卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液及使用方法技术

本发明专利技术公开卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液及使用方法，所述序贯玻璃化冷冻液包括皱缩液、平衡液和玻璃化液，所述皱缩液为使细胞脱水的非渗透性保护剂。本发明专利技术的优点在于：(1)细胞在进入平衡液前先用非渗透性保护剂预处理使其脱水，可缩短平衡液内的作用时间，降低渗透性保护剂的化学毒性；(2)非渗透性保护剂预处理，可提高卵子胞膜的稳定性，使卵子更耐受渗透损伤，有助于提高复苏卵子的存活率；(3)不同熟练程度的操作者均可获得非常稳定的高存活率，临床应用前无需进行长时间、大样本量的技术培训；(4)结果稳定、操作简单，将极大有利于人卵玻璃化冷冻技术在临床上广泛推广。

Oocyte, non permeability protector, shrinkage method, sequential vitrification solution and method of use

The invention discloses a oocyte impermeable protective agent sequential glass freezing liquid shrinkage method and method of use, including liquid and glass liquid equilibrium solution, the sequential shrinkage of the vitrification solution, the solution for the shrinkage of non permeable protective agent cell dehydration. The invention has the advantages that: (1) enter the cells in the equilibrium liquid before using non permeable protective agent pretreatment which can shorten the time of dehydration, the balance of liquid in the lower permeability, chemical toxicity protective agent; (2) non permeable protective agent pretreatment can improve the stability of egg membrane so the eggs, more resistant to osmotic injury, help to improve the survival rate of recovery of eggs; (3) the operator can obtain different proficiency, high survival rate is very stable, without the need for a long time, the amount of sample technical training before clinical application; (4) the results of stability, simple operation, will greatly the technology to human oocytes vitrification in clinical widely.

【技术实现步骤摘要】
卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液及使用方法
本专利技术属于医学中的辅助生殖领域，更具体地讲，涉及卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液及使用方法。
技术介绍
卵子冷冻价值巨大，比如，罹患癌症的适龄女性可在化疗前冻存卵子，癌症治疗后再解冻卵子生育，而无需借卵；职业女性可在年轻时将卵子冷冻，待有生育意愿时解冻卵子生儿育女；在符合伦理和知情同意的前提下，辅助生殖治疗的女性可将部分卵子冷冻，成功分娩后将冻存的卵子捐赠给他人，解决赠卵来源困难的难题；卵子冷冻在珍稀动物、实验动物保种和再生医学研究等领域也具有重要的研究和应用价值。然而，卵子冷冻技术目前并不成熟，表现为两低一高，即存活率和囊胚形成率低，而流产率高。人卵慢速冷冻的存活率仅为50％-70％，玻璃化冷冻对慢速冷冻是一次革命，胞内和胞外均不会形成冰晶，存活率可达85％-90％以上。但是，玻璃化技术对操作者的要求很高，冷冻结局严重受限于胚胎学家的操作技巧和熟练程度，表现有三：1)文献显示，使用相同冷冻液和冷冻方法的各个不同实验室其冷冻结局有很大差别；2)同一个实验室不同操作者之间的差异很大，以临床上广泛使用的15％EG+1本文档来自技高网...

【技术保护点】
卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液，其特征在于，所述序贯玻璃化冷冻液包括皱缩液、平衡液和玻璃化液，所述皱缩液为使细胞脱水的非渗透性保护剂。

【技术特征摘要】
1.卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液，其特征在于，所述序贯玻璃化冷冻液包括皱缩液、平衡液和玻璃化液，所述皱缩液为使细胞脱水的非渗透性保护剂。2.根据权利要求1所述的卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液，其特征在于，所述皱缩液为0.01mol/L-1.0mol/L蔗糖和/或海藻糖溶液。3.根据权利要求2所述的卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液，其特征在于，所述皱缩液为0.1mol/L-0.5mol/L蔗糖和/或海藻糖溶液。4.根据权利要求3所述的卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液，其特征在于，所述皱缩液为0.1mol/L-0.2mol/L蔗糖和/或海藻糖溶液。5.根据权利要求1所述的卵母细胞非渗透性保护剂皱缩法序贯玻璃化冷冻液，其特征在于，所述平衡液为5％-10％EG+5％-10％DMSO，所述玻璃化...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛松果，匡延平，
申请(专利权)人：薛松果，匡延平，
类型：发明
国别省市：上海,31