The invention discloses a method for molecular identification of Astragalus medicine and a kit thereof. The method consists of three parts: Astragalus membranaceus DNA extraction system, PCR reaction system and result observation system. The method consists of six steps: sample pretreatment, genomic DNA extraction, PCR primer design and synthesis, establishment of PCR reaction, restriction endonuclease reaction and result determination. The identification kit comprises a packing box body, a gasket, a fluorescent quantitative PCR detection of the reaction mixture, the test tube is equipped with a positive control tube, with a negative control tube, the 96 reaction product hole detection primer probe plate sealing pad and 96 hole probe in gene primer reaction. The invention selects one or a few genes can be identified accurately on the molecular identification of Radix Astragali, more quickly, can identify a large number of samples in a short period of time, high repeatability and stability, automation experiment process standards, more convenient and easy to realize molecular identification of medicinal materials.
【技术实现步骤摘要】
一种黄芪药材分子鉴定方法和试剂盒
本专利技术涉及中药材分子鉴定的
,具体地说是一种黄芪药材分子鉴定方法和试剂盒。
技术介绍
黄芪是多年生草本植物,豆科,黄芪属,入药部位为黄芪的根部。黄芪主要分布在内蒙古,陕西,山西,甘肃,宁夏,东北,黑龙江,新疆等地。近年来,由于大量采挖,野生黄芪数量急剧减少,因此定为渐危物种,属国家三级保护植物。主要栽培品种是蒙古黄芪和荚膜黄芪。主产区为内蒙古,山西。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史,在中医上认为其有补气升阳,固表止汗,利水消肿,生津养血,行滞通痹,托毒排脓,敛创生肌之效。近年研究表明,黄芪有增强机体免疫功能,降压,利尿消肿,保护心肌,抗压等功效。目前市场上黄芪出现伪劣品、混淆品的原因很多,有的是商贩有意伪造或掺伪牟利,有的是以地方习用药材充药典正品药材,或是有的地区用药材名称与正品药材相近而造成误用,有点以相对廉价的他种药材冒充贵重药材,有的药材因其形状相似而造成误用。因此对于黄芪中药材品种的鉴别有着重要意义。现有的中药材品种鉴别技术包括:1)传统经验法,该方法利用感觉器官来观察中药的形状、大小、色泽、质地、断面以及气味等特征来确定中药品种;2)显微鉴别法,该方法利用显微镜来观察中药粉末所具有的器官构造,阻止构造碎片及细胞形状来鉴别真伪;3)一般理化鉴别法,该方法包括荧光法、显色法、沉淀法、升华法、结晶法等。现代方法包括:色谱鉴别,使用薄层色谱,气相色谱,高效液相色谱等方法来确定中药材的成分。光谱法是利用中药光谱学行为的不同进行鉴定。目前已有的检测方法检测过程复杂,对检测人员的技术要求高,如检测人员缺乏丰富的 ...
【技术保护点】
一种黄芪药材分子鉴定试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括包装盒体(1)、衬垫(2)、多个装有检测荧光定量PCR反应混合液的试管(3)、一个装有阳性对照品的试管(4)、一个装有阴性对照品的试管(5)、96反应孔检测引物探针板封垫(6)和96反应孔基因检测引物探针板(7),所述衬垫位于所述包装盒体中,多个所述反应混合液的试管位于所述衬垫的一侧,所述装有阳性对照品的试管和所述装有阴性对照品的试管位于所述衬垫的另一侧,所述引物探针板封垫位于所述引物探针板上方。
【技术特征摘要】
1.一种黄芪药材分子鉴定试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括包装盒体(1)、衬垫(2)、多个装有检测荧光定量PCR反应混合液的试管(3)、一个装有阳性对照品的试管(4)、一个装有阴性对照品的试管(5)、96反应孔检测引物探针板封垫(6)和96反应孔基因检测引物探针板(7),所述衬垫位于所述包装盒体中,多个所述反应混合液的试管位于所述衬垫的一侧,所述装有阳性对照品的试管和所述装有阴性对照品的试管位于所述衬垫的另一侧,所述引物探针板封垫位于所述引物探针板上方。2.根据权利要求1所述的黄芪药材分子鉴定试剂盒,其特征在于:所述96反应孔基因检测引物探针板的引物探针的一端连接有第一荧光发射基团,另一端连接有荧光淬灭基团。3.根据权利要求1所述的黄芪药材分子鉴定试剂盒,其特征在于:所述荧光定量PCR反应混合液的成分包括:PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs。4.根据权利要求1所述的黄芪药材分子鉴定试剂盒,其特征在于:所述96反应孔基因检测引物探针板包括:引物位点检测用上游引物、引物位点检测用下游引物、引物位点基因型一荧光探针、引物位点基因型二荧光探针、TaqDNA聚合酶,其中,引物探针的比例为1:20。5.一种黄芪药材分子鉴定方法,其特征在于:在每次检测前均设立阳性对照品和阴性对照品;在荧光定量PCR...
【专利技术属性】
技术研发人员:张峰,
申请(专利权)人:潍坊峡山源宜医学科技有限责任公司,
类型:发明
国别省市:山东,37
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