一种载药羊膜片及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及一种载药羊膜片及其制备方法和用途。具体地，载药羊膜片包含经干燥的羊膜，所述羊膜的基底膜面及羊膜中负载有白及5‑30份、熟石膏10‑30份、乳香3‑25份、没药3‑25份、苍术10‑30份、人工麝香0.5‑5份、冰片1‑15份、红花2‑30份。本发明专利技术还公开了载药羊膜片的制备方法，以及其在制备用于治疗皮肤溃疡性疾病的医疗材料中的用途。本发明专利技术的载药羊膜片速释与缓释作用相结合，具有维持创面局部环境的有效药物浓度的优势。

Drug loaded amniotic membrane and its preparation method and Application

The present invention relates to a drug loaded amniotic membrane and its preparation method and application. Specifically, the drug loaded amniotic membrane containing dried amniotic basement membrane, the surface of amniotic membrane and amniotic membrane loaded with 5 in Rhizoma Bletillae 30, 10 plaster 30 copies, 25 copies, 3 frankincense myrrh 3 25 copies, 30 copies, 10 Atractylodes 0.5 5 artificial musk and borneol 1 15 copies, 30 copies of 2 honghua. The invention also discloses the preparation method of the drug loaded amniotic membrane and its application in the preparation of medical materials for the treatment of skin ulcer diseases. The present invention has the advantages of quick release and sustained release of the drug loaded amniotic membrane, and has the advantages of maintaining the effective drug concentration in the local environment of the wound.

【技术实现步骤摘要】
一种载药羊膜片及其制备方法和用途
本专利技术涉及医疗用载药生物羊膜敷料领域，具体涉及载药羊膜片及其制备方法，以及该载药羊膜片在制备用于治疗皮肤溃疡性疾病的医疗材料中的用途。
技术介绍
人羊膜是胎盘的最内层，来源丰富、取材方便，是一种理想的生物修复材料，在产妇分娩时随胎盘排出体外，是一种医疗废弃物，研究和应用不会涉及伦理道德问题。其主要包括单层羊膜上皮细胞、厚基底膜以及无血管基质层，羊膜基底膜作为人体最厚基底膜，其成分与皮肤以及角膜的基底膜成分类似，主要是Ⅳ、Ⅶ型胶原以及层粘连蛋白等[1]。羊膜是一种具有弹性的半透明膜，具有抗黏附能力，组织相容性好，其基质中含有大量的胶原、纤粘连蛋白和层粘连蛋白等成分，羊膜可分泌诸多生物活性物质，如表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子、血小板源性生长因子、转化生长因子等，以及含有人β防御素、α-1抗胰蛋白酶、α-2巨球蛋白、α-2抗糜蛋白酶、多种白细胞介素(interleukin，IL)、前列腺素E、乙酰胆碱、儿茶酚胺、多巴胺、神经营养因子等，其主要通过加速上皮化、促进创面新生血管化和肉芽组织形成，减轻炎症反应、抑制瘢痕形成和抗菌等作用促进创面愈合[2-4]。美国FDA发布的《烧伤创面和慢性皮肤溃疡治疗药物临床研究指导原则》将“慢性皮肤溃疡”定义为即使通过及时给予整套治疗措施，仍不能产生结构、功能和美观上的永久闭合的创面。