复方丹茵膏的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种复方丹茵膏的检测方法,该方法包括性状、成分鉴别、检查、含量测定，是针对该复方丹茵膏原检测标准不完善，标准中除按照制剂通则进行一般指标的检测外，没有其它任何质量检测措施，就不能够很好地监测药品质量,从而增加了对茵陈和青蒿的鉴别、丹参和秦艽的鉴别、柴胡的鉴别、甘草的鉴别，增加了对丹参酮ⅡA的含量测定、丹酚酸B的含量测定,本发明专利技术可有效的检测不法厂商是否少投或不投相应药材原料，也检测了易混淆的青蒿、秦艽的混入，防止了误用和乱用，从而能有效的保证复方丹茵膏的质量，使该药品安全有效，保证该药品的临床疗效，维护患者的利益。

【技术实现步骤摘要】
复方丹茵膏的检测方法
本专利技术涉及一种中药制剂的检测方法，特别涉及一种复方丹茵膏的检测方法。
技术介绍
：复方丹茵膏是《卫生部药品标准中药成方制剂》第二册收载的药品，标准编号是WS3-B-0339-90，处方为茵陈、丹参、柴胡、白茅根、板蓝根、甘草、大枣，是纯中药的煎膏剂，它具有清热利湿，解毒退黄的作用，临床上用于治疗急性传染性肝炎，是目前市场上清热利湿，解毒退黄，用于治疗急性传染性肝炎的常用药品，但由于此标准是上一个世纪80年代末制定的，限于当时的技术水平和检测仪器条件，原标准还很不完善，标准中除按照制剂通则进行一般指标的检测外，没有其它任何质量检测措施，就不能够很好地保证药品质量。一方面，本药品的处方中用量最大的药材之一是茵陈，占整个处方量的四分之一，但是茵陈药材容易与青蒿混淆入药，给药品质量和疗效造成不良影响，茵陈为菊科多年生草本植物茵陈蒿或滨蒿的幼苗，性味苦寒，归脾、胃、肝、胆经，主要的功效就是清利湿热，消退黄疸，亦可用于湿疮瘙痒、浸流黄水等症。而青蒿却为菊科一年生草本植物青蒿和黄花蒿的全草，而以黄花蒿为最多见、最普遍，性味苦、辛、寒，归肝、胆、肾经，主要的功效为清退虚热，凉血截疟，解暑解热等，用于疟疾寒热，阴虚发热，骨蒸劳瘵，日晡潮热，手足心热，暑热外感，发热无汗或有汗，头昏头痛，口渴脉洪数，或温热病后期，温热之邪入阴分，夜热早凉，热退无汗之证或温热病后低热不退等等。两者的作用不同，必须要有相应的检测方法进行监测。另一方面，本药品的处方中另一个用量最大的药材之一是丹参，也占整个处方量的四分之一，但是丹参药材往往被秦艽假冒或者混淆入药，给药品质量和疗效造成不良影响，秦艽为龙胆科植物的干燥根，丹参为唇形科植物的干燥根及根茎，但是由于两者的外观性状颇相似，近年来,常常发现人们有人将两种药材混淆使用,但是两者的作用不同，必须要有相应的检测方法进行监测。所以，上述问题可导致许多不法厂商在生产药品时不严格按照处方的剂量配料，甚至肆意减少价格高的原料，致使药品的疗效明显下降，影响药品的安全有效，严重损害患者的利益。
技术实现思路
：本专利技术的目的，是提供一种复方丹茵膏的检测方法，该方法通过增加主要药材茵陈、丹参、柴胡、甘草的薄层色谱鉴别，以及增加了易混淆药材青蒿、秦艽的薄层色谱鉴别，增加了丹参药材中主要成分丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量测定，从而有效的监测不法厂商是否少投或不投相应药材原料，也监测了易混淆的青蒿、秦艽的混入，防止了误用和乱用，从而能有效的监测复方丹茵膏的质量，使该药品安全有效，保证该药品的临床疗效，维护患者的利益。本专利技术是这样实现的：本专利技术提供的复方丹茵膏的检测方法，包括性状、成分鉴别、检查、含量测定项目，其中，成分鉴别是对茵陈和青蒿的鉴别、丹参和秦艽的鉴别、柴胡的鉴别、甘草的鉴别，含量测定是对丹参酮ⅡA的含量测定、丹酚酸B的含量测定。（1）茵陈和青蒿的鉴别：取本品1g，加甲醇8～12ml，超声处理20～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取滨蒿内酯对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为滨蒿内酯对照品溶液；取青蒿素对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为青蒿素对照品溶液；吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的60～90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=6～8∶3～5∶1～3为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与青蒿素对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的斑点；（2）丹参和秦艽的鉴别：取本品2g，加水8～12ml，搅拌使溶解，加乙醚15～25ml，振摇，放置0.5～2小时，分取乙醚层，备用，残液再加乙醚8～12ml，振摇，放置0.5～2小时，分取乙醚层，与前面的乙醚混合，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.3mg的溶液，作为丹参酮ⅡA对照品溶液；取龙胆苦苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.2mg的溶液，作为龙胆苦苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的苯∶乙酸乙酯=20～22∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与丹参酮ⅡA对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在与龙胆苦苷对照品色谱相应位置上，不显相同颜色的斑点；（3）柴胡的鉴别：取本品3g，加水20～40ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加在100～200目，8g，内径为2.5～3cm，湿法装柱的聚酰胺柱A上，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各80～120ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柴胡对照药材1g，加水煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加在100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱的聚酰胺柱B上，分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2～10μl和对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=11～13∶1～3∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；（4）甘草的鉴别：取本品10g，加乙醇20～40ml，搅拌使溶解，超声处理10～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～30ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取1～3次，每次10～30ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1g，加水适量，煎煮30分钟，放冷，滤过，滤液浓缩至20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的三氯甲烷∶甲醇∶水=38～42∶9～11∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（5）丹参酮ⅡA的含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以按体积比计的甲醇∶水=75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，然后再从摇匀的混合液中精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮ⅡA16μg的对照品溶液；取本品2g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，在功率120W，频率59KHz的条件下超声处理10～30分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复方丹茵膏的检测方法，包括性状、成分鉴别、检查、含量测定，其特征在于：成分鉴别是对茵陈和青蒿的鉴别、丹参和秦艽的鉴别、柴胡的鉴别、甘草的鉴别，含量测定是对丹参酮ⅡA的含量测定、丹酚酸B的含量测定；其中：（1）茵陈和青蒿的鉴别：取本品1g，加甲醇8～12ml，超声处理20～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取滨蒿内酯对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为滨蒿内酯对照品溶液；取青蒿素对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为青蒿素对照品溶液；吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的60～90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=6～8∶3～5∶1～3为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与青蒿素对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的斑点；（2）丹参和秦艽的鉴别：取本品2g，加水8～12ml，搅拌使溶解，加乙醚15～25ml，振摇，放置0.5～2小时，分取乙醚层，备用，残液再加乙醚8～12ml，振摇，放置0.5～2小时，分取乙醚层，与前面的乙醚混合，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