖售价不断下降，给海藻糖生产带来了巨大挑战和压力。因此如何提升海藻糖产率，实现海藻糖低成本规模化制备，使其走向大众消费者的餐桌成为学术界和产业界关注的热点。目前，工业化生产海藻糖主要通过两种方...
【技术保护点】
一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，包含了将来源于嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第81、263、284、432、439、583、585、586、611或615位的氨基酸中的一个或多个进行取代得到的突变体。
【技术特征摘要】
1.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，包含了将来源于嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobusacidocaldarius)的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第81、263、284、432、439、583、585、586、611或615位的氨基酸中的一个或多个进行取代得到的突变体。2.根据权利要求1所述的一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，所述突变体是将第81位置的甘氨酸(Gly)变成丝氨酸(Ser)，突变体命名为G81S；或，所述突变体是将第263位置的谷氨酸(Glu)变成甘氨酸(Gly)，突变体命名为E263G；或，所述突变体是将第284位置的苯丙氨酸(Phe)变成缬氨酸(Val)，突变体命名为F284V；或，所述突变体是将第432位置的甘氨酸(Gly)变成天冬氨酸(Asp)，突变体命名为G432D；或，所述突变体是将第439位置的苏氨酸(Thr)变成丙氨酸(Ala)，突变体命名为T439A；或，所述突变体是将第583位置的苯丙氨酸(Phe)变成亮氨酸(Leu)，突变体命名为F583L；或，所述突变体是将第585位置的谷氨酰胺(Gln)变成精氨酸(Arg)，突变体命名为Q585R；或，所述突变体是将第586位置的甘氨酸(Gly)变成天冬氨酸(Asp)，突变体命名为G586D；或，所述突变体是将第611位置的异亮氨酸(Ile)变成苏氨酸(Thr)，突变体命名为I611T；或，所述突变体是将第615位置的丝氨酸(Ser)变成甘氨酸(Gly)，突变体命名为S615G；或，所述突变体是将第284位置的苯丙氨酸(Phe)变成缬氨酸(Val)，同时将第439位置的苏氨酸(Thr)变成丙氨酸(Ala)，得到F284V/T439A；或，所述突变体是将第284位置的苯丙氨酸(Phe)变成缬氨酸(Val)，同时将第586位置的甘氨酸(Gly)变成天冬氨酸(Asp)，得到F284V/G586D；或，所述突变体是将第439位置的苏氨酸(Thr)变成丙氨酸(Ala)，同时将第586位置的甘氨酸(Gly)变成天冬氨酸(Asp)，得到T439A/G586D；或，所述突变体是将第439位置的苏氨酸(Thr)变成丙氨酸(Ala)，同时将第585位置的谷氨酰胺(Gln)变成精氨酸(Arg)，得到T439A/Q585R；或，所述突变体是将第432位置的甘氨酸(Gly)变成天冬氨酸(Asp)，同时将第586位置的甘氨酸(Gly)变成天冬氨...
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