The invention relates to the application of temperature sensitive polymer array and its preparation method in the pretreatment of the sample, click chemistry technology light printing technology and alkynyl and thiol based on indium tin oxide glass (ITO glass) to construct hydrophilic hydroxyl microarrays, in microarray based on hydrophilic surface initiated atom transfer radical polymerization poly (N isopropylacrylamide) (PNIPAM) controlled hydrophilic array. When below the critical temperature of the hydrophilic polymer array effect makes the samples converge on the glass surface is higher than the critical temperature, protein / peptide polymer array through hydrophobic interaction with the hydrophobic adsorption, and the coexistence of salt and pollutants are washed away, so as to realize the sample target since the addition of salt and efficient enrichment pretreatment, and then MALDI can be MS one step rapid detection of target samples. The invention has the advantages of simple preparation, simple operation, high universality, short analysis time and low cost, and has certain biomedical application value.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及温敏响应高分子阵列的制备方法及其在样品预处理中的应用,具体包括直接在氧化铟锡玻片(ITO玻片)表面生长高分子聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)来制备可控亲水性阵列,并将其用于样品的预处理。
技术介绍
生物质谱是蛋白质组学研究的重要技术手段,在蛋白样品的处理过程中非挥发性盐的存在会抑制样品的离子化,从而造成检测的灵敏度的降低甚至无法检测,因此,对蛋白质或多肽样品进行除盐往往是质谱分析前必不可少的步骤。目前,对蛋白质/肽段样品的除盐方法主要是基于固相萃取技术,即蛋白或多肽保留在吸附材料上,盐类不吸附而被除去,然后将保留的蛋白或肽段洗脱下来进行检测,该方法虽然已推广应用,但是由于处理过程中需要多次的样品吸附、洗脱、转移,所以存在步骤复杂、所需时间长、而且会造成样品的损失和潜在的样品污染等缺点。近年来,利用疏水聚合物的表面化技术实现了样品高效靶上原位除盐与富集后直接用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-MS)检测,该方法虽然可避免样品额外的损失以及污染物的引入,但刚性的憎水高分子会在表面形成一层致密的单分子层进而会限制样品与吸附剂的充分接触,所以对样品的表面富集及检测的灵敏度会造成影响。聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAM)是一种温敏型聚合物,当环境温度低于其最低临界温度LCST(32℃)时,亲水基团与水分子呈现较强的氢键作用,PNIPAM聚合物可溶于水,聚合物链在水中呈现伸展结构。温度高于LCST时,氢键破坏,异丙基和碳链的疏水作用导致PNIPAM聚合物链呈现收缩结构。近年来,PNIPAM修饰的纳米颗粒已被用于温度可控的样品的富集和释 ...
【技术保护点】
温敏响应高分子阵列的制备方法,其特征在于,利用光影印技术和炔基与巯基的点击化学技术,在氧化铟锡玻片(ITO玻片)构建羟基(OH)亲水性微阵列;利用羟基与2‑溴异丁酰溴(BIBB)间的共价反应形成原位自由基聚合反应的引发剂,再在溴化亚铜(CuBr)和2,2’‑联吡啶(Bpy)的催化下,单体N‑异丙基丙烯酰胺(NIPAM)在ITO玻片表面聚合生成所述温敏反应高分子阵列,即高分子聚(N‑异丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)的可控亲水性阵列。
【技术特征摘要】
1.温敏响应高分子阵列的制备方法,其特征在于,利用光影印技术和炔基与巯基的点击化学技术,在氧化铟锡玻片(ITO玻片)构建羟基(OH)亲水性微阵列;利用羟基与2-溴异丁酰溴(BIBB)间的共价反应形成原位自由基聚合反应的引发剂,再在溴化亚铜(CuBr)和2,2’-联吡啶(Bpy)的催化下,单体N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)在ITO玻片表面聚合生成所述温敏反应高分子阵列,即高分子聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)的可控亲水性阵列。2.如权利要求1所述的温敏响应高分子阵列的制备方法,其特征在于,所述羟基亲水性微阵列的制备:1-硫代甘油通过光引发剂安息香二乙醚,使巯基(SH)与ITO玻片上的炔基共价结合,形成羟基亲水性微阵列。3.如权利要求1所述的温敏响应高分子阵列的制备方法,其特征在于,利用表面原位生成的所述引发剂,在常温有机相条件下引发表面原子转移自由基聚合反应。4.权利要求1所述的温敏响应高分子阵列的制备方法制得的高分子阵列的应用,其特征在于,所述温敏反应高分子阵列可通过温度转变自发进行表面除盐及样品富集,并用于对样品的预处理。5.如权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘颖,鞠熀先,孟潇,成全,
申请(专利权)人:南京大学,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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