产耐中高温纤维素酶菌株及其筛选方法技术

本发明专利技术提供一种一株产耐中高温纤维素酶菌株的筛选方法，以富硒温泉为原料分离富集得到嗜热细菌，经富集培养、分离纯化得到纤维素分解菌，经刚果红染色鉴定和液体发酵获得纤维素酶菌株N1214;所述菌株保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC M 2017142，所述菌株为产耐中高温纤维素酶菌株N1214，分类命名为：土芽孢杆菌

Medium and high temperature resistant Cellulase Producing Strain and its screening method

The invention provides a strain producing cellulase strain in high temperature resistant screening method, in order to get rich hot springs as raw materials for separation and enrichment of thermophilic bacteria, by enrichment culture, isolation and purification of cellulose decomposing bacteria obtained by Congo red staining and liquid fermentation of cellulase was strain N1214; the strain is preserved in the Wuhan University Chinese type culture collection the center, CCTCC M collection number 2017142, the strain was resistant to high temperature cellulase strain N1214, named bacillus: soil classification

【技术实现步骤摘要】
产耐中高温纤维素酶菌株及其筛选方法
：本专利技术属于微生物
，具体涉及一株产耐中高温纤维素酶菌株及其筛选方法。
技术介绍
：纤维素材料是自然界中最丰富的可再生资源。利用现代生物技术将纤维素材料转化为乙醇等液体燃料，不仅可以作为新资源新能源为人类造福，缓解或解决化石能源对环境污染的问题，同时也可以实现对农业剩余资源的高效利用，现已受到世界各国的普遍重视。因此，筛选具有高活性纤维素酶的微生物菌株以及相关研究是当前研究的热点和难点。目前研究较多的常用的产纤维素酶微生物是常温、中温丝状真菌，它们能够产生完整的纤维素酶系，可以将结晶纤维素完全降解为葡萄糖，如木霉（Trichodermasp.）、青霉（Penicilliumsp.）、腐质霉（Humicolasp.）等等。上述菌株产生的纤维素酶大多需要在50℃以下发挥较好的效能，而在较高的温度下容易失活。而对细菌的研究很少有报道，特别是耐中高温的细菌产纤维素酶报道较少；由于细菌所产生的纤维素酶一般最适pH为中性至偏碱性，近20年来，随着中性纤维素酶和碱性纤维素酶在棉织品水洗整理工艺及洗涤剂工业中的成功应用，细菌纤维素酶制剂已显示出良好的应用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株产耐中高温纤维素酶菌株,其特征是所述菌株保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC M 2017142。

【技术特征摘要】
1.一株产耐中高温纤维素酶菌株,其特征是所述菌株保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCCM2017142。2.根据权利要求1所述一株产耐中高温纤维素酶菌株，其特征是所述菌株为产耐中高温纤维素酶菌株N1214，分类命名为：土芽孢杆菌Geobacillussp.。3.根据权利要求1或2所述一株产耐中高温纤维素酶菌株，其特征是所述菌株16srDNA序列如序列表中SEQIDNO.1所示；ＮＣＢＩ序列号为KY433297；控制生长温度为50-60℃、pH值7.0-8.5，酶活力为30.2U/mL。4.如权利要求1所述的一株产耐中高温纤维素酶菌株的筛选方法，其特征是所述产耐中高温纤维素酶菌株是以富硒温泉为原料分离富集得到嗜热细菌，经富集培养、分离纯化得到纤维素分解菌，经刚果红染色鉴定和液体发酵获得纤维素酶菌株N1214。5.根据权利要求4所述的一株产耐中高温纤维素酶菌株的筛选方法，其特征是包括如下方法步骤：（1）获取样品，将富硒温泉分离富集得嗜热细菌样品，采集后装入无菌离心管中，4-6h之内于2-6°C保存运输，低温保藏为温泉水菌种样品；(2)富集培养，将（1）步温泉水菌种样品加入TYE培养基中进行培养，为培养液，将培养液稀释涂布于TYE固体平板上，在55-60℃下，培养36-48h后进行划线分离，重复若干次，得到单菌落，将单菌落经CMC-刚果红平板筛选培养基中进行培养；为纤维素酶分解菌；（3）分离纯化，利用CMC-刚果红平板筛选培养基分离筛选得到若干株纤维素分解菌，经DNS法分离纯化，获得耐中高温纤维素酶菌株N1214。6.根据权利要求5所述的一株产耐中高温纤维素酶菌株的筛选方法，其特征是（2）步富集培养，是将（1）步温泉水菌种样品5mL加入50mLTYE培养基中，于250mL锥形瓶中,以160rpm转速，于55-60℃下，培养24-36h，得培养液，将培养液适当稀释并涂布于TYE固体平板上，在55-60℃下，培养36-48h后，进行划线分离，重复若干次，得到单菌落。7.根据权利要求5所述的一株产耐中高温纤维素酶菌株的筛选方法，其特征是（2）步富集培养，所述将单菌落经CMC-刚果红平板筛选...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘紫英，袁斌，吕美云，冷桂华，
申请(专利权)人：宜春学院，
类型：发明
国别省市：江西,36