一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法技术

本发明专利技术公开了一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法，该复合酶由纤维素酶、酸性淀粉酶和果胶酶组成；1g复合酶中含纤维素酶500-700U、酸性淀粉酶60-75U、果胶酶6000-7000U。该复合酶能同时提取中草药中两种有效成分，效果显著，可用于提取益母草、炙淫羊藿和金银花中有效成分。

【技术实现步骤摘要】
一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法
本专利技术涉及
，特别是涉及一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法。
技术介绍
从中草药中提取有效成分的方法有多种，其中酶提取法是较新的方法。其中，常用的酶有纤维素酶、果胶酶、蛋白酶和淀粉酶。通常来说，由多种酶组成的复合酶的酶解效果要优于单独使用一种酶的酶解效果。但是，由于中药材的品种不同，其生物体细胞结构和有效成分有很大的差异；而酶又具有单一性，复合酶的组成、配比决定了其功效。所以，也就是说，复合酶的酶解效果并不一定优于单一酶的酶解效果，因所要酶解的中药材而异。例如，由纤维素酶和果胶酶组成的复合酶在提取金银花中绿原酸中的酶解效果与单一的纤维素酶在提取金银花中绿原酸中的酶解效果相比，并没有明显差异。另一方面，目前对酶法提取中药成分的研究主要还停留在针对某些单个具体提取对象。也就是说，目前只能针对一种中药材进行研究，获得仅适用于该中药材提取特定成分的复合酶。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法。该复合酶能同时提取中草药中两种有效成分，效果显著，可用于提取益母草、炙淫羊藿和金银花中有效成分。本专利技术的一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法技术方案为，该复合酶由纤维素酶、酸性淀粉酶和果胶酶组成；lg复合酶中含纤维素酶500-700U、酸性淀粉酶60-75U、果胶酶 6000-7000U。`Ig复合酶中含纤维素酶667U、酸性淀粉酶66.7U、果胶酶6667U。该复合酶用于提取益母草中的还原糖和盐酸水苏碱；或者提取炙淫羊藿中的还原糖和淫羊藿苷；或者提取金银花中的还原糖和绿原酸。该复合酶提取中草药中有效成分的方法，包括以下步骤: (1)将中草药粉碎成粉状； (2)将中草药粉加入去离子水混合均匀，PH调至4.5，得料液； (3)将复合酶用甘油水溶液稀释得复合酶稀释液； (4)将步骤(2)的料液预热，加入复合酶稀释液，酶解后过滤，取滤液即可。步骤(1)中，中草药粉碎至40-200目。步骤(3)中，甘油水溶液浓度为20wt %，将复合酶用甘油水溶液稀释至0.0020g-0.5g/ml，得复合酶稀释液。当中草药为益母草时，复合酶稀释液浓度为0.025-0.30g/ml ； 当中草药为炙淫羊藿时，复合酶稀释液的浓度为0.025-0.28g/ml ； 当中草药为金银花时，复合酶稀释液的浓度为0.025-0.3g/ml。优选的,复合酶稀释液的优选浓度为0.25g/ml.步骤(4)中，将料液于水浴锅中预热2min，边搅拌边加入酶液，酶解温度为40-55°C，时间 4-7h。优选的，步骤(4)中，酶解温度为50°C，时间5h。每克益母草提取35.7-181mg还原糖和5.6-10.8mg盐酸水苏碱；每克炎淫羊藿提取38.85-97mg还原糖和8.4-10.8g淫羊藿苷；每克金银花提取80.13-420.57mg还原糖和13.6-16.8mg 绿原酸。优选的，具体步骤如下:称取中草药5.0OOg (粉状)置于200ml烧杯中，加入200mL的去离子水摇匀；然后加入0.5mL lmol/L的硫酸溶液将pH值调至4.5，得料液。取复合酶(每克复合酶中含有纤维素酶667u、酸性淀粉酶66.7u和果胶酶6667u)用20#%甘油溶解稀释稀释至lml，得酶液。将料液于50° C水浴锅中预热2min，边搅拌边迅速加入酶液，静置保温5h ;然后过滤，取滤液。其中，1g中草药需要复合酶稀释液lml。本专利技术的有益效果为:本专利技术的复合酶破坏中草药的细胞壁，降低粘度，提高中草药浸提收得率，能够同时用于提取益母草、炙淫羊藿和金银花中有效成分；从而克服了一种特定组成的复合酶只能用于一种中草药的技术难题。另外，采用本专利技术的复合酶，能够同时提取上述每种中药材中两种有效成分。具体来说，能够提取益母草中的还原糖和盐酸水苏碱；能够提取炙淫羊藿中的还原糖和淫羊藿苷；能够提取金银花中的还原糖和绿原酸；且提取率高。本专利技术的方法，简单易操作，能同时提取两种有效成分，提取率显著提高。