【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物工程，特别涉及一种基于人nlrp6启动子的荧光素酶报告基因检测系统、构建及应用。
技术介绍
1、nlrp6是nod样受体家族成员之一，其结构由一个n端吡啶结构域、一个中央核苷酸结合寡聚结构域和一个c末端富含亮氨酸的重复序列结构域共同构成。当如毒素、外源蛋白、微生物及病毒刺激等危险信号引起nlrp6激活后，nlrp6能够与凋亡相关斑点样蛋白asc和pro-caspase-1或pro-caspase-11共同组成nlrp6炎症小体，介导促炎细胞因子il-18和il-1β的成熟和分泌，诱导炎性免疫反应，同时nlrp6还可以独立于炎症小体的方式发挥其功能。nlrp6主要在肝脏、肺、肠胃等器官组织表达，尤其在肠道中表达最高。nlrp6炎性体在肠上皮细胞中被认为在调节肠道微生物组成、杯状细胞功能以及对胃肠道炎症、感染和肿瘤疾病易感性方面发挥作用。
2、人体胃肠道是目前nlrp6研究最广的器官，在肠道中nlrp6不仅参与炎症小体的形成，还参与nf-κb和mapk信号，能够促进胃肠道的抗病毒效应，调节粘液分泌和抗菌肽的产生...
【技术保护点】
1.一种基于人NLRP6启动子的荧光素酶报告基因检测系统，其特征在于，包括N6-P-Luc表达载体，所述N6-P-Luc表达载体由SEQ ID NO.1所示的人NLRP6转录起始位点上游1163bp序列克隆到在空载体pGL4.20多克隆位点区域构建而成。
2.一种基于人NLRP6启动子的荧光素酶报告基因检测细胞模型，其特征在于，所述细胞模型为含有如权利要求1所述的N6-P-Luc表达载体的细胞。
3.一种建立如权利要求2所述的细胞模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.如权利要求3的一种建立细胞模型的方法，其特征在于，所述步骤(...
【技术特征摘要】
1.一种基于人nlrp6启动子的荧光素酶报告基因检测系统，其特征在于，包括n6-p-luc表达载体，所述n6-p-luc表达载体由seq id no.1所示的人nlrp6转录起始位点上游1163bp序列克隆到在空载体pgl4.20多克隆位点区域构建而成。
2.一种基于人nlrp6启动子的荧光素酶报告基因检测细胞模型，其特征在于，所述细胞模型为含有如权利要求1所述的n6-p-luc表达载体的细胞。
3.一种建立如权利要求2所述的细胞模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.如权利要求3的一种建立细胞模型的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，设计的引物为nlrp6启动子片段添加酶切位点及保护碱基，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示，下游引物的核苷酸序列如seq id no.3所示。
5.如权利要求4的一种建立细胞模型的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，pcr程序为：
6.如权利要求4的一种建立细胞模型的方法，其特征在于...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。