用于免疫疗法的纳米颗粒组合物和方法技术

本发明专利技术提供用于免疫疗法的组合物和方法，所述组合物包括用于诱导抗原特异性T细胞的贮存稳定的药物组合物。此类组合物被用作人工抗原呈递细胞(aAPC)的组分，以便为患者提供用于呈递抗原(例如，肿瘤抗原)的复合物和/或T细胞共刺激分子。

Nanoparticle compositions and methods used for immunotherapy

The present invention provides a composition and method for immunotherapy, and the composition includes a stable drug composition for inducing antigen specific T cells. Such compounds are used as components of artificial antigen presenting cells (aAPC), so as to provide patients with complexes and / or T cell costimulatory molecules for presenting antigens (e.g. tumor antigens).

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于免疫疗法的纳米颗粒组合物和方法优先权申请的引用本申请要求2014年12月24日提交的美国临时申请号62/096,725的优先权，所述临时申请在此以引用的方式整体并入。专利
本专利技术涉及呈递用于调节免疫细胞的活性的生物配体的纳米颗粒组合物。背景抗原呈递细胞(APC)是加工并展现在其表面上具有主要组织相容性复合物(MHC)蛋白的复合物中的抗原肽的细胞。效应细胞(诸如T细胞)通过细胞表面受体(诸如T细胞受体(TCR))识别这些肽-MHC(pMHC)复合物。树突状细胞(DC)是抗原呈递细胞的实例，所述抗原呈递细胞可被刺激以有效呈递抗原并支持免疫效应细胞的扩增，从而激活对抗原的细胞毒性应答。在一些免疫疗法中，DC从患者获得并且使用抗原进行脉冲或用病毒载体转染。在输注回到患者中之后，这些激活的细胞向效应淋巴细胞(例如，CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞)呈递肿瘤抗原。在成功之后，此疗法引发针对表达抗原(包括肿瘤抗原)的细胞的细胞毒性应答。然而，仍然存在对于可有效用于免疫疗法(包括针对癌症的抗原特异性免疫疗法)的贮存稳定的药物组合物的需要。本公开满足这些和其他目标。专利技术简述本专利技术提供用于免疫疗法的组合物和方法，所述组合物包括用于在患者中诱导抗原特异性T细胞的贮存稳定的药物组合物。此类组合物可用于治疗例如癌症和感染性疾病。在一些方面，所述组合物是包含药学上可接受的珠粒或颗粒的人工抗原呈递细胞(aAPC)，所述珠粒或颗粒在其表面上具有抗原呈递复合物和任选的T细胞共刺激信号，以便为患者提供在适当的情况下呈递用于激活抗原特异性T细胞(例如，细胞毒性T细胞)的一种或多种抗原(例如，肿瘤抗原)的分子复合物。所述珠粒或颗粒被设计来提供药效学优点，包括循环特性、生物分布、降解动力学以及抗原特异性激活和/或原初的和/或先前激活的T细胞的扩增。物理参数包括大小、表面电荷、多分散指数、聚合物组成、配体缀合化学物质、配体密度、配体比率等等。在一些方面，本专利技术提供分布到靶组织(诸如淋巴结、脾和肿瘤部位)的纳米级aAPC(例如，小于200nm)。本文所述的纳米aAPC平台可针对各种免疫疗法应用进行微调。在一些实施方案中，aAPC的范围是约20nM至约200nM，并且可容纳5至约1500个配体/颗粒，包括在一些实施方案中，小于约150个配体/颗粒或小于约100个配体/颗粒，诸如约5至约90个配体/颗粒。在一些实施方案中，纳米aAPC具有(平均而言)缀合到其表面的小于约150个配体或小于约100个配体，从而在不损失活性和/或效能的情况下，避免由于表面上充足的配体而引起的空间约束。