一种偶氮染料中芳香胺含量的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，属于有害物质检测领域，该测定方法包括：（1）样品的提取；（2）样品的萃取；（3）样品的浓缩和测定；（4）标准工作溶液的测定；（5）根据步骤（3）和步骤（4）的结果即可求得所述的偶氮染料中的芳香胺含量。本发明专利技术的方法针对现有技术样品前处理步骤复杂繁多、检测耗时长、灵敏度低、基质效应干扰大等不足，优化了样品前处理方法及仪器检测条件。该方法具有操作简单、检测精准快速、检测限低、分离时间短及灵敏度高等优点。

Method for detecting content of aromatic amine in azo dye

The invention relates to a detection method of aromatic amine content of azo dyes, which belongs to the field of detection of harmful substances, including the determination method: (1) sample extraction; (2) sample extraction; (3) and the determination of sample concentration; (4) the determination of standard solution; (5) according to the steps (3) and step (4) aromatic amine content of azo dyes results can be obtained in the. The method of the present invention optimizes the sample pretreatment method and the instrument detection condition according to the shortcomings of the prior art, such as the complex steps of the sample pretreatment process, the long detection time, the low sensitivity and the large interference of the matrix effect. The method has the advantages of simple operation, accurate and rapid detection, low detection limit, short separation time and high sensitivity.

【技术实现步骤摘要】
一种偶氮染料中芳香胺含量的检测方法
本专利技术涉及一种芳香胺含量的检测方法，尤其是一种偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，属于有害物质检测领域。
技术介绍
偶氮染料是指分子结构中含有偶氮基(-N＝N-)且与其连接部分至少含有1个芳香族结构的染料。研究认为，偶氮染料其结构本身通常不会对人体产生有害影响，但有一些用“芳胺类中间体”合成的偶氮染料，因其与人体皮肤长期接触之后，会因人表面皮肤的弱酸环境，极易发生还原反应并使偶氮基断裂，生成大量芳香胺类化合物。芳香胺类化合物可通过呼吸道、消化道或者皮肤吸收进入人体，具有致突变性和致癌性，极易引起人体细胞发生病变，对人体皮肤甚至膀胱、输尿管等器官会产生极其严重的损害。这种违禁的偶氮染料，也被称为“致癌芳香胺染料”。因此，自上世纪90年代以来，美国、欧盟、日本等发达国家纷纷制定了相应的标准禁止在其市场销售和使用与人体皮肤或口腔接触时会产生致癌芳香胺的纺织品和皮革品。我国也制定了相应的纺织品中禁用的偶氮染料测定的国家标准方法。目前，禁用偶氮染料的检测主要是基于检测样品经还原分解后，是否存在有害的芳香胺，继而反推样品是否使用了禁用的偶氮染料。常见的芳香胺定量检测方法有N-(1-萘基)-乙二胺偶氮分光光度法、流动注射光度法、电化学法、气谱法、毛细管电泳等。其中，电化学法及分光光度法不太适合应用于痕量分析与特异性分析，特别是不能满足同时测定多组分的检测要求；而目前报道的大部分色谱方法又因样品前处理步骤复杂繁多、检测耗时过长导致效率低下、灵敏度低、基质效应干扰大等不足而被诟病。