用于癌症免疫治疗的抗CLL1特异性单链嵌合抗原受体(scCAR)制造技术

本发明专利技术涉及嵌合抗原受体(CAR)，其是能够重新定向对于CLL1阳性细胞的免疫细胞特异性和反应性的重组嵌合蛋白。具有这样的CAR的工程化的免疫细胞特别适合用于治疗癌症，特别是白血病的免疫治疗。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于癌症免疫治疗的抗CLL1特异性单链嵌合抗原受体(scCAR)
相比与正常造血干细胞或其他细胞类型，C型凝集素样分子-1(C-typelectin-likemolecule-1)(CLL1)已被确定为频繁过度表达在大多数急性骨髓性白血病(AML)干细胞(LSC)上。本专利技术涉及利用嵌合抗原受体(ChimericAntigenReceptor)(抗CLL1-CAR)来靶向CLL1阳性恶性细胞的方法，其中上述嵌合抗原受体是重组嵌合蛋白，其能够重新定向对于所选择的膜抗原CLL1的免疫细胞特异性和反应性。这些抗CLL1CAR更特别地包含细胞外配体结合(其包含衍生自一些特异性抗CLL1单克隆抗体的scFV)。具有(endowwith)这样的CAR的工程化免疫细胞(engineeredimmunecell)提供针对CLL1阳性细胞的过继免疫(adoptiveimmunity)，作为用于效率更高地治疗癌症的各种细胞疗法的一部分，尤其是血液癌。
技术介绍
过继免疫治疗(其涉及离体生成的抗原特异性T细胞的转移)，是一种很有前途的策略来治疗病毒感染和癌症。用于过继免疫治疗的T细胞可以通过抗原特异性T本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种CLL1特异性嵌合抗原受体(抗CLL1CAR)，至少包含：‑细胞外配体结合结构域抗CLL1，‑跨膜结构域，以及‑细胞质信号结构域。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.01.26 DK PA2015700441.一种CLL1特异性嵌合抗原受体(抗CLL1CAR)，至少包含：-细胞外配体结合结构域抗CLL1，-跨膜结构域，以及-细胞质信号结构域。2.根据权利要求1所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，进一步包含共刺激结构域。3.根据权利要求1所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，进一步包含CD28或4-1BB共刺激结构域。4.根据权利要求1至3中任一项所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，其中，所述跨膜结构域是CD8α跨膜结构域。5.根据权利要求1至4中任一项所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，进一步包含铰链。6.根据权利要求1至5中任一项所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，其中，所述细胞质信号结构域是T细胞激活结构域。7.根据权利要求1至6中任一项所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，其中，以单一多肽的形式来表达所述嵌合抗原受体。8.根据权利要求1至7中任一项所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，其中，所述细胞外配体结合结构域来自单克隆抗CLL1抗体。9.根据权利要求8所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，其中，所述细胞外配体结合结构域包含来自单克隆抗CLL1抗体的VH和VL结构域的CDR。10.根据权利要求9所述的CLL1特异性嵌合抗原受体，其中，所述CDR选自SEQIDNO.109至190。11.根据权利要求1至10中任一项所述的CLL1特异性scCAR，具有选自V1、V3或V5的多肽结构中的一种，如图2所示，所述结构包括包含来自单克隆抗CLL1抗体的VH和VL的细胞外配体结合结构域、铰链、CD8α跨膜结构域、包括CD3ζ信号结构域以及4-1BB共刺激结构域的细胞质结构域。12.根据权利要求1至11中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述结构V1包含FcγRIIIα铰链和CD8α跨膜结构域。13.根据权利要求1至11中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述结构V3包含CD8α铰链和CD8α跨膜结构域。14.根据权利要求1至11中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述结构V5包含IgG1铰链和CD8α跨膜结构域。15.根据权利要求1至14中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述VH和VL与选自SEQIDNO.11至34的多肽序列具有至少80％一致性。16.根据权利要求1至15中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，来自4-1BB的共刺激结构域与SEQIDNO.8具有至少80％一致性。17.根据权利要求1至16中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述CD3ζ信号结构域与SEQIDNO.9具有至少80％一致性。