一种可注射植骨材料及制备方法技术

技术编号:15043469 阅读:173 留言:0更新日期:2017-04-05 16:42
本发明专利技术涉及医用骨骼修复材料技术领域,具体地说是一种可注射植骨材料及制备方法和使用方法,其特征在于该植骨材料由脱基质骨钙、PRP、自体血细胞生长因子、丹参注射液、强力霉素和东莨菪碱组成,上述植骨材料中组成成分的重量份为脱基质骨钙6~10份、PRP0.8~1.5份、自体血细胞生长因子0.5~2份、丹参注射液0.5~2份、强力霉素0.05~0.2份和东莨菪碱0.0001~0.0005份,脱基质骨钙、PRP、自体血细胞生长因子、强力霉素、丹参及东莨菪碱在手术时进行即时混合,装入10ml注射器中,复合成可注射的混合物,将可注射植骨材料注入术中骨缺损的部位,或需要加强骨融合的部位(如椎间隙),具有愈合效果好、抗感染、成骨诱导能力强、成骨强度高等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医用骨骼修复材料
,具体地说是一种愈合效果好、抗感染、成骨诱导能力强、成骨强度高的可注射植骨材料及制备方法和使用方法。
技术介绍
众所周知,骨移植是治疗骨缺损的主要方法,同时也是骨科最常用的治疗方法之一,传统的移植材料是自体骨,具有骨生成能力强、容易愈合的特点,但因来源有限、二次伤害、增加感染机会等原因限制其临床应用;同种异体骨不具有自身成骨能力,愈合主要靠骨传导作用和骨诱导作用,移植骨的抗原性是影响同种异体骨与宿主愈合的重要因素;异种骨主要障碍是免疫排斥反应;人工骨成骨方式单一,修复不彻底,愈合过程缓慢,缺乏生物活性,目前,一般都是通过植骨材料进行治疗,植骨术后的愈合需经历3个主要阶段,血肿机化期(2周),此期主要是血小板聚集和激活,粒细胞和巨噬细胞迁移;原始骨痂形成期(3-8周),是间充质细胞增殖分化繁殖期;塑形期(8-12周),各种组织细胞的重建,血肿机化期的血小板聚集启动了凝血反应,有两种途径完成整个过程,一种是修复,另一个是再生。修复过程是在组织损伤超越了某个极限下,间充质细胞的增殖和分化不能满足组织再生的需要量,这时成纤维母细胞的增殖分化替代间充质细胞进行组织创伤的修复,再生过程是组织损伤区域有充足的间充质细胞增殖和分化,重建损伤各种组织器官的功能和活性,组织重建是理想的愈合途径,在组织愈合过程中,血小板是主要的炎症阶段调节因子,对细胞繁殖和分化阶段起重要的作用,是组织重建通路成功的关键成分,目前,应用于植骨术的植骨材料存在愈合效果不好、易感染、诱导成骨缓慢等不足。
技术实现思路
本专利技术的目的是解决上述现有技术的不足,提供一种愈合效果好、抗感染、成骨诱导能力强、成骨强度高的可注射植骨材料及制备方法和使用方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是:一种可注射植骨材料,其特征在于该植骨材料由脱基质骨钙、PRP、自体血细胞生长因子、丹参注射液、强力霉素和东莨菪碱组成,上述植骨材料中组成成分的重量份为脱基质骨钙6~10份、PRP0.8~1.5份、自体血细胞生长因子0.5~2份、丹参注射液0.5~2份、强力霉素0.05~0.2份和东莨菪碱0.0001~0.0005份。一种可注射植骨材料的制备方法:(1.)制备脱基质骨钙:取人新鲜术中取下的皮质骨,去除干骺端,手工去除软组织、骨髓,粉碎为0.5-1cm3大小,用5mmol/L的叠氮钠处理24小时,100%乙醇脱水4小时,用4N的HCl在4℃下脱钙大约为48小时,将酸全部中和后的脱钙液,将其进入冷冻干燥后,所得为脱基质骨钙,置-70℃冰箱保存,应用EO(环氧乙烷)消毒,备用;(2).