因此，目前亟需开发一种操作简单、检测精准快速、检测限低、分离时间短及灵敏度高的芳香胺检测方法。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术的目的旨在提供一种偶氮染料释放出的芳香胺含量的检测方法，即在弱酸性条件下，加入还原剂进行还原分解，然后进行固相萃取、浓缩后通过液相色谱-串联质谱测定样品中芳香胺的检测方法。该方法能在8min内完成21种特定芳香胺的快速分离检测，且测定结果准确，基质干扰少，具有操作简单，灵敏度及回收率高等优点。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：一种偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，包括以下步骤：(1)样品的提取：称取样品，加入柠檬酸缓冲溶液，水浴静置，然后加入还原剂反应，冷却；(2)样品的萃取：将氢氧化钠溶液和内标工作溶液加入到步骤(1)得到的混合溶液中，混合均匀后倒入硅藻土固相萃取柱，静置后，用叔丁基甲醚清洗样品残渣3～5次、并将叔丁基甲醚洗液倒入硅藻土固相萃取柱中，静置10～20min后收集萃取液，然后向萃取液中加入无水硫酸钠，混合均匀后静置20～40min得到混合液。(3)样品的浓缩和测定：将步骤(2)得到混合液用30～40℃的氮气吹气浓缩，用甲醇的水溶液定容，振荡后静置1～5min，取上层清液经有机滤膜过滤后，进行液相色谱-串联质谱测定；(4)标准工作溶液的测定：配制标准工作溶液，通过液相色谱-串联质谱仪对标准工作溶液进行测定；(5)根据步骤(3)和步骤(4)的结果即可求得所述的偶氮染料中的芳香胺含量。在优选实施方案中，步骤(3)和(4)所述的液相色谱-串联质谱仪测定条件为：液相色谱条件为：色谱柱，规格100mm×2.1mm，1.7μm的Fluoro-PhenylC18柱；流动相：甲醇和0.05％甲酸水溶液，流速：300μL/min；梯度洗脱；柱温：40℃；进样量：2μL；质谱条件为：扫描方式：正离子扫描；电喷雾离子源(ESI)；毛细管电压为2.6KV,检测方式：正离子多离子反应监测。在优选实施方案中，步骤(2)所述的内标工作溶液为浓度为10μg/mL的4-氨基联苯-D9的甲醇溶液，加入量为100μL；氢氧化钠溶液加入量为0.5mL；无水硫酸钠加入量为10g；叔丁基甲醚每次清洗用量为20mL。在优选实施方案中，步骤(4)所述的标准工作溶液为具有浓度梯度的不同芳香胺的甲醇溶液，浓度分别为：20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL，200ng/mL，500ng/mL和1000ng/mL。在优选实施方案中，液相色谱-串联质谱仪进行测定标准工作溶液时，用0.05％体积浓度的甲酸水溶液与甲醇进行梯度洗脱，0.05％体积浓度的甲酸水溶液与甲醇的体积比依次为：90:10、80:20、10:90、10:90和90:10。在优选实施方案中，所述不同芳香胺为2,6-二甲基苯胺、邻氨基苯甲醚、2-萘胺、3,3-二氯联苯胺、4-氨基联苯、联苯胺、邻甲苯胺、2，4-二甲基苯胺、4-氯邻甲苯胺、2,4-二氨基甲苯、3,3-二甲氧基联苯胺、3,3-二甲基联苯胺、4,4-亚甲基-二-(2-氯苯胺)、4,4-二氨基二苯甲烷、4,4-二氨基二苯醚、对氯苯胺、2-甲氧基-5-甲基苯胺、2,4,5-三甲基苯胺、4,4-二氨基二苯硫醚、2，4-二氨基苯甲醚和3，3’-二甲基-4，4’-二氨基二苯甲烷。在优选实施方案中，步骤(3)中，甲醇与水的体积比1:9。在优选实施方案中，步骤(1)中，样品提取的工艺具体为：将pH＝5.5～6.5、温度为70±2℃的柠檬酸缓冲液加入到含有偶氮染料的0.2g样品中，放置20～40min后，再加入连二亚硫酸钠水溶液，反应30min后冷却至室温，冷却时间控制在5min之内。与现有技术相比，本专利技术方法具有如下优良效果：(1)本专利技术的方法针对现有技术样品前处理方法步骤复杂繁多的不足，优化了样品前处理方法，简化了操作步骤。(2)本专利技术样品混合溶液经过固相萃取处理后，减少了基质的干扰。(3)本专利技术方法利用内标法测定偶氮染料中芳香胺的含量，避免了基质效应，抵消了体积变化对定量分析的影响，在样品浓缩步骤中只需取少量体积的萃取液进行氮吹浓缩，大幅缩短了浓缩时间，提高了检测效率。并且可同步进行定性与定量分析，无需再使用其他仪器进行定性分析。