18.根据权利要求1至12或15至17中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述FcγRIIIα铰链与SEQIDNO.3具有至少80％一致性。19.根据权利要求1至11、13或15至17中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述CD8α铰链与SEQIDNO.4具有至少80％一致性。20.根据权利要求1至11或14至19中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述IgG1铰链与SEQIDNO.5具有至少80％一致性。21.根据权利要求1至20中任一项所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述CD8α跨膜结构域与SEQIDNO.6具有至少80％一致性。22.根据权利要求1至21中任一项所述的CLL1特异性scCAR，进一步包含对于CLL1不具有特异性的另一细胞外配体结合结构域。23.根据权利要求1至12、15至17或21至22中任一项所述的结构V1的CLL1特异性scCAR，其包含与SEQIDNO.35、41、47、53、59、65、71、77、83、89、95、101或107具有至少80％一致性的多肽序列。24.根据权利要求1至11、13、15至17或21至22中任一项所述的结构V3的CLL1特异性scCAR，其包含与SEQIDNO.37、43、49、55、61、67、73、79、85、91、97、103或109具有至少80％一致性的多肽序列。25.根据权利要求1至11、14至19或21至22中任一项所述的结构V5的CLL1特异性scCAR，其包含与SEQIDNO.39、45、51、57、63、69、75、81、87、93、99、105或111具有至少80％一致性的多肽序列。26.根据权利要求1至25中任一项所述的CLL1特异性scCAR，进一步包含信号肽。27.根据权利要求26所述的CLL1特异性scCAR，其中，所述信号肽与SEQIDNO.1或SEQIDNO.2具有至少80％序列一致性。28.根据权利要求1至27中任一项所述的多肽，其中，所述胞外结合结构域包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个mAb特异性表位。29.根据权利要求1至28中任一项所述的多肽，其中，所述胞外结合结构域包含1、2、3、或4个mAb特异性表位。30.根据权利要求1至29中任一项所述的多肽，其中，所述胞外结合结构域包含2、3、或4个mAb特异性表位。31.根据权利要求1至30中任一项所述的多肽，其中，所述胞外结合结构域包含以下序列V1-L1-V2-(L)x-表位1-(L)x-；V1-L1-V2-(L)x-表位1-(L)x-表位2-(L)x-；V1-L1-V2-(L)x-表位1-(L)x-表位2-(L)x-表位3-(L)x-；(L)x-表位1-(L)x-V1-L1-V2；(L)x-表位1-(L)x-表位2-(L)x-V1-L1-V2；表位1-(L)x-表位2-(L)x-表位3-(L)x-V1-L1-V2；(L)x-表位1-(L)x-V1-L1-V2-(L)x-表位2-(L)x；(L)x-表位1-(L)x-V1-L1-V2-(L)x-表位2-(L)x-表位3-(L)x-；(L)x-表位1-(L)x-V1-L1-V2-(L)x-表位2-(L)x-表位3-(L)x-表位4-(L)x-；(L)x-表位1-(L)x-表位2-(L)x-V1-L1-V2-(L)x-表位3-(L)x-；(L)x-表位1-(L)x-表位2-(L)x-V1-L1-V2-(L)x-表位3-(L)x-表位4-(L)x-；V1-(L)x-表位1-(L)x-V2；V1-(L)x-表位1-(L)x-V2-(L)x-表位2-(L)x；V1-(L)x-表位1-(L)x-V2-(L)x-表位2-(L)x-表位3-(L)x；V1-(L)x-表位1-(L)x-V2-(L)x-表位2-(L)x-表位3-(L)x-表位4-(L)x；(L)x-表位1-(L)x-V1-(L)x-表位2-(L)x-V2；或(L)x-表位1-(L)x-V1-(L)x-表位2-(L)x-V2-(L)x-表位3-(L)x；其中，V1是VL以及V2是VH或V1是VH以及V2是VL；L1是适合于将VH链连接于VL链的接头；L是包含甘氨酸和丝氨酸残基的接头，以及在胞外结合结构域中L的每次出现可以与在相同的胞外结合结构域中L的其它出现相同或不同，以及，x是0或1以及x的每次出现独立地选自其它；以及表位1、表位2和表位3是mAb特异性表位并且可以是相同或不同的。32.根据权利要求31中任一项所述的多肽，其中，所述胞外结合结构域包含以下序列V1-L1-V2-L-表位1；V1-L1-V2-L-表位1-L；V1-L1-V2-L-表位1-L-表位2；V1-L1-V2-L-表位1-L-表位2-L；V1-L1-V2-L-表位1-L-表位2-L-表位3；V1-L1-V2-L-表位1-L-表位2-L-表位3-L；V1-L1-V2-表位1；V1-L1-V...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱莉安娜·史密斯，朱利安·瓦尔顿，亚历山大·朱耶拉特，菲利普·迪谢托，巴尔布拉·约翰逊·萨苏，阿尔温德·拉吉帕尔，
申请(专利权)人：塞勒克提斯公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR