一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法技术

本发明专利技术公开了一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法，是由以下步骤获得的：副球菌接种至富集培养基，摇床培养，将所得菌体悬浮于无菌生理盐水中，得反硝化细菌菌悬液；绿色木霉接种至固体培养基上培养，无菌水洗涤，低温保存，得孢子悬浮液；将反硝化细菌菌悬液和孢子悬浮液接种至菌丝球培养基中摇床培养，得绿色木霉为载体固定化反硝化细菌的混合菌丝球。本发明专利技术的方法具有操作简便、培养时间短、可重复使用、沉降性能好的优点，制备的混合菌丝球可显著降低水体中的氮素含量，改善水质状况，使污水达到排放标准，且无亚硝酸盐积累，降低环境污染，对于大规模利用副球菌处理污水具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法
本专利技术属于环境生物工程和水处理领域，具体涉及一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法。
技术介绍
随着工农业生产的发展和人们生活水平的提高，含氮污染物的排放量迅速增加，水环境中氮污染的问题日趋严重，成为国际社会面临的一个重大问题。国内水体中氮的污染以硝态氮和亚硝态氮形式氮的污染最为严重，而生物除氮是去除水体中氮污染的最有效的方法之一。生物脱氮技术通常有硝化工艺和反硝化工艺组成。硝化工艺以去除氨氮为主，虽然能把氨氮转化为硝酸盐，但是不能彻底将氮素从水体中去除。反硝化工艺则能从根本上消除氮素对环境的污染。反硝化细菌是反硝化作用发生的主体，然而，游离的反硝化细菌在污水处理的过程中存在诸多不足，可以考虑通过微生物固定化技术解决这一问题。微生物固定化技术是将特选的微生物固定在选择的载体上，使其高度密集并保持生物活性，在适宜条件下能够快速、大量增殖的生物技术。这种技术应用于废水处理，有利于提高生物反应器内微生物（尤其是特殊功能的微生物）的浓度，有利于微生物抵抗不利环境的影响，有利于反应后的固液分离，缩短处理所需的时间。常见的固定化载体和包本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法，其特征在于，是由以下步骤获得的：1）由斜面上取两环副球菌接种至富集培养基，摇床培养，培养液离心去除上清液，得菌体；将菌体悬浮于无菌生理盐水中，得反硝化细菌菌悬液；2）由斜面上取两环绿色木霉接种至固体培养基上培养形成孢子，用无菌水洗涤孢子，低温保存，得孢子悬浮液；3）将反硝化细菌菌悬液和孢子悬浮液接种至菌丝球培养基中摇床培养，得绿色木霉为载体固定化反硝化细菌的混合菌丝球。

【技术特征摘要】
1.一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法，其特征在于，是由以下步骤获得的：1）由斜面上取两环副球菌接种至富集培养基，摇床培养，培养液离心去除上清液，得菌体；将菌体悬浮于无菌生理盐水中，得反硝化细菌菌悬液；2）由斜面上取两环绿色木霉接种至固体培养基上培养形成孢子，用无菌水洗涤孢子，低温保存，得孢子悬浮液；3）将反硝化细菌菌悬液和孢子悬浮液接种至菌丝球培养基中摇床培养，得绿色木霉为载体固定化反硝化细菌的混合菌丝球。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中，无菌生理盐水的浓度为0.9%；菌体与无菌生理盐水的质量比为1：50-250。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中，富集培养基的组成如下：KNO30.1-10g/L，蛋白胨0.1-20g/L，牛肉膏0.1-20g/L，K2HPO4·3H2O0.1-5g/L，MgSO4·7H2O0.1-5g/L，余量为水。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中，摇床培养的转速为100-200r/min，培养温度为19-35℃，培养时间为12-72h。5.根据权利要求1所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨革，刘胜格，巩志金，车程川，刘金锋，
申请(专利权)人：曲阜师范大学，
类型：发明
国别省市：山东,37