一种透明质酸组织粘合剂的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种组织粘合剂的制备方法，特别是一种透明质酸组织粘合剂的制备方法，属于生物材料制备技术领域。本发明专利技术制备方法通过马来酰基、醛基以及多巴胺修饰透明质酸钠分子的工艺，大大提高接枝多巴胺含量，可以充分发挥高含量多巴胺高粘结作用的同时，残留的醛基会与组织中氨基作用协同增强粘结强度。此外，本发明专利技术制备方法可实现碳碳双键低含量取代，避免得到的组织粘合剂后续固化时因收缩导致的粘结面封闭不完全、组织液渗漏的问题。本发明专利技术方法制得的组织粘合剂在紫外光的照射下迅速凝胶，且凝胶安全、生物相容性好、粘结强度高、可完全降解吸收。

Method for preparing hyaluronic acid tissue adhesive

The invention relates to a preparation method of tissue adhesive, in particular to a preparation method of hyaluronic acid tissue adhesive, which belongs to the technical field of biological material preparation. The preparation method of the invention, by Maleyl aldehyde and dopamine modified process of sodium hyaluronate molecules, greatly improve the content of dopamine graft, can give full play to the high content of dopamine with high bonding effects. At the same time, aldehyde residues and tissue amino synergistically enhance the bond strength. In addition, the preparation method of the invention can realize the low substitution of the carbon carbon double bond, and avoid the problem that the bonding surface is not completely closed and the tissue fluid leakage is caused by the contraction of the obtained tissue adhesive during the subsequent curing. The tissue adhesive obtained by the method of the invention rapidly gel under the irradiation of ultraviolet light, and has the advantages of good safety, good biocompatibility, high adhesive strength and complete degradation and absorption of the gel.

