The invention discloses a method for extracting laccase from Pleurotus eryngiibacterial in slag, which comprises the following steps: fresh mushroom residue or shade selection of freshly harvested fruiting bodies of fungi residue placed within 3 days, the residue was crushed, 4 ~ 10 mesh sieve; adding to the residue after crushing leaching liquid, soak 12 ~ 36h, 4000 ~ 5000r/min filter to remove solid, centrifugal 5 ~ 10min, the supernatant was collected as crude enzyme liquid; the extraction liquid of pH = 4.5 ~ 5.5 HAc NaAc buffer solution, according to the ratio of material to liquid 1g:5 ~ 10ml addition; finally cut the purification of crude enzyme liquid flow ultrafiltration system, to concentrate, laccase enzyme, stored at 2 to 4 DEG C. In the invention, the residue of the fruiting body is used as the raw material for extraction, the raw material is cheap, the method is simple, the source of the laccase is extended, and the utilization rate of the waste bacterial residue is improved.
【技术实现步骤摘要】
从杏鲍菇菌渣中提取漆酶的方法
本专利技术属于生物
,具体涉及一种从杏鲍菇菌渣中提取漆酶的方法。
技术介绍
随着食用菌产业的迅速发展,出菇后大量菌渣的综合利用对于保护环境、实现生态农业和有机农业良性循环有着十分重要的意义,目前菌渣主要是丢弃或焚烧,不仅造成资源的浪费更导致霉菌和害虫的增生,造成环境的污染。杏鲍菇是一种分解纤维素、木质素、蛋白质能力较强的食用菌,其生长发育过程中能分泌较多的漆酶。采摘后的新鲜菌渣中含有大量的漆酶,回收利用后可继续堆肥或制成饲料,既能提高菌渣的利用率,又能创造一定的经济价值。漆酶在制浆漂白、生物燃料、污染物的降解、绿色有机物的合成、食品工业、生物传感器、生物监测方面应用广泛。目前漆酶的获取主要是从漆树或微生物的发酵液中获取,生产量比较有限,生产成本较高,目前还没有从杏鲍菇菌渣中提取漆酶的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种原料廉价且丰富,获取漆酶途径简单的方法,提高杏鲍菇菌渣的利用率,扩大了漆酶的获取途径。具体的,本专利技术从杏鲍菇菌渣中提取漆酶的方法,按照如下步骤进行:S1:原料预处理选取刚收获子实体的新鲜菌渣或阴凉处放置3天以内的菌渣,将菌渣进行粉碎,过4~10目筛;S2:提取粗酶液向粉碎后的菌渣中加入浸提液,浸泡12~36h,过滤除去固体,4000~5000r/min离心5~10min,收集上清液即为粗酶液;所述浸提液为pH=4.5~5.5的HAc-NaAc缓冲溶液,按照料液比1g:5~10ml的比例添加;S3:浓缩、纯化漆酶用切向流超滤系统浓缩、纯化粗酶液,得到漆酶酶制剂,在2~4℃储存。优选地,所述漆酶酶制 ...
【技术保护点】
从杏鲍菇菌渣中提取漆酶的方法,其特征在于,具体按照如下步骤进行:S1:原料预处理选取刚收获子实体的新鲜菌渣或阴凉处放置3天以内的菌渣,将菌渣进行粉碎,过4~10目筛;S2:提取粗酶液向粉碎后的菌渣中加入浸提液,浸泡12~36h,过滤除去固体,4000~5000r/min离心5~10min,收集上清液即为粗酶液;所述浸提液为pH=4.5~5.5的HAc‑NaAc缓冲溶液,按照料液比1g:5~10ml的比例添加;S3:浓缩、纯化漆酶用切向流超滤系统浓缩,纯化粗酶液,得到漆酶酶制剂,在2~4℃储存。
【技术特征摘要】
1.从杏鲍菇菌渣中提取漆酶的方法,其特征在于,具体按照如下步骤进行:S1:原料预处理选取刚收获子实体的新鲜菌渣或阴凉处放置3天以内的菌渣,将菌渣进行粉碎,过4~10目筛;S2:提取粗酶液向粉碎后的菌渣中加入浸提液,浸泡12~36h,过滤除去固体,4000~5000r/min离心5~10min,收集上清液即为粗酶液;所述浸提液为pH=4.5~5.5的HAc-NaAc缓冲溶液,按照料液比1g:5~10ml的比例添加;S3:浓缩、纯化漆酶用切向流超滤系统浓缩,纯化粗酶液,得到漆酶酶制剂,在2~4℃储存。2.根据权利要求1所述的从杏鲍菇菌渣中提取漆酶...
【专利技术属性】
技术研发人员:梁峰,刘秀花,梁梁,
申请(专利权)人:商丘师范学院,
类型:发明
国别省市:河南,41
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