【技术实现步骤摘要】
一种四氧化三铁免疫纳米磁珠及其制备方法和应用
本专利技术属于免疫纳米磁珠的
,具体涉及一种Fe3O4免疫纳米磁珠及其制备方法和应用。
技术介绍
随着食品行业的快速发展,环境污染加剧,过敏食物越来越多,食品过敏的发病率和流行情况日益加剧,食品过敏性疾病已成为一个新兴的、公众性、全球性的健康问题。其中,坚果类制品的过敏更是占有很大的比重,因坚果类食品具有极高的营养价值及独特的风味,作为疗效食品和休闲食品深受消费者的喜爱,但是坚果类食品过敏涉及食物过敏症的90%。因此在食品标签上标清过敏原的存在是避免过敏患者食入潜在过敏原的最有效途径,坚果过敏原的检测是有必要的。现有的检测方法基本上都是通过前期的分离与富集后,再通过生物传感器法、质谱分析方法,进而确认靶标蛋白,检测速度慢,对设备要求高,成本高。纳米磁珠因其独特的磁学特性,如超顺磁性和高矫顽力,在生物医学领域具有广阔的应用前景而备受关注。纳米磁珠在细胞分离、固定化酶、免疫诊断及肿瘤靶向治疗、DNA分离及核酸杂交等方面均有广泛应用,其中将纳米磁珠和抗体结合制成免疫磁珠,因其在免疫检测、细胞分离和生物大分子纯化等方面的 ...
【技术保护点】
一种四氧化三铁免疫纳米磁珠的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备纳米磁珠:将Fe
【技术特征摘要】
1.一种四氧化三铁免疫纳米磁珠的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备纳米磁珠:将Fe2+的铁盐和Fe3+的铁盐溶解于水中,得铁盐溶液;所述Fe2+的铁盐中Fe2+和Fe3+的铁盐中Fe3+的摩尔比为1:1-2;在65-75℃的温度下,先超声铁盐溶液4-6分钟,再加入过量的氢氧化钠溶液并搅拌25-35分钟,再静置晶化2-3小时,得四氧化三铁沉淀;通过磁分离将四氧化三铁沉淀分离出来,先用蒸馏水洗涤2-3次,再无水乙醇洗涤2-3次,得四氧化三铁纳米磁珠无水乙醇混合液;(2)纳米磁珠的表面修饰:将四氧化三铁纳米磁珠无水乙醇混合液用无水乙醇稀释5-7倍,得稀释后的纳米磁珠无水乙醇混合液;超声振荡稀释后的纳米磁珠无水乙醇混合液25-35分钟后,加入硅烷化试剂,室温下搅拌6-8小时,磁分离,得硅烷化四氧化三铁纳米磁珠;所述硅烷化试剂为APTES;用无水乙醇溶液洗涤硅烷化四氧化三铁纳米磁珠2-3次,得到硅烷化四氧化三铁纳米磁珠无水乙醇混合液;再用PBS缓冲液洗涤硅烷化四氧化三铁纳米磁珠无水乙醇混合液2-3次,得磁珠混合液;向磁珠混合液中加入戊二醛溶液,室温下振荡交联1.5-2.5小时,再磁分离,弃去上清液,得氨基化四氧化三铁纳米磁珠混合液混合液;(3)免疫磁珠的制备:用抗体包被氨基化四氧化三铁纳米磁珠混合液混合液,室温下振荡固定1.5-2.5小时,磁分离,得包被后的氨基化四氧化三铁纳米磁珠混合液,用蒸馏水和PBS缓冲液分别洗涤3-4次,得四氧化三铁免疫...
【专利技术属性】
技术研发人员:张爱琳,钟凯,樊秀花,张登科,
申请(专利权)人:天津农学院,
类型:发明
国别省市:天津,12
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