【技术实现步骤摘要】
一种透明质酸组织粘合剂的制备方法
本专利技术涉及一种组织粘合剂的制备方法，特别是一种透明质酸组织粘合剂的制备方法，属于生物材料的制备

技术介绍
组织粘合剂是一种用于局部组织粘合、毛细血管止血等软组织损伤封闭与修复的生物医学材料，其使用可替代传统复杂耗时的外科手术缝合，起到快速封闭创面、避免创面感染、有效减轻瘢痕的效果。理想的组织粘合剂一般具备以下条件：生物相容性好；粘合速度快、粘合强度高；粘合时热量小，避免灼伤组织；在组织内可降解、吸收等。目前，临床上使用较多的是氰基丙烯酸酯类粘合剂、纤维蛋白类粘合剂等。中国专利公开号为CN104958781A，公开日为2015年10月7日，专利技术名称为“一种化学医用粘合剂组合物及其制备方法”公开了氰基丙烯酸酯粘合剂的制备方法；中国专利公开号为CN103272263B，公开日为2014年10月22日，专利技术名称为“一种医用粘合剂”公开了氰基丙烯酸酯粘合剂。然而，氰基丙烯酸酯类粘合剂虽然能在常温下迅速固化，但是胶层脆性大，易受温度、强度、生理环境因素影响导致粘固不牢。此外，氰基丙烯酸酯类粘合剂在储存、使用过程中会产生甲醛，对生物体组织产生副作用。再者，使用过程中因聚合反应产生的热量会对机体组织造成一定程度的灼伤。这些不足之处大大限制了氰基丙烯酸酯类粘合剂在医疗领域的应用。中国专利公开号为CN101352581A，公开日为2009年1月28日，专利技术名称为“关节软骨修复移植物固定用粘合剂及人纤维蛋白原在制备该粘合剂中的应用”等公开了纤维蛋白类粘合剂的制造方法。然而，纤维蛋白类粘合剂虽然具有良好的生物相容性和可降解性，但是因其来源为异体的人或动物血清而可能存在潜在的病毒感染风险，其临床使用的安全性受到广泛关注。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术的目的在于提供一种安全、生物相容好、粘结强度高、可降解吸收的组织粘合剂的制备方法。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为：一种透明质酸组织粘合剂的制备方法，所述制备方法按以下步骤进行：a.马来酰化透明质酸钠的制备将透明质酸钠和马来酸酐置于二甲基甲酰胺中，透明质酸钠与二甲基甲酰胺质量体积比为1：4～100，透明质酸钠分子链上羟基与马来酸酐的酸酐基摩尔比为1：0.01～0.1，室温下搅拌均匀，在25～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，在反应结束后的透明质酸钠、马来酸酐、二甲基甲酰胺的混合溶液中加入1mol/L的碱溶液，调整混合溶液的pH值至7-8，将调整pH值后的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成马来酰化透明质酸钠溶液，将马来酰化透明质酸钠溶液在温度为-50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥24～72小时，得到马来酰基摩尔取代度为0.05～0.2的马来酰化透明质酸钠。b.醛基化马来酰化透明质酸钠的制备将由步骤a得到的马来酰化透明质酸钠置于去离子水中，马来酰化透明质酸钠与去离子水质量体积比为1：20～100，室温下搅拌10小时，形成马来酰化透明质酸钠水溶液，在马来酰化透明质酸钠水溶液中加入高碘酸钠，马来酰化透明质酸钠分子链上羟基与高碘酸钠的摩尔比为1：0.1～10，室温下搅拌均匀，在25～60℃条件下反应，反应时间为1～24小时，将反应结束后的马来酰化透明质酸钠、高碘酸钠的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成醛基化马来酰化透明质酸钠溶液，将醛基化马来酰化透明质酸钠溶液在温度为-50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥48小时，得到醛基摩尔取代度为0.2～0.5的醛基化马来酰化透明质酸钠。c.多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠的制备将由步骤b得到的醛基化马来酰化透明质酸钠置于去离子水中，醛基化马来酰化透明质酸钠与去离子水质量体积比为1：20～1000，室温下搅拌5小时，形成醛基化马来酰化透明质酸钠水溶液，在醛基化马来酰化透明质酸钠水溶液中加入盐酸多巴胺，醛基化马来酰化透明质酸钠分子链上醛基与盐酸多巴胺摩尔比为1：0.1～10，室温下搅拌均匀，在25～60℃条件下反应，反应时间为1～24小时，将反应结束后的醛基化马来酰化透明质酸钠、盐酸多巴胺的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠溶液，将多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠溶液在温度为-50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥48小时，得到多巴胺摩尔取代度为0.1～0.6的多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠。d.透明质酸组织粘合剂的制备将由步骤c得到的多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠与紫外光引发剂、磷酸盐缓冲溶液按照质量百分比分别为：多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠2～20％光引发剂0.05～0.1％磷酸盐缓冲溶液79.9～97.95％的比例，室温下混合均匀，得到粘度为1000～100000cps的透明质酸生物粘合剂。所述碱溶液为碳酸钾或碳酸氢钠溶液或碳酸氢钾溶液或碳酸钠溶液中的一种。所述光引发剂为2-羟基-2-甲基-1-对羟乙基醚基苯基丙酮或1-羟基环己基苯基甲酮或2,2-二甲氧基-苯基苯乙酮中的一种。所述磷酸盐缓冲溶液为pH值为7.0～7.4的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液或K2HPO4-KH2PO4缓冲溶液中的一种。由于采用以上技术方案，本专利技术的一种透明质酸组织粘合剂的制备方法其有益技术效果是：(1)本专利技术的制备方法中通过透明质酸醛基化的工艺，大大提高接枝多巴胺的含量，显著增强透明质酸组织粘合剂的粘结强度。此外，分子链上残留的醛基能与组织中的氨基发生作用，协同增强透明质酸组织粘合剂的粘结强度。(2)本专利技术的制备方法中采用二甲基甲酰胺溶剂中马来酰基修饰透明质酸钠的工艺，实现马来酰化透明质酸钠分子链上碳碳双键的低含量接枝，使得透明质酸组织粘合剂在后续紫外光照射下，完成粘结的同时，避免了紫外光固化体系体积收缩导致的组织粘结面封闭不完全、组织液渗漏的缺陷。(3)本专利技术的制备方法中采用的是自然界中广泛存在的天然高分子化合物，使得制得的生物粘合剂具备安全、生物相容、可降解吸收的特点。本专利技术制备方法简单、成本低，易工业化生产。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术一种透明质酸组织粘合剂作进一步详细描述。一种透明质酸组织粘合剂的制备方法，所述制备方法按以下步骤进行：a.马来酰化透明质酸钠的制备将透明质酸钠和马来酸酐置于二甲基甲酰胺中，透明质酸钠与二甲基甲酰胺质量体积比为1：4～100，透明质酸钠分子链上羟基与马来酸酐的酸酐基摩尔比为1：0.01～0.1，室温下搅拌均匀，在25～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，在反应结束后的透明质酸钠、马来酸酐、二甲基甲酰胺的混合溶液中加入1mol/L的碱溶液，调整混合溶液的pH值至7-8，将调整pH值后的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成马来酰化透明质酸钠溶液，将马来酰化透明质酸钠溶液在温度为-50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥24～72小时，得到马来酰基摩尔取代度为0.05～0.2的马来酰化透明质酸钠。所述碱溶液为碳酸钾或碳酸氢钠溶液或碳酸氢钾溶液或碳酸钠溶液中的一种。透明质酸钠是一种由D-葡糖醛酸和N-乙酰-D-氨基葡糖为双糖单元组成的直链型高分子多糖，具有良好的生物相容性与生物可降解性。作为人体组织细胞外基质的主要成分之一，透明质酸钠能与多种细胞受体相互作用，以此本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种透明质酸组织粘合剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法按以下步骤进行：a.马来酰化透明质酸钠的制备将透明质酸钠和马来酸酐置于二甲基甲酰胺中，透明质酸钠与二甲基甲酰胺质量体积比为1：4～100，透明质酸钠分子链上羟基与马来酸酐的酸酐基摩尔比为1：0.01～0.1，室温下搅拌均匀，在25～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，在反应结束后的透明质酸钠、马来酸酐、二甲基甲酰胺的混合溶液中加入1mol/L的碱溶液，调整混合溶液的pH值至7‑8，将调整pH值后的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成马来酰化透明质酸钠溶液，将马来酰化透明质酸钠溶液在温度为‑50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥24～72小时，得到马来酰基摩尔取代度为0.05～0.2的马来酰化透明质酸钠；b.醛基化马来酰化透明质酸钠的制备将由步骤a得到的马来酰化透明质酸钠置于去离子水中，马来酰化透明质酸钠与去离子水质量体积比为1：20～100，室温下搅拌10小时，形成马来酰化透明质酸钠水溶液，在马来酰化透明质酸钠水溶液中加入高碘酸钠，马来酰化透明质酸钠分子链上羟基与高碘酸钠的摩尔比为1：0.1～10，室温下搅拌均匀，在25～60℃条件下反应，反应时间为1～24小时，将反应结束后的马来酰化透明质酸钠、高碘酸钠的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成醛基化马来酰化透明质酸钠溶液，将醛基化马来酰化透明质酸钠溶液在温度为‑50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥48小时，得到醛基摩尔取代度为0.2～0.5的醛基化马来酰化透明质酸钠；c.多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠的制备将由步骤b得到的醛基化马来酰化透明质酸钠置于去离子水中，醛基化马来酰化透明质酸钠与去离子水质量体积比为1：20～1000，室温下搅拌5小时，形成醛基化马来酰化透明质酸钠水溶液，在醛基化马来酰化透明质酸钠水溶液中加入盐酸多巴胺，醛基化马来酰化透明质酸钠分子链上醛基与盐酸多巴胺摩尔比为1：0.1～10，室温下搅拌均匀，在25～60℃条件下反应，反应时间为1～24小时，将反应结束后的醛基化马来酰化透明质酸钠、盐酸多巴胺的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠溶液，将多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠溶液在温度为‑50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥48小时，得到多巴胺摩尔取代度为0.1～0.6的多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠；d.透明质酸组织粘合剂的制备将由步骤c得到的多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠与紫外光引发剂、磷酸盐缓冲溶液按照质量百分比分别为：多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠  2～20％光引发剂                            0.05～0.1％磷酸盐缓冲溶液                      79.9～97.95％的比例，室温下混合均匀，得到粘度为1000～100000cps的透明质酸生物粘合剂。...