.3mg的溶液，作为丹参酮ⅡA对照品溶液；取龙胆苦苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.2mg的溶液，作为龙胆苦苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的苯∶乙酸乙酯=20～22∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与丹参酮ⅡA对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在与龙胆苦苷对照品色谱相应位置上，不显相同颜色的斑点；（3）柴胡的鉴别：取本品3g，加水20～40ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加在100～200目，8g，内径为2.5～3cm，湿法装柱的聚酰胺柱A上，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各80～120ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柴胡对照药材1g，加水煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加在100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱的聚酰胺柱B上，分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2～10μl和对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=11～13∶1～3∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；（4）甘草的鉴别：取本品10g，加乙醇20～40ml，搅拌使溶解，超声处理10～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～30 ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取1～3次，每次10～30 ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1g，加水适量，煎煮30分钟，放冷，滤过，滤液浓缩至20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2 次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的三氯甲烷∶甲醇∶水=38～42∶9～11∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5% 香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（5）丹参酮ⅡA的含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以按体积比计的甲醇∶水=75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，然后再从摇匀的混合液中精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮ⅡA 16μg的对照品溶液；取本品2g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，在功率120W，频率59KHz的条件下超声处理10～30分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；（6）丹酚酸B的含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以按体积比计的甲醇∶乙腈∶甲酸：水=30∶10∶1∶59为流动相；检测波长为286...

【技术特征摘要】
1.一种复方丹茵膏的检测方法，包括性状、成分鉴别、检查、含量测定，其特征在于：成分鉴别是对茵陈和青蒿的鉴别、丹参和秦艽的鉴别、柴胡的鉴别、甘草的鉴别，含量测定是对丹参酮ⅡA的含量测定、丹酚酸B的含量测定；其中：（1）茵陈和青蒿的鉴别：取本品1g，加甲醇8～12ml，超声处理20～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取滨蒿内酯对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为滨蒿内酯对照品溶液；取青蒿素对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为青蒿素对照品溶液；吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的60～90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=6～8∶3～5∶1～3为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与青蒿素对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的斑点；（2）丹参和秦艽的鉴别：取本品2g，加水8～12ml，搅拌使溶解，加乙醚15～25ml，振摇，放置0.5～2小时，分取乙醚层，备用，残液再加乙醚8～12ml，振摇，放置0.5～2小时，分取乙醚层，与前面的乙醚混合，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.3mg的溶液，作为丹参酮ⅡA对照品溶液；取龙胆苦苷对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.2mg的溶液，作为龙胆苦苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的苯∶乙酸乙酯=20～22∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与丹参酮ⅡA对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在与龙胆苦苷对照品色谱相应位置上，不显相同颜色的斑点；（3）柴胡的鉴别：取本品3g，加水20～40ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加在100～200目，8g，内径为2.5～3cm，湿法装柱的聚酰胺柱A上，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各80～120ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柴胡对照药材1g，加水煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加在100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱的聚酰胺柱B上，分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2～10μl和对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=11～13∶1～3∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；（4）甘草的鉴别：取本品10g，加乙醇20～40ml，搅拌使溶解，超声处理10～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～30ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取1～3次，每次10～30ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1g，加水适量，煎煮30分钟，放冷，滤过，滤液浓缩至20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的三氯甲烷∶甲醇∶水=38～42∶9～11∶0.5～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（5）丹参酮ⅡA的含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以按体积比计的甲醇∶水=75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，然后再从摇匀的混合液中精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮ⅡA16μg的对照品溶液；取本品2g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，在功率120W，频率59KHz的条件下超声处理10～30分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；（6）丹酚酸B的含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以按体积比计的甲醇∶乙腈∶甲酸：水=30∶10∶1∶59为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；称取丹酚酸B对照品，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，在功率120W，频率59KHz的条件下超声处理10～30分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟茂团，黎黎，温国梁，林剑，
申请(专利权)人：四川逢春制药有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51