土壤尿液DNA提取试剂盒及方法技术

本发明专利技术涉及一种土壤尿液DNA提取提取试剂盒及方法，在本发明专利技术的方法中，包括如下步骤：1）DNA提取，用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤样品，离心分离土壤和上清液，上清液加入结合液，混合后加入硅基DNA吸附材料，分离硅基DNA吸附材料和液体，漂洗硅基DNA吸附材料，洗脱DNA；2）PCR扩增及电泳，将上步纯化的DNA进行PCR扩增，在电泳仪中检测DNA；采用本试剂盒及方法，克服了样品土壤来源的二氧化硅对DNA的吸附，从而减少了不必要的DNA损失，可达到获取高质量、高产量土壤尿液DNA的目的。

【技术实现步骤摘要】
土壤尿液DNA提取试剂盒及方法
本专利技术属于核酸提取纯化
，具体涉及一种土壤尿液DNA提取试剂盒及方法。
技术介绍
二氧化硅能在盐和特定pH值条件下可逆的结合DNA，这也是硅珠法、磁珠法、硅胶膜法提取DNA的理论基础；在高浓度离液盐和低pH值条件下，二氧化硅能通过氢键与DNA结合，而蛋白质、脂类、糖类等杂质因不能被结合从而被去除，去除离液盐、提高pH值之后，DNA与二氧化硅之间的相互作用力减弱，DNA从二氧化硅表面释放，从而获得纯化的DNA；土壤中含有大量的二氧化硅成分，因此，对土壤样品进行DNA提取时，需要考虑样品来源的二氧化硅对DNA的结合，一旦DNA与样品来源的二氧化硅发生结合，DNA就会随着土壤固体颗粒物质一起被去除。尿液中含有一定量的DNA，可以通过多种方法提取DNA，并用于PCR检测、STR分型检测、二代测序分析；但是，尿液中DNA含量较低，尿液浸润土壤后，被土壤吸附的DNA含量更低，要针对土壤尿液进行DNA提取，具有一定难度。
技术实现思路
本专利技术为解决上述存在的问题，提供了一种土壤尿液DNA提取试剂盒及方法，其解决技术问题的技术方案是：土壤尿液DNA提取试剂盒本文档来自技高网...

【技术保护点】
土壤尿液DNA提取试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：（a）土壤裂解液，其组成成分包括表面活性剂、螯合剂、pH缓冲剂；所述表面活性剂为：十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、月桂酰基肌氨酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40、十六烷基三甲基溴化铵中的一种或两种及以上的混合，所述表面活性剂的质量浓度为1‑100g/L，优选的表面活性剂成分是十二烷基硫酸钠或十二烷基磺酸钠中的一种或两种的混合，优选的表面活性剂质量浓度为1‑10g/L；所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钾中的一种或两种，所述离液盐的浓度为1‑100 mmol/L...

【技术特征摘要】
1.土壤尿液DNA提取试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：（a）土壤裂解液，其组成成分包括表面活性剂、螯合剂、pH缓冲剂；所述表面活性剂为：十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、月桂酰基肌氨酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN20、TWEEN40、TWEEN60、TWEEN80、NP40、十六烷基三甲基溴化铵中的一种或两种及以上的混合，所述表面活性剂的质量浓度为1-100g/L，优选的表面活性剂成分是十二烷基硫酸钠或十二烷基磺酸钠中的一种或两种的混合，优选的表面活性剂质量浓度为1-10g/L；所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钾中的一种或两种，所述离液盐的浓度为1-100mmol/L；所述pH缓冲剂为Tris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸钠、柠檬酸-柠檬酸钠，所述pH缓冲剂的pH值为7.0-11，优选的pH缓冲剂为Tris-HCl，优选的pH缓冲剂的pH值为7.5-8.5；（b）结合液，其组成成分包括表面活性剂、离液盐、pH缓冲剂；所述表面活性剂为：聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN20、TWEEN40、TWEEN60、TWEEN80、NP40中的一种或两种及以上的混合，所述表面活性剂的质量浓度为1-100g/L；所述离液盐为异硫氰酸胍、盐酸胍、硫氰酸钾、高氯酸钠、碘化钾、碘化钠中的一种或两种及以上的混合，所述离液盐的浓度为3-5mol/L；所述pH缓...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊槐，孟涛，黄书琴，
申请(专利权)人：山东森芃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37