一种唾液链球菌菌株及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种唾液链球菌菌株，其保藏编号为CGMCC NO.13308。本发明专利技术还提供了唾液链球菌CGMCC NO.13308在制备变形链球菌生长抑制剂及变形链球菌生物膜形成抑制剂中的应用。本发明专利技术首次披露了一种新的唾液链球菌CGMCC NO.13308，唾液链球菌CGMCC NO.13308的菌体具有抑制变形链球菌生长的功能，且其M17发酵上清液可显著降低变形链球菌生物膜的形成量。本发明专利技术拓宽了唾液链球菌在龋齿防治方面的应用前景及可产业化资源。

A Streptococcus mutans strain and its application

The invention provides a Streptococcus salivarius strains, the preservation number of CGMCC NO.13308. The invention also provides s.salivarius CGMCC NO.13308 in preparing the growth of Streptococcus mutans and Streptococcus mutans biofilm formation inhibitor application in inhibitor. The invention disclosed for the first time a new s.salivarius CGMCC NO.13308 CGMCC NO.13308, Streptococcus salivarius bacteria can inhibit the growth of Streptococcus mutans and its function, M17 can significantly reduce the amount of fermentation supernatant of Streptococcus mutans biofilm formation. The invention broadens the application prospect and industrial resources of Streptococcus mutans in the prevention and treatment of dental caries.