慢性皮肤溃疡的三个主要分类为糖尿病性溃疡、静脉瘀滞性溃疡和褥疮。慢性皮肤溃疡标准治疗措施需考虑的参数包括清楚坏死和感染组织、局部减压、建立适当的血液循环、保持创面环境湿度、控制创面感染、创面清洁、营养支持。慢性皮肤溃疡又称难治性皮肤溃疡，是一种常见难治性疾病，具有病因复杂、病程长和反复发作特点，可引起皮肤表皮和部分真皮甚至皮下脂肪缺损。致病因素包括糖尿病、外伤、压迫和感染等[5]。褥疮主要是因为局部组织受到长期压迫，导致持续缺血、缺氧以及营养不良的发生，引起组织溃烂坏死。临床主要采用常规清创、冲洗，去除坏死组织、外敷各种褥疮膏等方法治疗，但是治疗周期往往较长且效果不显著，因此，亟需开发一种新的治疗皮肤溃疡性疾病的药物。
技术实现思路
基于上述问题，在一方面，提供一种载药羊膜片，其包含经干燥的羊膜，所述经干燥的羊膜的基底膜面及所述经干燥的羊膜中负载有白及5-30份、熟石膏10-30份、乳香3-25份、没药3-25份、苍术10-30份、人工麝香0.5-5份、冰片1-15份、红花2-30份。在具体的实施方案中，每平方厘米的载药羊膜片负载有以下药材的药材浓缩液80-120μL：白及5-30g、熟石膏10-30g、乳香3-25g、没药3-25g、苍术10-30g、人工麝香0.5-5g、冰片1-15g、红花2-30g，其中经药材比水的重量体积比8-12的水浸泡、煎煮药材后浓缩50-120倍获得药材浓缩液。在具体的实施方案中，所述羊膜为哺乳动物的羊膜，优选所述哺乳动物是人。在另一方面，本专利技术提供了一种载药羊膜片的制备方法，其包括以下步骤：1)、足月健康产妇分娩后胎盘经钝性剥离获得羊膜，用生理盐水洗涤羊膜；2)、采用冷冻干燥的方法或晾干的方法，去除羊膜中的水分至含水量在20％以下；3)、将白及5-30份、熟石膏10-30份、乳香3-25份、没药3-25份、苍术10-30份、人工麝香0.5-5份、冰片1-15份、红花2-30份经水浸泡、煎煮，并浓缩后添加到步骤2)中获得的羊膜上，浸泡1-8小时；4)、将步骤3)处理后的羊膜进行冷冻干燥，获得载药羊膜片。在一个可选的实施方案中，在步骤1)和步骤2)之间，还包括使用消化液消化羊膜以去除上皮层细胞的步骤。所述消化液为0.1％-0.5％的胰蛋白酶，优选是0.25％胰蛋白酶。所述消化在37℃下进行20-90min，优选进行40min。优选地，每平方厘米面积的羊膜加入0.25％胰蛋白酶1-2ml，优选1.5ml。在一个可选的实施方案中，在消化后，还包括使用细胞刮刀剥离消化的上皮层细胞，以及加入生理盐水洗涤羊膜的步骤。在一个可选的实施方案中，在步骤1)和步骤2)之间，还包括使用甘油-水溶液浸泡羊膜的步骤，浸泡时间为10-100min，甘油-水溶液的浓度为5％-100％(体积比)，优选为10％-50％的甘油-水溶液，更优选为20％的甘油-水溶液。经过甘油浸泡处理充分保持羊膜的韧性，避免干燥后羊膜变脆、易断裂。在一个可选的实施方案中，在步骤1)中，所述生理盐水中还添加有20-150U/ml青霉素、10-200μg/ml链霉素、0.5-2.5μg/ml两性霉素、20-200U/ml庆大霉素中的一种或多种。在一个优选的实施方案中，所述生理盐水中还添加有20-150U/ml青霉素、10-200μg/ml链霉素、0.5-2.5μg/ml两性霉素和20-200U/ml庆大霉素。在一个优选的实施方案中，所述生理盐水中还添加有100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素、2.5μg/ml两性霉素和100U/ml庆大霉素。在具体的实施方案中，所述羊膜为哺乳动物的羊膜，优选所述哺乳动物是人。在一个优选的实施方案中，在步骤2)中所述冷冻干燥的方法为：4℃预冷1h，-5℃预冻1h，-10℃预冻1h，-30℃预冻2h，-25℃升华1h，-15℃升华2h，0℃升华1h，10℃升华2h，15℃升华2h，设置-25℃时开启真空泵开始升华干燥。经过该冷冻干燥工艺后，羊膜的含水量在10％以下。具体地，在-25℃升华1h这一阶段开启真空泵，也就是说经过-30℃冷冻2h后，仪器自动升温到-25℃，一到-25℃，真空泵就自动开启了，-25℃升华1h为真空升华过程，仪器干燥室处于真空状态，真空度为1.1Pa。