一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法技术

本发明专利技术公开了一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法，属于天然产物提取技术领域，包括以下步骤：1)取顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏上样于硅胶柱，以石油醚‑乙酸乙酯系统为洗脱液进行梯度洗脱合并馏分蒸干溶剂，得到第一次过柱部分；2)取第一次过柱部分，上样于硅胶柱，以含甲酸的石油醚‑乙酸乙酯系统为洗脱液进行梯度洗脱，合并主斑点相同的馏分后，蒸干溶剂，得到第二次过柱部分；3)将第二次过柱部分上样于硅胶柱，以含甲酸的石油醚‑乙酸乙酯系统为洗脱液进行梯度洗脱，合并主斑点馏分后，蒸干溶剂，得到东莨菪亭。本方法操作简单，成本低廉，环境污染小，提取效率高，提取得到的东莨菪亭纯度在99％以上。

A method for extraction of scopoletin from Pachysandra terminalis.

The invention discloses a method for extraction of scopoletin from Pachysandra terminalis in the extraction of natural products, which belongs to the technical field, which comprises the following steps: 1) from Pachysandra terminalis ethyl acetate extract sample on silica gel column with petroleum ether ethyl acetate system for gradient elution fractions with dry solvent the first column elution part; 2) the first part of the sample in the column, silica gel column with petroleum ether ethyl acetate formic acid system for gradient elution buffer, with the main spots of the same fractions after evaporating the solvent, the second column part; 3) will the second column part sample on silica gel column, with petroleum ether ethyl acetate formic acid system for gradient elution buffer, with the main spots of fraction after evaporating the solvent, by scopoletin. This method has the advantages of simple operation, low cost, small environmental pollution, high extraction efficiency, obtained the scopoletin purity above 99%.