制备PRP:包括外周血的采集、抗凝和二次离心,首先取50ml自体外周血进行提取采集,然后200×g的条件下进行离心第一次离心后,离心管内形成三层:底层-红色,主要是红细胞;中间层-白色,主要是白细胞和炎症因子;顶层-黄色,主要是血浆、血小板和生长因子,然后取顶层液在1700×g的条件下进行二次离心,可以得到底层的PRP和顶层的少血小板血浆(platelets-poorplasma,PPP),取底层的PRP,备用;(3).制备自体血细胞生长因子:在生物安全柜中,向60mL针管中加入1000国际单位的低分子量肝素钠,制备成肝素化的针管,消毒皮肤后,使用肝素化的针管抽取患者静脉血50mL,在生物安全柜中将静脉血分装进50mL的无菌离心管中,200×g的条件下离心20min,可见全血分为3层,吸取上层浓缩血小板后平均分装进10mL的无菌离心管中,在-20℃冰箱中过夜保存,在-80℃冰箱中长期保存,从-80℃冰箱中取出浓缩血小板后在37℃水浴锅中融化,时间不超过5min,反复冻存、融化至少3次,融化后的浓缩血小板在1700×g的条件下离心6min,获得上清液即为自体血细胞生长因子,备用;(4).丹参注射液:取生产检验合格的丹参注射液,溶度为每毫升内含有1.0克丹参,备用;(5).强力霉素:取生产检验合格的浓度是10mg/mL的强力霉素,备用;(6).东莨菪碱:取生产检验合格的浓度为0.3mg/mL的东莨菪碱,备用:(7).取上述植骨材料中组成成分脱基质骨钙6~10份、PRP0.8~1.5份、自体血细胞生长因子0.5~2份、丹参注射液0.5~2份、强力霉素0.05~0.2份和东莨菪碱0.0001~0.0005份,按照比例在手术时进行即时混合,装入10ml注射器中,复合成可注射的混合物。一种可注射植骨材料的使用方法:将混合好的可注射植骨材料注入术中骨缺损的部位,或需要加强骨融合的部位(如椎间隙),骨不连,骨缺损等部位,或者需要加强局部血液循环促进修复的其它的部位,如网球肘,跟痛症等部位。本专利技术所述混合后的混合物在较低的温度(-10℃~-50℃)下冻结成固态,然后在真空(1.3~13帕)下使其中的水分不经液态直接升华成气态,最终使物料脱水进行冷冻干燥后,复合材料产生一定的支架结构,手动填充至骨缺损的部位。本专利技术所述的组成成分中加入0~5份的脱钙骨基质(DBM),由于脱钙骨基质为肉松状态,更好的架构整个骨质材料。本专利技术所述的加入脱钙骨基质(DBM)的制备方法为:取人新鲜术中取下的皮质骨,去除干骺端,手工去除软组织、骨髓,粉碎为0.5-1cm3大小,用5mmol/L的叠氮钠处理24小时,100%乙醇脱水4小时,用4N的HCl在4℃下脱钙大约为48小时,用草酸钾检测液体无钙离子即可停止脱钙,用去离子水洗净HCl,经测其PH值呈7.0,置-70℃冰箱降温后,在低温下用研磨机打碎至呈细纤维状,再氯仿:甲醇=1:1脱脂24小时,用去离子水冲洗后,2M氯化钙4℃处理24小时,以去除低分子量蛋白多糖;0.5M的EDTA-Na24℃处理4小时,以去除非磷灰石钙及磷蛋白、糖蛋白、唾液蛋白;8M氯化锂4℃处理24小时,以收缩胶原纤维,去除高分子量蛋白多糖;蒸馏水冲洗,过氧化氢浸泡45分,磷酸盐缓冲液4℃冲洗,冷冻干燥后,所得为脱钙骨基质(DBM),置-70℃冰箱保存,应用EO(环氧乙烷)消毒,备用,然后按比例取0~5份的脱钙骨基质(DBM)与其他组分混合,装入10ml注射器中,复合成可注射的混合物。本专利技术所述的该植骨材料中脱基质骨钙、PRP、自体血细胞生长因子、丹参注射液、强力霉素和东莨菪碱成分最优化重量比为,脱基质骨钙8.0份、PRP1.0份、自体血细胞生长因子1.0份、丹参注射液1.0份、强力霉素0.1份和东莨菪碱0.0002份。本专利技术所述的最优化的脱钙骨基质(DBM)成分重量份为2.1份。