在具体的实施方案中，在步骤3)中，将白及5-30份、熟石膏10-30份、乳香3-25份、没药3-25份、苍术10-30份、人工麝香0.5-5份、冰片1-15份、红花2-30份放置于陶瓷锅中，按照重量体积比进行加水，可选地，加入5-7倍量的水浸泡10-60min，再加入3-5倍量的水煎煮。先大火煮沸，再文火煎煮30-90min，过滤，除去药渣，水煎液倒入烧杯中，文火浓缩，直至浓缩液的体积为总加水体积的1/50至1/120。可选地，浸泡加水和最后加水煎煮，一共加入8-12倍量体积的水，优选10倍体积的水。在具体的实施方案中，在步骤3)中，针对每平方厘米的羊膜，使用白及5-30g、熟石膏10-30g、乳香3-25g、没药3-25g、苍术10-30g、人工麝香0.5-5g、冰片1-15g、红花2-30g放置于陶瓷锅中，按照重量体积比进行加水，可选地，加入5-7倍量的水浸泡10-60min，再加入3-5倍量的水，先大火煮沸，再文火煎煮30-90min，过滤，除去药渣，水煎液倒入烧杯中，文火浓缩，直至浓缩液的体积为总加水体积的1/50至1/120，每平方厘米的羊膜负载上述药材提取浓缩液80-120μL。可选地，浸泡加水和最后加水煎煮，一共加入8-12倍量体积的水，优选10倍体积的水。在具体的实施方案中，在步骤3)中，经水煎煮，并浓缩后的药材浸泡羊膜，所述羊膜吸收一部分药材的浓缩液，药材的浓缩液的剩余部分滞留在羊膜的基底膜面即粗糙面，经步骤4)进行的冷冻干燥，使得在羊本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种载药羊膜片，其包含经干燥的羊膜，所述经干燥的羊膜的基底膜面及所述经干燥的羊膜中负载有白及5‑30份、熟石膏10‑30份、乳香3‑25份、没药3‑25份、苍术10‑30份、人工麝香0.5‑5份、冰片1‑15份、红花2‑30份。

【技术特征摘要】
1.一种载药羊膜片，其包含经干燥的羊膜，所述经干燥的羊膜的基底膜面及所述经干燥的羊膜中负载有白及5-30份、熟石膏10-30份、乳香3-25份、没药3-25份、苍术10-30份、人工麝香0.5-5份、冰片1-15份、红花2-30份。2.根据权利要求1所述的载药羊膜片，其中，每平方厘米的载药羊膜片负载有以下药材的药材浓缩液80-120μL：白及5-30g、熟石膏10-30g、乳香3-25g、没药3-25g、苍术10-30g、人工麝香0.5-5g、冰片1-15g、红花2-30g，其中经药材比水的重量体积比为8-12的水浸泡、煎煮药材后浓缩50-120倍获得药材浓缩液。3.根据权利要求1或2所述的载药羊膜片，其中所述羊膜为哺乳动物的羊膜，优选所述哺乳动物是人。4.一种制备如权利要求1所述的载药羊膜片的方法，其包括以下步骤：1)、足月健康产妇分娩后胎盘经钝性剥离获得羊膜，用生理盐水洗涤羊膜；2)、采用冷冻干燥的方法或晾干的方法，去除羊膜中的水分至含水量在20％以下；3)、将白及5-30份、熟石膏10-30份、乳香3-25份、没药3-25份、苍术10-30份、人工麝香0.5-5份、冰片1-15份、红花2-30份经水浸泡、煎煮，并浓缩后添加到步骤2)中获得的羊膜上，浸泡1-8小时；4)、将步骤3)处理后的羊膜进行冷冻干燥，获得载药羊膜片。5.根据权利要求4所述的方法，其中在步骤1)和步骤2)之间，还包括使用消化液消化羊膜以去除上皮层细胞的步骤，在消化后使用细胞刮刀剥离消化的羊膜的上皮层细胞，并加入生理盐水洗涤羊膜。6.根据权利要求4或5所述的方法，其中在步骤1)和步骤2)之间，还包括使用甘油-水溶液浸泡羊膜的步骤，甘油-水溶液的浓度为5％-100％，浸泡时间为10-100min。7.根据权利要求4至6中任一项所述的方法，其中在步骤2)中的冷冻干燥的方法为：4℃预冷1h，-5℃预冻1h，-10℃预冻1h，-30℃预冻2h，-25℃升华1h，-15℃升华2h，0℃升华1h，10℃升华2h，15℃升华2h，设置-25℃时开启真空泵开始升华干燥；在步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：田娜，钟永强，王秀，张石林，邢亚丽，
申请(专利权)人：吉林省拓华生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22