The present invention relates to a method and an apparatus suitable for continuous chromatographic processes requiring only three separate columns. The procedure is a two step procedure with two chromatographic steps. The first step (capture) in two chromatographic separation column alternately and sequentially, second chromatographic steps (pure) in the same sequential third columns on.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及适用于仅需要三根分离柱的连续色谱过程的方法和设备。该过程是一种包含两个色谱步骤的两步程序。第一色谱步骤(捕获)在优选的两根分离柱上交替且循序地进行，第二色谱步骤(精纯，polishing)也循序地在第三根分离柱上进行。专利技术背景蛋白质的大规模且经济性的纯化逐渐成为生物技术和制药工业中的重要问题。一般地，采用设计以产生目标蛋白的哺乳动物或菌细胞株，通过插入含有用于该蛋白的基因的重组质粒进行细胞培养来产生蛋白质。由于所用的细胞系为生物体，所以它们必须供给复合的生长培养基，包含糖、氨基酸和生长因子，通常从动物血清制品中提供。从供给细胞的化合物混合物中和从细胞本身的副产物中，将所需的蛋白质分离至足以用作人类治疗剂的纯度是一种巨大的挑战。从细胞碎片中进行蛋白纯化的程序首先取决于蛋白质表达的位置。某些蛋白质被引起从细胞中直接分泌至周围生长培养基中；其它的则是在细胞内制造。对于后者的蛋白质，纯化过程的第一步包含细胞的裂解，其可以通过多种方法进行，包括机械剪切、渗压震扰或酶处理。此类裂解将细胞的全部内含物释放到匀浆中，并且另外会产生由于其体积小而难以...
【技术保护点】
一种设备，其包含‑ 两个分离单元A1和A2以及分离单元B，分离单元A1和A2两者具有相同的色谱基质，分离单元B具有不同于分离单元A1和A2的色谱基质的色谱基质，所有的分离单元都具有流体入口和流体出口，由此，至少在分离单元A1的流体出口与分离单元B的流体入口之间有流体连接和在分离单元A2的流体出口与分离单元B的流体入口之间有流体连接，‑ 在分离单元A1和A2与分离单元B之间的流体连接中的至少一个阀，其允许在分离单元A1的出口与分离单元B的流体入口之间的流体连通以及分离单元A2的出口与分离单元B的流体入口之间的流体连通之间切换，‑ 至少两个缓冲剂储液器和至少两个泵，‑ 包含样品...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.10.04 EP 11008021.5;2012.06.29 US 61/666,3381.一种设备，其包含
-两个分离单元A1和A2以及分离单元B，分离单元A1和A2两者具有相同的色谱基质，分离单元B具有不同于分离单元A1和A2的色谱基质的色谱基质，所有的分离单元都具有流体入口和流体出口，由此，至少在分离单元A1的流体出口与分离单元B的流体入口之间有流体连接和在分离单元A2的流体出口与分离单元B的流体入口之间有流体连接，
-在分离单元A1和A2与分离单元B之间的流体连接中的至少一个阀，其允许在分离单元A1的出口与分离单元B的流体入口之间的流体连通以及分离单元A2的出口与分离单元B的流体入口之间的流体连通之间切换，
-至少两个缓冲剂储液器和至少两个泵，
-包含样品溶液的储液器，其与分离单元A1和A2的入口流体连接。
2.权利要求1的设备，其特征在于分离单元A1和A2具有亲和色谱基质、阳离子交换色谱基质、混合模式阳离子交换色谱基质或阴离子交换色谱基质。
3.权利要求1或2的设备，其特征在于分离单元B具有阳离子交换色谱基质、混合模式阴离子交换色谱基质或阴离子交换色谱基质。
4.权利要求1-3中一或多项的设备，其特征在于分离单元A1和A2具有亲和色谱基质，分离单元B具有阳离子交换色谱基质、混合模式阳离子交换色谱基质或阴离子交换色谱基质。
5.权利要求1-3中一或多项的设备，其特征在于分离单元A1和A2具有阳离子交换色谱基质或混合模式阳离子交换色谱基质，分离单元B具有阴离子交换色谱基质或混合模式阴离子交换色谱基质。
6.权利要求1-5中一或多项的设备，其特征在于该设备还包含在分离单元A1的流体出口与分离单元A2的流体入口之间的连接线，和在分离单元A2的流体出口与分离单元A1的流体入口之间的连接线。
7.权利要求1-6中一或多项的设备，其特征在于该设备包含在分离单元A1和A2的出口与分离单元B的流体入口之间的连接线中的流体入口。
8.权利要求1-7中一或多项的设备，其特征在于该设备包含具有病毒灭活缓冲剂的附加的储液器，其...
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