本专利技术药理成分分析脱基质骨钙:是将骨用酸提取后的混合钙,主要来源于人或动物(猪、牛、狗、兔等)的颅骨、股骨干和胫骨干,具有良好的骨传导成骨能力,可以单独或与自体骨、其它生物材料、生长因子联合有效修复骨损伤,是比较理想的骨组织工程支架材料,脱基质骨钙的抗原性非常小,只有骨传导性,无任何蛋白类物质存留。PRP:中文的意思是富含血小板、血浆或富含生长因子的血液,PRP技术是指利用自身的血液,提取出富含高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可注射植骨材料,其特征在于该植骨材料由脱基质骨钙、PRP、自体血细胞生长因子、丹参注射液、强力霉素和东莨菪碱组成,上述植骨材料中组成成分的重量份为脱基质骨钙6~10份、PRP0.8~1.5份、自体血细胞生长因子0.5~2份、丹参注射液0.5~2份、强力霉素0.05~0.2份和东莨菪碱0.0001~0.0005份。

【技术特征摘要】
1.一种可注射植骨材料,其特征在于该植骨材料由脱基质骨钙、PRP、自体血细胞生长因子、丹参注射液、强力霉素和东莨菪碱组成,上述植骨材料中组成成分的重量份为脱基质骨钙6~10份、PRP0.8~1.5份、自体血细胞生长因子0.5~2份、丹参注射液0.5~2份、强力霉素0.05~0.2份和东莨菪碱0.0001~0.0005份。
2.一种可注射植骨材料的制备方法:
(1.)制备脱基质骨钙:取人新鲜术中取下的皮质骨,去除干骺端,手工去除软组织、骨髓,粉碎为0.5-1cm3大小,用5mmol/L的叠氮钠处理24小时,100%乙醇脱水4小时,用4N的HCl在4℃下脱钙大约为48小时,将酸全部中和后的脱钙液,将其进入冷冻干燥后,所得为脱基质骨钙,置-70℃冰箱保存,应用EO(环氧乙烷)消毒,备用;
(2).制备PRP:包括外周血的采集、抗凝和二次离心,首先取50ml自体外周血进行提取采集,然后200×g的条件下进行离心第一次离心后,离心管内形成三层:底层-红色,主要是红细胞;中间层-白色,主要是白细胞和炎症因子;顶层-黄色,主要是血浆、血小板和生长因子,然后取顶层液在1700×g的条件下进行二次离心,可以得到底层的PRP和顶层的少血小板血浆(platelets-poorplasma,PPP),取底层的PRP,备用;
(3).制备自体血细胞生长因子:在生物安全柜中,向60mL针管中加入1000国际单位的低分子量肝素钠,制备成肝素化的针管,消毒皮肤后,使用肝素化的针管抽取患者静脉血50mL,在生物安全柜中将静脉血分装进50mL的无菌离心管中,200×g的条件下离心20min,可见全血分为3层,吸取上层浓缩血小板后平均分装进10mL的无菌离心管中,在-20℃冰箱中过夜保存,在-80℃冰箱中长期保存,从-80℃冰箱中取出浓缩血小板后在37℃水浴锅中融化,时间不超过5min,反复冻存、融化至少3次,融化后的浓缩血小板在1700×g的条件下离心6min,获得上清液即为自体血细胞生长因子,备用;
(4).丹参注射液:取生产检验合格的丹参注射液,溶度为每毫升内含有1.0克丹参,备用;
(5).强力霉素:取生产检验合格的浓度是10mg/mL的强力霉素,备用;
(6).东莨菪碱:取生产检验合格的浓度为0.3mg/mL的东莨菪碱,备用:
(7).取上述植骨材料中组成成分脱基质骨钙6~10份、PRP0.8~1.5份、自体血细胞生长因子0.5~2份、丹参注射液0.5~2份、强力霉素...

【专利技术属性】
技术研发人员:姜传杰杨永军周纪平杨凯吴瑞姚树强
申请(专利权)人:山东省文登整骨医院
类型:发明
国别省市:山东;37

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1