在一些实施方案中，所述T细胞共刺激信号是抗CD28抗体或其抗原结合部分，其可包含人类重链氨基酸序列，包括选自IgG、IgD、IgA或IgM同种型的序列。在一些实施方案中，免疫球蛋白序列包括人类IgG恒定序列和可变序列。框架(FW)序列可被修饰以含有重要的或所需的鼠框架残基，以便维持抗原结合位点的完整性。互补决定区(CDR)可基于鼠抗体氨基酸序列(例如，9.3mAb)或其他CD28结合序列，并且所述序列可结合具有9.3mAb的竞争表位。在一些实施方案中，抗体重链是人类IGHV4(例如，IGHV4-59)种系FW的变体。在一些实施方案中，抗体包含轻链并且轻链是人类IGKV4-01FW的变体。抗体可包含恒定区，并且在一些实施方案中，恒定区是人类IgG4恒定区或其变体。共刺激分子可缀合到具有抗原呈递分子复合物的固体载体，以便诱导抗原特异性T细胞。抗原呈递分子复合物可包括包含抗原结合裂隙的MHCI类和/或II类复合物或其部分。在一些实施方案中，分子复合物包含一种或多种HLA氨基酸序列(例如，包含HLA或其抗原呈递部分的细胞外结构域)，所述HLA氨基酸序列可含有另外的序列，诸如免疫球蛋白序列或其他多聚化(例如，二聚化)或稳定化序列。在一些实施方案中，HLA-Ig二聚化融合体提供稳定性、结合亲和力和/或T细胞激活方面的优点。因此，在一些实施方案中，本专利技术提供一种用于向T细胞呈递抗原的珠粒或颗粒缀合的分子复合物，其中所述复合物包含形成I类或II类抗原结合裂隙的氨基酸序列或其部分。抗原呈递复合物的氨基酸序列可包括与异源序列的融合体，以便提供例如稳定性、亲和力和空间优点。在一些实施方案中，异源序列包括免疫球蛋白序列。在一些实施方案中，分子复合物包含融合到异源序列(诸如免疫球蛋白序列)的HLA(例如，HLA-A2)氨基酸序列。在一些实施方案中，免疫球蛋白序列包括人类重链免疫球蛋白序列(例如，IGVH4)，其可包括免疫球蛋白恒定区序列(例如，包含铰链区)以便提供二聚体HLA，并且可任选地包括可变区序列。可变区序列(如果存在的话)可任选地被修饰以减少或消除潜在的抗原结合，并且任选地没有鼠FW残基。在一些实施方案中，HLA抗原呈递复合物直接融合到Ig铰链区(例如，不包含轻链或重链可变序列)。HLA氨基酸序列可以是HLA-A*02∶01(IMGT登录号HLA00005)或其衍生物。T细胞共刺激配体和/或抗原呈递复合物(以及本文所述的其他配体，包括靶向配体)缀合到用于体外或体内抗原呈递和抗原特异性T细胞激活的颗粒载体。在一些实施方案中，所述颗粒由PLGA或PLA聚合物芯与PLGA-PEG或PLA-PEG聚合物形成。可替代地，可使用其他聚合物和/或共聚物。例如，共聚物可含有比率在1∶0与0∶1之间(诸如，约1∶0至约1∶1)的乳酸(L)和乙醇酸(G)。在一些实施方案中，用于偶联配体的表面官能团附接到形成亲水鞘的PEG链的末端。颗粒被设计来提供药效学优点，包括循环特性、生物分布和降解动力学以及用于激活抗原特异性T细胞的高效能。物理参数包括大小、表面电荷、聚合物组成、配体缀合化学物质、配体密度等等。例如，在一些实施方案中，颗粒具有PLGA或PLA聚合物芯以及由共聚物的PEG部分形成的亲水壳，其中聚合物中的一部分具有多肽配体的末端附接件。亲水壳包含相对于用于配体缀合的官能团是惰性的一些PEG链，诸如PLGA-PEG-MeOH或PLA-PEG-MeOH聚合物。在这些实施方案中，颗粒化学物质能实现对配体密度的良好控制。在一些实施方案中，颗粒是聚合物纳米颗粒，诸如本文详细描述的PLGA-PEG或PLA-PEG化学物质或其他聚合物化学物质，并且其大小范围是约20至约200nm。在一些实施方案中，配体密度是受控的，使得存在5至约1500个配体/颗粒(平均而言)，并且在一些实施方案中，小于约150个配体/颗粒或小于约100个配体/颗粒(例如，约5至约90个配体/颗粒)。在各种实施方案中，药物组合物还可包含用于向T细胞呈递的抗原肽，并且所述抗原肽可与配体缀合的珠粒或颗粒共同配制。在各种实施方案中，药物组合物是贮存稳定的，并且可以用于在施用之前复溶的冻干形式提供，或者可替代地，以用于向患者施用(例如，通过胃肠外施用)的便利的样式提供。