【技术实现步骤摘要】
一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法
本专利技术属于天然产物提取
，具体涉及一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法。
技术介绍
顶花板凳果(PachysandraterminalisSieb.etZucc.)为黄杨科板凳果属植物，又名顶蕊三角咪、长青草、捆仙七、转筋草和富贵草。该植物具有清热解毒、祛风除湿、舒筋活络、镇静安神的功效，故陕西民间主要用于治疗风湿麻痹、肢体麻木、跌打损伤、月经过多、烦躁不安等，也可作为复方药治疗老年慢性支气管炎、风湿性关节炎等疾病。迄今为止，国内外对顶花板凳果的研究大多仅限于其甾体生物碱成分及三萜类成分的报道，未见对该植物香豆素类化合物提取分离方法的报道。东莨菪亭在植物中分布广泛，其中在茄科植物东莨菪(ScopoliajaponicaMaxim)中含量较高。东莨菪亭为香豆素类化合物，其化学名为：7-羟基-6-甲氧基香豆素。东莨菪亭的结构式为：现代药理学研究表明，东莨菪亭有明显的药理作用，东莨菪亭不仅能够抑制主动脉收缩，缓解动脉粥样硬化所导致的心肌缺血，还能够对抗由高尿酸血症引起的痛风性关节炎。具有抗癌、抗氧化、抗关节炎和降温等临床药理作用；另外，也有对东莨菪亭代谢方面的报道。但是目前提取东莨菪亭的方法所用的溶剂不够环保，对人体有毒害，且成本较高，不够经济。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法，该方法成本低廉，溶剂环保，操作简单，提取得到的东莨菪亭纯度高。本专利技术是通过以下技术方案来实现：包括以下步骤：1)将顶花板凳果粉末进行提取处理，得到顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏；2)取顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，将石油醚:乙酸乙酯体积比为(25:1)～(10:1)洗脱的馏分合并，蒸干溶剂，得到第一次过柱部分；3)取第一次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，合并主斑点相同的馏分后，蒸干溶剂，得到第二次过柱部分；4)将第二次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，蒸干溶剂，得到东莨菪亭。进一步地，步骤1)中顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏的制备，具体包括以下步骤：(1)将顶花板凳果粉末用8～15倍量体积分数为95％的乙醇溶液回流提取，回收提取液后浓缩得浸膏；(2)将浸膏用8～15倍量体积分数为1～2％的盐酸溶解后过滤，得到滤渣；(3)将滤渣用8～15倍量乙酸乙酯溶解后过滤，回收滤液并浓缩得乙酸乙酯部位浸膏。进一步地，步骤(1)所述的用体积分数为95％的乙醇回流提取次数为2～4次，每次2～3h；步骤(3)用乙酸乙酯溶解过滤的重复次数为2～4次，每次1～2h。进一步地，步骤2)的洗脱液中石油醚和乙酸乙酯的体积比为(200:1)～(0:1)。进一步地，步骤3)的洗脱液中石油醚和乙酸乙酯的体积比为(25:1)～(1:3)。进一步地，步骤3)将石油醚和乙酸乙酯的体积比为(2:1)～(1:1)洗脱的馏分合并。进一步地，步骤4)的洗脱液中石油醚和乙酸乙酯的体积比为(5:1)～(1:1)。进一步地，步骤4)将石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:1洗脱的馏分合并。进一步地，步骤3)和步骤4)的洗脱液中，石油醚和乙酸乙酯的总体积与甲酸的体积之比均为100：(0.1～0.4)。进一步地，硅胶柱中所用硅胶的粒度均为200～300目；对流出液进行检测是采用薄层色谱法进行检测，于365nm紫外灯下进行检视。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：本专利技术方法将顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏首先过硅胶柱进行第一次梯度洗脱，收集的相同馏分再经反复硅胶柱的梯度洗脱，分离得到东莨菪亭，是首次从中药材顶花板凳果中分离得到单体化合物东莨菪亭的方法。本专利技术方法简单易行、成本低廉，分离得到的东莨菪亭的纯度达到99％以上。本专利技术在第一次硅胶柱分离之后使用含甲酸的石油醚-乙酸乙酯系统为流动相，该流动相体系成本低廉、环保低毒，不仅大大降低了环境污染及对人体的毒性伤害，而且节约了成本；更重要的是，在流动相中加入甲酸，不仅能够提高分离效率，而且有效避免了东莨菪亭的开环分解和异构化，更加改善了分离效果。进一步地，本专利技术提取过程简单，溶剂环保低毒，且保证提取效率。进一步地，本专利技术中甲酸的用量在1％～4％，有效防止影响洗脱液极性，避免导致目标化合物过早地被洗脱出，出现不能成功与其他极性相近的化合物分离的现象。附图说明图1为本专利技术分离得到的东莨菪亭的1H-NMR图谱(400MHz)；图2为本专利技术分离得到的东莨菪亭的13C-NMR图谱(100MHz)；具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。本专利技术包括以下步骤：1)制备顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏；具体包括以下步骤：(1)将顶花板凳果粉末用8～15倍量体积分数为95％的乙醇溶液回流提取，提取次数为2～4次，每次2～3h，回收提取液后浓缩得浸膏；其中倍量均是所加溶液体积相对原料质量的倍数，此处是指95％的乙醇溶液所加的体积是顶花板凳果粉末质量的8～15倍；(2)将浸膏用8～15倍量体积分数为1～2％的盐酸溶解后过滤，得到滤渣；(3)将滤渣用8～15倍量乙酸乙酯溶解后过滤，重复次数为2～4次，每次1～2h，回收滤液并浓缩得乙酸乙酯部位浸膏。2)取顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯系统为洗脱液，按石油醚:乙酸乙酯＝(200:1)～(0:1)的体积比进行梯度洗脱，对流出液进行检测，将石油醚:乙酸乙酯＝(25:1)～(10:1)的体积比洗脱的馏分合并，蒸干溶剂，得到第一次过柱部分；3)取第一次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯系统为洗脱液，按石油醚:乙酸乙酯＝(25:1)～(1:3)的体积比进行梯度洗脱，对流出液进行检测，合并主斑点相同的馏分，即将石油醚:乙酸乙酯＝(2:1)～(1:1)的体积比洗脱的馏分合并，蒸干溶剂，得到第二次过柱部分；4)将第二次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯系统为洗脱液，按石油醚:乙酸乙酯＝(5:1)～(1:1)的体积比进行梯度洗脱，对流出液进行检测，将石油醚:乙酸乙酯＝3:1的体积比洗脱的馏分合并，蒸干溶剂，得到东莨菪亭。步骤2)、3)、4)中所用的洗脱液为无毒、低刺激性的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂，相比其他常用分离溶剂(如氯仿、甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙腈等)，本方法所采用的溶剂系统更为环保，且对人体伤害极小。步骤3)和4)中石油醚-乙酸乙酯系统洗脱液中含有体积分数为0.1～0.4％的甲酸，即石油醚和乙酸乙酯的总体积与甲酸的体积之比均为100：(0.1～0.4)。本专利技术所用硅胶的粒度为200～300目。对流出液进行检测是采用薄层色谱法进行检测，于365nm紫外灯下进行检视。实施例1从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法，包括以下步骤：1)将顶花板凳果粗粉约7.5kg，用10倍量的95％乙醇回流提取3次，每次2h，回收提取液，减压浓缩得乙醇提取浸膏，将1.0kg浸膏用10倍量2.0％的盐酸溶解后过滤，滤渣用10倍量的乙酸乙酯研溶后过滤，重复次数为2次，每次2h，将滤液浓缩干燥得乙酸乙酯部本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将顶花板凳果粉末进行提取处理，得到顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏；2)取顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏，上样于硅胶柱，以石油醚‑乙酸乙酯系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，将石油醚:乙酸乙酯体积比为(25:1)～(10:1)洗脱的馏分合并，蒸干溶剂，得到第一次过柱部分；3)取第一次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚‑乙酸乙酯‑甲酸系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，合并主斑点相同的馏分后，蒸干溶剂，得到第二次过柱部分；4)将第二次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚‑乙酸乙酯‑甲酸系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，蒸干溶剂，得到东莨菪亭。

【技术特征摘要】
1.一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将顶花板凳果粉末进行提取处理，得到顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏；2)取顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，将石油醚:乙酸乙酯体积比为(25:1)～(10:1)洗脱的馏分合并，蒸干溶剂，得到第一次过柱部分；3)取第一次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，合并主斑点相同的馏分后，蒸干溶剂，得到第二次过柱部分；4)将第二次过柱部分，上样于硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸系统为洗脱液，进行梯度洗脱，对流出液进行检测，蒸干溶剂，得到东莨菪亭。2.根据权利要求1所述的一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法，其特征在于，步骤1)中顶花板凳果乙酸乙酯部位浸膏的制备，具体包括以下步骤：(1)将顶花板凳果粉末用8～15倍量体积分数为95％的乙醇溶液回流提取，回收提取液后浓缩得浸膏；(2)将浸膏用8～15倍量体积分数为1～2％的盐酸溶解后过滤，得到滤渣；(3)将滤渣用8～15倍量乙酸乙酯溶解后过滤，回收滤液并浓缩得乙酸乙酯部位浸膏。3.根据权利要求2所述的一种从顶花板凳果中提取东莨菪亭的方法，其特征在于，步骤(1)用体积分数为95％的乙醇回流提取次数为2～4次，每次2～...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭增军，仙靓，李梦怡，薛璇玑，张新新，张卉，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61