经检测，采用本专利技术方法，每克益母草可以提取35.7-181mg还原糖和5.6-10.8mg盐酸水苏碱；每克炙淫羊藿可以提取35.04-97mg还原糖和8.4-10.Sg淫羊藿苷；每克金银花为可以提取80.13-420.57mg还原糖和13.6-16.8mg绿原酸。与未采用酶水解或采用纤维素酶和果胶酶组成的复合酶水解相比，每种原料中的两种有效成分的提取率均大幅度提高，提取率提高了 16.4-495%。由于复合酶的浓度会对酶的活性产生影响，从而影响整个提取过程；而不同原料其生物体细胞结构和有效成分有很大的差异；所需要的最优复合酶浓度不同。因此，所以上述方法中，当原料为益母草时，复合酶稀释液的优选浓度为0.025-0.30g/ml ;此时，还原糖提取率为57.3-181mg/g,盐酸水苏碱的提取率为8.4-10.8mg/g。最优选的，复合酶稀释液的优选浓度为0.25g/ml ;此时，还原糖提取率为181mg/g，盐酸水苏碱的提取率为10.8mg/g°当原料为炙淫羊藿时，复合酶稀释液的优选浓度为0.025-0.28g/ml ;此时，还原糖提取率为38.85-97mg/g,淫羊藿苷的提取率为9.6-10.8mg/g。最优选的，复合酶稀释液的优选浓度为0.25g/ml ;此时，还原糖提取率为97mg/g，淫羊藿苷的提取率为10.8mg/g。当原料为金银花时，复合酶稀释液的优选浓度为0.025-0.3g/ml ;此时，还原糖提取率为168.3-420.57mg/g，绿原酸的提取率为14.8-16.8mg/g。最优选的，复合酶稀释液的优选浓度为0.25g/ml ;此时，还原糖提取率为420.57mg/g，绿原酸的提取率为16.8mg/g。【具体实施方式】:为了更好地理解本专利技术，下面用具体实例来详细说明本专利技术的技术方案。本专利技术中的果胶酶、纤维素酶、酸性淀粉酶为: 果胶酶QB1502-92:lg酶粉在50°C、pH3.5的条件下，Ih分解果胶产生Img半乳糖醛酸为一个酶活力单位。纤维素酶NY/T912-2004:在37°C、pH为5.50的条件下，每分钟从浓度为4mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放I μ mol还原糖所需要的酶量为一个酶活力单位(U)。酸性淀粉酶:Ig酶，于40°C、pH3.0条件，Imin液化Img可溶性淀粉，即为I个酶活力单位，以u/ g表示。本专利技术的一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法，该复合酶由纤维素酶、酸性淀粉酶和果胶酶组成；lg复合酶中含纤维素酶500-700U、酸性淀粉酶60-75U、果胶酶6000-7000U。该复合酶用于提取益母草中的还原糖和盐酸水苏碱；或者提取炙淫羊藿中的还原糖和淫羊藿苷；或者提取金银花中的还原糖和绿原酸。该复合酶提取中草药中有效成分的方法，包括以下步骤: (1)将中草药粉碎成粉状； (2)将中草药粉加入去离子水混合均匀，PH调至4.5，得料液； (3)将复合酶用甘油水溶液稀释得复合酶稀释液； (4)将步骤(2)的料液预热，加入复合酶稀释液，酶解后过滤，取滤液即可。 步骤(1)中，中草药粉碎至40-20本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合酶，其特征在于，由纤维素酶、酸性淀粉酶和果胶酶组成；lg复合酶中含纤维素酶500-700U、酸性淀粉酶60-75U、果胶酶6000-7000U。2.根据权利要求1所述的一种复合酶，其特征在于，Ig复合酶中含纤维素酶667U、酸性淀粉酶66.7U、果胶酶6667U。3.根据权利要求1所述的一种复合酶，其特征在于，该复合酶用于提取益母草中的还原糖和盐酸水苏碱；或者提取炙淫羊藿中的还原糖和淫羊藿苷；或者提取金银花中的还原糖和绿原酸。4.如权利要求3所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)将中草药粉碎成粉状； (2)将中草药粉加入去离子水混合均匀，PH调至4.5，得料液； (3)将复合酶用甘油水溶液稀释得复合酶稀释液； (4)将步骤(2)的料液预热，加入复合酶稀释液，酶解后过滤，取滤液即可。5.根据权利要求4所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法，其特征在于，步骤(I)中，中草药粉碎至40-200目。6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴秀玉，宋迪，郭殿梁，
申请(专利权)人：济南诺能生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：