一种一步逆转录RT‑qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种一步逆转录RT‑qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒，包括MTHFR‑C677T反应缓冲液、MTHFR‑A1298C反应缓冲液、MTRR‑A66G反应缓冲液、阳性对照、阴性对照、One step酶混合液。本发明专利技术以药物代谢的遗传学为基础，在利用实时荧光PCR探针技术高灵敏度和高特异性的优点的基础上，针对MTHFR与MTRR的RNA序列，能够直接对表达区域的翻译产物进行检测，与现有DNA‑实时荧光PCR法相比，更接近于是否有表达蛋白质(即亚甲基四氢叶酸还原酶和甲硫氨酸合成酶还原酶)的检测，检测结果更具有特异性。

A kit for the detection of one step reverse transcription RT qPCR MTHFR polymorphism of MTRR gene and expression

The invention discloses a kit for the detection of one step reverse transcription RT MTHFR and qPCR polymorphism of MTRR gene expression, including MTHFR C677T, MTHFR reaction buffer A1298C reaction buffer, MTRR A66G reaction buffer, positive control, negative control, One step enzyme mixture. The invention is based on the genetics of drug metabolism, based on the advantages of real time fluorescent PCR probe technique with high sensitivity and specificity for RNA on the sequence of MTHFR and MTRR, can be directly translated products on the expression of regions were detected, compared with the existing DNA real-time PCR, closer to the expression or not protein (i.e. the methylenetetrahydrofolate reductase and methionine synthase reductase) detection, detection result is more specific.

【技术实现步骤摘要】
一种一步逆转录RT-qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒
本专利技术涉及分子生物学领域，是一种体外诊断试剂，具体是指一种一步逆转录RT-qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒。
技术介绍
亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR)是甲硫氨酸-叶酸代谢系统中的关键酶，与甲硫氨酸合成酶还原酶(Methioninesynthasereductase，MTRR)一起，维持叶酸正常代谢。另外，MTHFR还参与维持体内正常的同型半胱氨酸水平。体内MTHFR和MTRR基因突变可导致其编码的叶酸代谢关键酶活性降低，引起叶酸代谢障碍，造成叶酸水平降低及高同型半胱氨酸血症(HCY)。对于MTHFR和MTRR基因异常的人，MTHFR和MTRR酶活性明显降低，造成叶酸代谢障碍，导致新生儿神经管缺陷、唐氏综合症及唇腭裂等疾病的发病风险明显增高，这类人需要补充更多的叶酸，以及用更长的周期补充叶酸才能达到预期的效果。此外，MTHFR和MTRR基因异常易出现高同型半胱氨酸血症(HCY)，早期进行基因检测有利于预防高同本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种一步逆转录RT‑qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒，其特征在于，包括MTHFR‑C677T反应缓冲液、MTHFR‑A1298C反应缓冲液、MTRR‑A66G反应缓冲液、阳性对照、阴性对照、One step酶混合液。

【技术特征摘要】
1.一种一步逆转录RT-qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒，其特征在于，包括MTHFR-C677T反应缓冲液、MTHFR-A1298C反应缓冲液、MTRR-A66G反应缓冲液、阳性对照、阴性对照、Onestep酶混合液。2.根据权利要求1所述的一步逆转录RT-qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括1支800μLMTHFR-C677T反应缓冲液、1支800μLMTHFR-A1298C反应缓冲液、1支800μLMTRR-A66G反应缓冲液、1支50μL阳性对照、1支50μL阴性对照、1支50μLOnestep酶混合液。3.根据权利要求1所述的一步逆转录RT-qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒，其特征在于，所述MTHFR-C677T反应缓冲液包括OnestepRT-qPCRreactionbuffer、RT增强剂、dNTPs、C677T特异性上下游引物、C677T特异性探针；所述MTHFR-A1298C反应缓冲液包括OnestepRT-qPCRreactionbuffer、RT增强剂、dNTPs、A1298C特异性上下游引物、A1298C特异性探针；所述MTRR-A66G反应缓冲液包括OnestepRT-qPCRreactionbuffer、RT增强剂、dNTPs、A66G特异性上下游引物、A66G特异性探针。4.根据权利要求3所述的一步逆转录RT-qPCR人MTHFR与MTRR基因多态性表达的检测试剂盒，其特征在于，所述C677T特异性上下游引物为MTHFR-C677T-L、MTHFR-C677T-R；所述C677T特...

【专利技术属性】
技术研发人员：林家旺，张秋芳，崔勤，何幸，
申请(专利权)人：厦门金诺威生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35