The invention provides a method for extracting bovine serum albumin with high purity, which comprises centrifugal separation of bovine serum solution, heating extraction of bovine serum albumin, purification of the first dialysis, purification of the anion exchange chromatography for second times, desalination and concentration at the end, filtration and sterilization. The present invention has short technological process, simple operation, high production efficiency, and no use of organic solvent in the invention, avoid protein aggregation and degeneration, and can reduce pollution and unsafe factors in the production process on the environment, improve the purity of the product, so that it can be widely used in medical and biochemical fields.
【技术实现步骤摘要】
一种高纯度牛血清白蛋白的提取方法
本专利技术涉及蛋白纯化
，尤其涉及一种高纯度的牛血清白蛋白提取方法。
技术介绍
蛋白质是生命的物质基础，血清白蛋白是血浆中含量最丰富的蛋白质，它能与许多内源及外缘性化合物相结合，起到存储与转化的作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白(BSA)，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.43kDa，等电点为4.7，是生物学、医学、药学等领域中广泛应用的生化试剂。在现阶段，牛血清白蛋白的提取主要有以下三种方法。盐析法用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得，此方法为最传统的生产方法，但其工艺繁琐，生产效率不高；有机溶剂沉淀法是利用乙醇的低介电常数性质以及蛋白质在一定温度、pH、离子强度及浓度条件下在不同浓度乙醇中的溶解度不同，从而实现血浆蛋白质的分离，此法可以生产出多种血浆蛋白，但是蛋白的纯度不高；热激法是取牛血用枸橼酸钠抗凝离心后得到血浆，加热，加入辛酸钠，调pH值后加乙醇，再经过多级处理后得到牛血清白蛋白，此方法血清白蛋白中会残留部分化学试剂，...
【技术保护点】
一种高纯度牛血清白蛋白的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取新鲜牛血，加入原血清体积10％抗凝剂，经检验检疫合格后，在4℃下2500rpm离心10min，取上清于‑20℃冷冻，取冷冻的血清，室温下充分融化后，10000rpm离心10min，取上清即为牛血清；(2)取所述牛血清于反应釜中，加入生理盐水稀释，加入稳定剂，再加入1mol/L的盐酸将溶液pH值调至5.1～5.2，水浴加热，使反应釜内溶液的温度保持在65～75℃，反应持续60～80min，过滤后，收集滤液；(3)取所述滤液，用0.02mol/L的Tris‑HCl缓冲溶液于4℃透析，透析袋截留分子量为20000...
【技术特征摘要】
1.一种高纯度牛血清白蛋白的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取新鲜牛血，加入原血清体积10％抗凝剂，经检验检疫合格后，在4℃下2500rpm离心10min，取上清于-20℃冷冻，取冷冻的血清，室温下充分融化后，10000rpm离心10min，取上清即为牛血清；(2)取所述牛血清于反应釜中，加入生理盐水稀释，加入稳定剂，再加入1mol/L的盐酸将溶液pH值调至5.1～5.2，水浴加热，使反应釜内溶液的温度保持在65～75℃，反应持续60～80min，过滤后，收集滤液；(3)取所述滤液，用0.02mol/L的Tris-HCl缓冲溶液于4℃透析，透析袋截留分子量为20000；(4)取透析过后的组分液，使用阴离子交换层析进一步纯化，使用0.2mol/L浓度氯化钠进行梯度洗脱；(5)收集洗脱组分，并且进行脱盐浓缩，...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈燕，
申请(专利权)人：天津市正江现代生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。