一株分泌抗嗜铬素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术提供一株分泌抗嗜铬素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，还提供了一种分泌的可特异性识别人嗜铬素A的单克隆抗体，用于多种肿瘤免疫学诊断的应用方法。CgA 蛋白是人类肾上腺髓质中含量最高的一种可溶性酸性蛋白，分子量为48 kD，广泛存在于神经元及其神经内分泌细胞和肿瘤细胞中。CgA 蛋白表达与神经内分泌肿瘤相关，被用于标记神经内分泌肿瘤，从而用于神经内分泌肿瘤的诊断。制备该抗体的抗原为一段由大肠杆菌表达、具有免疫原性活性的重组蛋白，最终获得的抗体属于IgG2b亚型，对多种肿瘤组织的免疫组织化学检测发现，该抗体可以很好的鉴别肿瘤的发生，可用于这些肿瘤的免疫学诊断。

A hybridoma cell line secreting monoclonal antibodies against chromogranin A and its use

The invention provides a strain secreting anti chromogranin A monoclonal antibody hybridoma cell line and its application, also provides a specific recognition of human secreted monoclonal antibody A addicted to chromium, used to a variety of tumor immunology diagnosis. CgA is protein content in human adrenal medulla in one of the highest soluble acidic protein, the molecular weight of 48 kD, widely exists in neurons and neuroendocrine cells and tumor cells. The expression of CgA protein and tumor neuroendocrine related markers were used for neuroendocrine tumors, thus contributing to the diagnosis of neuroendocrine tumors. Preparation of the antibody antigen as a recombinant protein by Escherichia coli expression and immunogenic activity of the antibody obtained belonged to subtype IgG2b. Immunohistochemical detection of tumor tissue, the antibody can identify good tumor occurrence, can be used for immunological diagnosis of these tumors.

【技术实现步骤摘要】
一株分泌抗嗜铬素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
本专利技术涉及一种可以识别人嗜铬素A的单克隆抗体及可分泌该抗体的杂交瘤细胞系4E5C6-11G6。具体而言，本专利技术提供了一种抗肿瘤细胞胞浆抗原CgA的单克隆抗体，该抗体可以用于通过人工或自动化方式，以免疫组织化学染色（IHC）、酶联免疫吸附（ELISA）或免疫印迹（WesternBlot）方式检测细胞中CgA的表达水平，从而对这些肿瘤进行诊断，属于生物检测领域。
技术介绍
CgA蛋白是一种酸性亲水蛋白质，是嗜铬家族的一员，位于神经内分泌细胞的嗜铬性颗粒内。研究发现，几乎所有类型的神经内分泌肿瘤均出现CgA表达上调。因此，CgA被认为是神经内分泌肿瘤的非特异性标志物，用于该类肿瘤的诊断以及肿瘤发展进程的监测和预后判断。人源CgA蛋白分子量为48kD，包括457个氨基酸，其编码基因位于第14号染色体上。CgA蛋白含有一些公认的结构/功能区域：含有18个氨基酸的信号肽在蛋白成熟过程中被剪切；10对基本氨基酸残基可能是分裂或加工的产物；两个半胱氨酸残基结合形成一个分子内的二硫化物环；含有和胰岛素释放抑制剂相同的氨基酸序列；和已知的钙粘蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株分泌抗嗜铬素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：所述细胞株为小鼠杂交瘤细胞系4E5C6‑11G6，该细胞株已于2017年1月9日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC NO.13590。

【技术特征摘要】
1.一株分泌抗嗜铬素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：所述细胞株为小鼠杂交瘤细胞系4E5C6-11G6，该细胞株已于2017年1月9日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNO.13590。2.一种单克隆抗体，其特征在于：所述抗体由权利要求1所述的小鼠杂交瘤细胞系4E5C6-11G6分泌。3.根据权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于：其免疫小鼠用的抗原是将具有SEQIDNo.1所示的核苷酸序列编码经由大肠杆菌重组表达而获得的重组CgA抗原蛋白。4.根据权利要求3所述的单克隆抗体，其特征在于：该CgA抗原蛋白由...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪世华，杨清海，谢成杰，陈惠玲，张丹萍，贾坤志，
申请(专利权)人：福州迈新生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35