【技术特征摘要】
1.一种透明质酸组织粘合剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法按以下步骤进行：a.马来酰化透明质酸钠的制备将透明质酸钠和马来酸酐置于二甲基甲酰胺中，透明质酸钠与二甲基甲酰胺质量体积比为1：4～100，透明质酸钠分子链上羟基与马来酸酐的酸酐基摩尔比为1：0.01～0.1，室温下搅拌均匀，在25～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，在反应结束后的透明质酸钠、马来酸酐、二甲基甲酰胺的混合溶液中加入1mol/L的碱溶液，调整混合溶液的pH值至7-8，将调整pH值后的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成马来酰化透明质酸钠溶液，将马来酰化透明质酸钠溶液在温度为-50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥24～72小时，得到马来酰基摩尔取代度为0.05～0.2的马来酰化透明质酸钠；b.醛基化马来酰化透明质酸钠的制备将由步骤a得到的马来酰化透明质酸钠置于去离子水中，马来酰化透明质酸钠与去离子水质量体积比为1：20～100，室温下搅拌10小时，形成马来酰化透明质酸钠水溶液，在马来酰化透明质酸钠水溶液中加入高碘酸钠，马来酰化透明质酸钠分子链上羟基与高碘酸钠的摩尔比为1：0.1～10，室温下搅拌均匀，在25～60℃条件下反应，反应时间为1～24小时，将反应结束后的马来酰化透明质酸钠、高碘酸钠的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成醛基化马来酰化透明质酸钠溶液，将醛基化马来酰化透明质酸钠溶液在温度为-50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥48小时，得到醛基摩尔取代度为0.2～0.5的醛基化马来酰化透明质酸钠；c.多巴胺接枝醛基化马来酰化透明质酸钠的制备将由步骤b得到的醛基化马来酰化透明质酸钠置于去离子水中，醛基化马来酰化透明质酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：周应山，李军，张灿，梁凯利，刘欣，杨红军，柏自奎，顾绍金，徐卫林，
申请(专利权)人：武汉纺织大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42