本文所述的药物组合物可用于免疫疗法，例如，可用于通过向有需要的患者施用有效量的组合物来诱导抗原特异性T细胞形成的方法中。具体地，抗原呈递平台可用于治疗患有癌症、感染性疾病或自身免疫疾病的患者，或者向免疫抑制患者提供预防性保护。在一些实施方案中，纳米颗粒组合物在癌症免疫疗法(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人工抗原呈递细胞(aAPC)，其包含具有用于免疫细胞激活的附接的多肽配体的聚合物纳米颗粒，所述纳米颗粒包含：PLGA或PLA聚合物芯，和由PEG刷形成的亲水壳，其中所述PEG聚合物中的一部分具有多肽配体的末端附接件。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.24 US 62/096,7251.一种人工抗原呈递细胞(aAPC)，其包含具有用于免疫细胞激活的附接的多肽配体的聚合物纳米颗粒，所述纳米颗粒包含：PLGA或PLA聚合物芯，和由PEG刷形成的亲水壳，其中所述PEG聚合物中的一部分具有多肽配体的末端附接件。2.如权利要求1所述的aAPC，其中所述亲水壳还包含具有相同或不同分子量的PEG刷的化合物。3.如权利要求1或2所述的aAPC，其中所述聚合物芯基于1∶0至1∶1的乳酸∶乙醇酸比率。4.如权利要求3所述的aAPC，其中所述聚合物芯是具有约1∶1的乳酸∶乙醇酸的PLGA。5.如权利要求3所述的aAPC，其中所述聚合物芯是PLA。6.如权利要求1至5中任一项所述的aAPC，其中所述芯聚合物的分子量是约10K至约50K。7.如权利要求1至6中任一项所述的aAPC，其中所述聚合物纳米颗粒包含PLGA或PLA聚合物芯和PLGA-PEG和/或PLA-PEG嵌段共聚物，所述PEG部分形成所述亲水壳。8.如权利要求7所述的aAPC，其中所述多肽配体通过在所述PEG末端处的官能团附接。9.如权利要求8所述的aAPC，其中所述多肽配体通过所述多肽上的伯胺附接到PEG。10.如权利要求8所述的aAPC，其中所述多肽配体通过未配对的半胱氨酸侧链附接。11.如权利要求1至10中任一项所述的aAPC，其中所述PLGA-PEG共聚物含有分子量是约10K至约50K的PLGA部分和分子量是约2K至约10K的PEG部分。12.如权利要求11所述的aAPC，其中所述PLGA聚合物的分子量是约20K，并且所述PEG聚合物的分子量是约3K和/或约5K。13.如权利要求11或12所述的aAPC，其中所述颗粒包含PLGA-PEG-MeOH共聚物，其含有分子量是约10K至约30K的PLGA部分和分子量是约2K至约10K的PEG-MeOH部分。14.如权利要求13所述的aAPC，其中所述PLGA-PEG的PLGA部分的分子量是约20K，并且所述PEG-MeOH部分的分子量是约3K至5K。15.如权利要求13或14所述的aAPC，其中所述PLGA-PEG和PLGA-PEG-MeOH存在的比率是约1∶15至约15∶1。16.如权利要求15所述的aAPC，其中所述PLGA-PEG和PLGA-PEG-MeOH存在的比率是约1∶10至约2∶1。17.如权利要求13至16中任一项所述的aAPC，其中所述聚合物以约50％PLGA和至少约25％PLGA-PEG-MeOH存在。18.如权利要求1至10中任一项所述的aAPC，其中所述PLA-PEG共聚物含有分子量是约10K至约50K的PLA部分和分子量是约2K至约10K的PEG部分。19.如权利要求18所述的aAPC，其中所述PLA-PEG的PLA部分的分子量是约20K，并且所述PEG部分的分子量是约3K和/或约5K。20.如权利要求18或19所述的aAPC，其中所述颗粒包含PLA-PEG-MeOH共聚物，其含有分子量是约10K至约30K的PLA部分和分子量是约2K至约10K的PEG-MeOH部分。21.如权利要求20所述的aAP...

【专利技术属性】
技术研发人员：布鲁斯·麦克雷迪，
申请(专利权)人：耐克西缪恩有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US