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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物,具体涉及一种抑菌提取物及其制备方法与应用。
技术介绍
1、环境致病菌和腐败菌的肆意增殖是近年来食品安全问题爆发频繁的主要原因之一,这些微生物可引起各种人类疾病,如大肠杆菌引发腹泻等,除了外源摄入的致病风险外,人体内的固有菌群肠球菌也是一种不可控因素,这种条件致病菌在免疫力低下的宿主体内引发菌血症、呼吸道和心内膜炎等感染。此外,人体口腔中也寄生了着大量的致病菌,在特定的口腔环境中萌发壮大,最终导致牙周炎、牙源性感染。
2、为抑制这些病原微生物的生长增殖,添加化学防腐剂成为主要的解决方案,然而,这种传统的防腐技术过度滥用导致饲料甚至食品中的大量残留,进而成为威胁人类身体健康的潜在因素之一。在此基础上,来自乳酸链球菌的细菌素nisin应运而生,它安全无毒并在很大程度上避免了化学防腐剂带来的残留危害,但其分子中的“羊毛硫氨酸环”对益生菌同样有害。抗生素是另一种抑菌手段,然而长期使用抗生素也引发了另一个问题—“抗生素耐受”问题,一些微生物甚至可以耐受万古霉素级别的强效抗生素存活下来,如耐万古霉素屎肠球菌,目前,具备对于耐受万古霉素等抗生素的微生物的抑制能力的细菌素或抑菌提取物极少。
技术实现思路
1、鉴于以上所述现有技术的缺点,本专利技术的目的在于提供一种抑菌提取物及其制备方法与应用。
2、本专利技术第一方面提供一种抑菌提取物的制备方法,所述方法以保藏编号为cgmccno.28567的屎肠球菌(enterococcus faecium)为原料制备抑
3、具体包括以下步骤:
4、1)将上述的屎肠球菌接种于培养基中发酵得到发酵液,对发酵液离心取上清液;
5、2)析出上清液中的发酵产物,收集发酵产物,得到抑菌提取物。
6、在本专利技术的一些实施方式中,所述屎肠球菌cgmcc no.28567的接种量为5x106~2.5x107cfu/ml。
7、在本专利技术的一些实施方式中,所述发酵为厌氧培养。
8、在本专利技术的一些实施方式中,所述发酵的温度为26℃~42℃。
9、在本专利技术的一些实施方式中,所述发酵的时间为12~36h。
10、在本专利技术的一些实施方式中,所述离心的速度为8,000~12,000g,离心的时间为10~20min。
11、在本专利技术的一些实施方式中,所述培养基为发酵培养基,具体的,所述发酵培养基为tpy培养基。
12、在本专利技术的一些实施方式中,步骤2)中还包括通过加入硫酸铵析出上清液中的发酵产物;具体的,在上清液中逐步加入硫酸铵,当硫酸铵饱和度达到40~70%时对上清液进行离心收集析出的发酵产物;
13、进一步的,所述离心的速度为8,000~12,000g,离心的时间为10~20min。
14、在本专利技术的一些实施方式中,步骤2)中还包括对收集的发酵产物进行脱盐,脱盐后进行干燥。
15、所述脱盐选自透析脱盐、超滤脱盐、凝胶脱盐,优选的,所述脱盐为超滤脱盐。
16、更优选的,所述超滤脱盐的截留分子量为3kda。
17、在本专利技术的一些实施方式中,所述抑菌提取物抑制口腔致病菌、和/或肠道致病菌、和/或抗生素耐受微生物。
18、本专利技术第二方面提供一种由上述第一方面的制备方法制备的抑菌提取物,所述抑菌提取物抑制口腔致病菌、和/或肠道致病菌、和/或抗生素耐受微生物。
19、在本专利技术的一些实施方式中,所述抗生素耐受微生物为耐万古霉素屎肠球菌;所述口腔致病菌为空腔诺卡氏菌7184、或婴儿链球菌、或缓症链球菌、或东京链球菌;所述肠道致病菌为金黄色葡萄球菌或单增李斯特菌。
20、本专利技术第三方面提供上述第一方面的制备方法或上述第二方面的抑菌提取物在制备抑菌产品的用途。
21、本专利技术的有益效果在于:
22、通过本专利技术的制备方法制备的抑菌提取物的抑菌效果稳定,对口腔致病菌、肠道致病菌、抗生素耐受微生物均有抑制效果,且该抑菌提取物的抑菌活性稳定,对ph、温度以及蛋白酶均不敏感,拓宽了微生物抑制剂的来源。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种抑菌提取物的制备方法,所述方法以保藏编号为CGMCC NO.28567的屎肠球菌为原料制备抑菌提取物,所述屎肠球菌包含如SEQ ID No.1所示的基因序列。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)还包括以下一项或多项特征:
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中还包括以下一项或多项特征:
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,还包括以下一项或多项特征:
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述抑菌提取物抑制口腔致病菌、和/或肠道致病菌、和/或抗生素耐受微生物。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述抗生素耐受微生物包括耐万古霉素屎肠球菌;
8.由权利要求1-7任一所述的制备方法制备的抑菌提取物,所述抑菌提取物抑制口腔致病菌、和/或肠道致病菌、和/或抗生素耐受微生物。
9.根据权利要求8所述的抑菌提取物,其特征在于:所述抗生素耐受微生物包
10.权利要求1-7任一项所述的制备方法或权利要求8-9任一项所述的抑菌提取物在制备抑菌产品的用途。
...【技术特征摘要】
1.一种抑菌提取物的制备方法,所述方法以保藏编号为cgmcc no.28567的屎肠球菌为原料制备抑菌提取物,所述屎肠球菌包含如seq id no.1所示的基因序列。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)还包括以下一项或多项特征:
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中还包括以下一项或多项特征:
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,还包括以下一项或多项特征:
6.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员:韩瑨,吴正钧,刘振民,王晶,高雅茹,
申请(专利权)人:光明乳业股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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