(4)本专利技术方法采用甲醇和水溶液对样品进行复溶，进一步降低基质效应，而且样品溶剂组成与流动相初始比例一致，有效避免了溶剂效应，使得该方法具有检测准确、回收率高、快速简便、灵敏度高及重复性好等优点。(5)本专利技术针对现有技术检测耗时过长导致效率低下的不足，优化了仪器工作条件及梯度洗脱方案，能在8min内完成21种特定芳香胺的快速分离检测，且测定结果准确，大幅提高了检测效率。附图说明图1为本专利技术的标准工作溶液的选择离子色谱图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是对本专利技术一部分实例，而不是全部的实例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本实施例的偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，具体包括以下步骤：(1)样品的提取：将含有偶氮染料的食品包装纸张样品剪成5mm×5mm左右的0.2g样品，置于50mL具塞离心管中，加入15mL预热至70±2℃的柠檬酸缓冲液(pH＝6)，猛烈摇动，使液体浸透样品，于70±2℃水浴中放置30min；加入200mg/mL连二亚硫酸钠水溶液3mL，在70±2℃水浴中反应30min，然后将离心管置于冰水浴中于2min内冷却至室温；(2)配制内标工作溶液：称取0.01g的D9-4-氨基联苯标准本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的提取：称取样品，加入柠檬酸缓冲溶液，水浴静置，然后加入还原剂反应，冷却；(2)样品的萃取：将氢氧化钠溶液和内标工作溶液加入到步骤(1)得到的混合溶液中，混合均匀后倒入硅藻土固相萃取柱，静置后，用叔丁基甲醚淋洗样品残渣3～5次、并将叔丁基甲醚洗液倒入硅藻土固相萃取柱中，静置10～20min后收集萃取液，然后向萃取液中加入无水硫酸钠，混合均匀并静置20～40min后得到混合液。(3)样品的浓缩和测定：将步骤(2)得到混合液用30～40℃的氮气吹气浓缩，用甲醇的水溶液定容，振荡后静置1～5min，取上层清液经有机滤膜过滤后，进行液相色谱‑串联质谱测定；(4)标准工作溶液的测定：配制标准工作溶液，通过液相色谱‑串联质谱仪对标准工作溶液进行测定；(5)根据步骤(3)和步骤(4)的结果即可求得所述的偶氮染料中的芳香胺含量。

【技术特征摘要】
1.一种偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的提取：称取样品，加入柠檬酸缓冲溶液，水浴静置，然后加入还原剂反应，冷却；(2)样品的萃取：将氢氧化钠溶液和内标工作溶液加入到步骤(1)得到的混合溶液中，混合均匀后倒入硅藻土固相萃取柱，静置后，用叔丁基甲醚淋洗样品残渣3～5次、并将叔丁基甲醚洗液倒入硅藻土固相萃取柱中，静置10～20min后收集萃取液，然后向萃取液中加入无水硫酸钠，混合均匀并静置20～40min后得到混合液。(3)样品的浓缩和测定：将步骤(2)得到混合液用30～40℃的氮气吹气浓缩，用甲醇的水溶液定容，振荡后静置1～5min，取上层清液经有机滤膜过滤后，进行液相色谱-串联质谱测定；(4)标准工作溶液的测定：配制标准工作溶液，通过液相色谱-串联质谱仪对标准工作溶液进行测定；(5)根据步骤(3)和步骤(4)的结果即可求得所述的偶氮染料中的芳香胺含量。2.根据权利要求1所述的偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，其特征在于，步骤(3)和(4)所述的液相色谱-串联质谱仪测定条件为：液相色谱条件为：色谱柱，规格100mm×2.1mm，1.7μm的Fluoro-PhenylC18柱；流动相：甲醇和0.05％甲酸水溶液，流速：300μL/min；梯度洗脱；柱温：40℃；进样量：2μL；质谱条件为：扫描方式：正离子扫描；电喷雾离子源；毛细管电压为2.6KV；检测方式：正离子多离子反应监测。3.根据权利要求1所述的偶氮染料中芳香胺含量的检测方法，其特征在于，步骤(2)所述的内标工作溶液为浓度为10μg/mL的4-氨基联苯-D9的甲醇溶液，加入量为100μL；氢氧化钠溶液加入量为0.5mL；无水硫酸钠加入量为10g；叔丁基甲醚每次...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘欣，李晶，王燕梅，高茜，陈建华，黄海涛，田丽梅，李雪梅，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53