【技术实现步骤摘要】
一种唾液链球菌菌株及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种唾液链球菌菌株及其在制备变形链球菌生长和生物膜形成抑制剂中的应用。
技术介绍
龋齿，俗称虫牙、蛀牙，是一种细菌性疾病，可以继发牙髓炎和根尖周炎，甚至能引起牙槽骨和颌骨炎症。如不及时治疗，病变继续发展，形成龋洞，终至牙冠完全破坏消失，其发展的最终结果是牙齿丧失。龋齿特点是发病率高，分布广。该病是口腔主要的常见病，也是人类最普遍的疾病之一，世界卫生组织已将其与肿瘤和心血管疾病并列为人类三大重点防治疾病。引发龋齿的因素众多，如细菌、口腔环境(食物、唾液)、宿主等，其中，细菌是龋齿发生必要条件，一般认为致龋菌有两种类型，一种是产酸菌属，其中主要为变形链球菌(Streptococcusmutans，简称S.mutans)、放线菌属和乳杆菌，可使碳水化合物分解产酸，导致牙齿无机质脱矿；另一种是革兰阳性球菌，可破坏有机质，经过长期作用可使牙齿形成龋洞。上述致龋菌中，变形链球菌被国内外学者公认为是引发龋齿的最主要和最重要的病原菌。因此，通过抑制或杀灭变形链球菌的方法来控制口腔中主要致龋菌的数量，进而预防和治疗龋齿是行之有效的手段。目前控制的药物较少，氨硝酸银是为数不多的其中之一，氨硝酸银是一种防腐杀菌性药物，具有防腐、收敛、杀菌及腐蚀作用，但该药物可使牙齿染色，故不适用于前牙治疗。而另一方面，由于变形链球菌所产生的生物膜(不溶性多糖)可促进致龋菌在牙齿表面的吸附与积累，继而形成牙菌斑恶化龋齿的程度，因此，减少其生物膜的产量也可达到防治龋齿的目的，相对于控制变形链球菌数量的研究而言，以减少生物膜产量来防治龋齿的研究相对较少。目前靶向性地直接抑制变形链球菌菌体增殖或生物膜产量的方法不多，临床上大多采用氨硝酸银等化合物，其时效性短、副作用强，而采用具有同样效果的微生物则不然，首先微生物可定植于牙齿表面长期发挥抑制菌体生长或生物膜形成的作用，其次，采用公认无害的乳酸菌类微生物则不必担心副作用的风险，虽然目前已有部分乳酸菌被报道有抑制菌体生长或其生物膜形成的效果，但相关报道数量有限，可应用的微生物资源极其狭隘，因此，筛选具有抑制变形链球菌生长或其生物膜形成的新型乳酸菌菌株依然是当务之急，且是本领域技术人员亟待解决的问题。
技术实现思路
基于上述技术问题，本专利技术提供了一种唾液链球菌菌株，还提供了该菌株在制备变形链球菌生长及其生物膜形成抑制剂中的应用。具体的，一方面，本专利技术提供了一种唾液链球菌(Streptococcussalivarius)的菌株，其保藏编号为CGMCCNO.13308。所述唾液链球菌(Streptococcussalivarius)菌株BD3900，已于2016年11月15日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。该菌株的保藏编号为：CGMCCNo.13308。第二方面，还提供了唾液链球菌CGMCCNO.13308在制备变形链球菌生长抑制剂中的应用。唾液链球菌CGMCCNO.13308对变形链球菌的生长有抑制作用，从而起到防治的龋齿的作用。第三方面，还提供了唾液链球菌菌株在制备变形链球菌生物膜形成抑制剂中的应用。唾液链球菌CGMCCNO.13308对变形链球菌生物膜的形成有抑制作用，使得变形链球菌生物膜数量减少，降低了致龋菌在牙齿表面的吸附与积累，从而抑制了龋齿的形成。其中，所述唾液链球菌菌株经发酵制得的发酵上清液用于制备变形链球菌生物膜形成抑制剂。优选的，所述发酵上清液的制备方法如下：将CGMCCNO.13308菌株接种于含有蔗糖的M17培养基中，发酵培养后离心即得。优选的，CGMCCNO.13308菌株的接种量为7x106～3.5x107cfu/mL。接种量过多或过少时，唾液链球菌CGMCCNO.13308菌种的繁殖速度缓慢，使得到的发酵上清液对变形链球菌生物膜形成的抑制活性有所降低。优选的，所述M17培养基中蔗糖的含量为0.25～5％。蔗糖的含量过高或过低时，均不利于菌种的繁殖和发酵。优选的，所述发酵的温度为26～42℃，时间为8～24h。发酵温度过高或过低时，唾液链球菌CGMCCNO.13308菌种的代谢缓慢，会导致发酵上清液对变形链球菌生物膜形成的抑制活性有所降低。优选的，所述离心的速度为6000～10000g，时间为10～20min。在所述优选范围内，菌种能够生成具有抑制变形链球菌生物膜形成活性的发酵上清液。本专利技术的有益效果为：本专利技术首次披露了一种新的唾液链球菌CGMCCNO.13308，唾液链球菌CGMCCNO.13308的菌体具有抑制变形链球菌生长的功能，且其M17发酵液上清可显著降低变形链球菌生物膜的形成量。本专利技术拓宽了唾液链球菌在龋齿防治方面的应用前景及可产业化资源。附图说明图1为实施例2中唾液链球菌CGMCCNo.13308对变形链球菌的抑菌效果。具体实施方式为更清楚的对本专利技术技术方案予以阐述，下面将结合具体实施方式对本专利技术的技术方案进行进一步阐述：在一个具体的实施方式中，本专利技术提供了一种唾液链球菌菌株，其保藏编号为CGMCCNO.13308。CGMCCNO.13308菌株分离自正常人体口腔，该菌株经16SrRNA基因测序的结果如SEQIDNO:1所示。根据其生理生化特性及16SrDNA序列分析的结果，经中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)鉴定为唾液链球菌(Streptococcussalivarius)菌株。该菌株具有革兰氏染色阳性，细胞形态为圆形，不形成芽孢等微生物学特性。唾液链球菌菌株具有抑制变形链球菌生长及变形链球菌生物膜形成的作用，因此，本专利技术还提供了唾液链球菌CGMCCNO.13308在制备变形链球菌生长抑制剂，及制备变形链球菌生物膜形成抑制剂中的应用。其中，唾液链球菌CGMCCNO.13308的发酵上清液用于制备变形链球菌生物膜形成抑制剂。制备唾液链球菌CGMCCNO.13308的发酵上清液的方法如下：将唾液链球菌CGMCCNO.13308的菌株接种于含有蔗糖的M17培养基中，发酵培养后离心即得。上述技术方案，首次披露了唾液链球菌CGMCCNO.13308菌体本身具有抑制变形链球菌生长的功能，而且其M17发酵液上清可显著降低变形链球菌生物膜的形成量，因此，本专利技术拓宽了唾液链球菌在龋齿防治方面的应用前景及可产业化资源。优选的，所述唾液链球菌CGMCCNO.13308的接种量为7x106～3.5x107cfu/mL；较佳地为1.4x107～2.8x107cfu/mL，更佳地为2.1x107cfu/mL。接种量过多或过少时，唾液链球菌CGMCCNO.13308菌种的繁殖速度缓慢，使得到的发酵上清液对变形链球菌生物膜形成的抑制活性有所降低。优选的，所述M17培养基中蔗糖含量为0.25～5％(w/v)，较佳地为0.5～3％(w/v)，更佳地为1％(w/v)。蔗糖为唾液链球菌CGMCCNO.13308菌种生长提供碳源，蔗糖的含量过高或过低时，均不利于菌种的繁殖和发酵。优选的，所述发酵温度为26℃～42℃；较佳地为30℃～38℃；更佳地为34℃。发酵时间为8～24h；较佳地为12～20h；更佳地为16h。发酵温度本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种唾液链球菌菌株，其特征在于，其保藏编号为CGMCC NO.13308。

【技术特征摘要】
1.一种唾液链球菌菌株，其特征在于，其保藏编号为CGMCCNO.13308。2.权利要求1所述的唾液链球菌菌株在制备变形链球菌生长抑制剂中的应用。3.权利要求1所述的唾液链球菌菌株在制备变形链球菌生物膜形成抑制剂中的应用。4.根据权利要求3所述的唾液链球菌菌株在制备变形链球菌生物膜形成抑制剂中的应用，其特征在于，唾液链球菌菌株经发酵制得的发酵上清液用于制备变形链球菌生物膜形成抑制剂。5.根据权利要求4所述的唾液链球菌菌株在制备变形链球菌生物膜形成抑制剂中的应用，其特征在于，所述发酵上清液的制备方法如下：将CGMCCNO.13308菌株接种于含有蔗糖的M17培养基中，发酵培养后离心即得。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴正钧，于亚男，韩瑨，冯华峰，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31