A high precision and high speed continuous 3D printing method, according to the first wants to print the cell pattern or three-dimensional cell gel structure developed the control platform to move the program on the computer, and then choose to print 3D cells / growth factor / mixed solution of biological materials, and they are mixed into the syringe with metal nozzle. The anode metal nozzle and high voltage DC power supply is connected with the mobile platform will receive a lower board fixed metal nozzle, and the ground, using static electricity to form a mixed solution of material jet motion program start moving platform, so that the jet of material formation pre designed pattern or structure on the receiving board, and through the light and the change of temperature, calcium ion treatment of the material jet fast in situ forming cell / hydrogel crosslinking method according to the biological materials, the invention can in substrate Various fine cell patterns and three-dimensional cell / gel micro structure systems are rapidly, and required to be printed.
【技术实现步骤摘要】
一种高精度高速度连续3D打印方法
本专利技术涉及细胞打印
,具体涉及一种高精度高速度连续3D打印方法。
技术介绍
Boland等于2003年提出“细胞打印”技术的概念,该技术利用传统增材制造的原理与方法,以生物材料、生长因子及活性细胞为材料,进行人工组织与器官等复杂结构的可控制造。在“细胞打印”过程中,将细胞(或细胞聚集体)、溶胶(水凝胶的前驱体)和生长因子的混合液同时置于打印机的喷头中,由计算机控制含细胞液滴的沉积位置,通过由点到线,由线到面,由面成体的方式逐层完成三维多细胞水凝胶类器官结构体的构建。与传统的组织工程技术相比,“细胞打印”的优势主要有:(1)可同时构建有生物活性的二维或三维“多细胞/材料”体系;(2)有望精确实现不同细胞在三维复杂结构体内的按需、可控、均匀种植;(3)可构建细胞生长所需的三维微结构环境。细胞打印技术为制造可供临床移植的人工组织或器官提供了新的思路和技术方法。同时,也有助于推动生物学、药学等领域的基础研究与创新,如3D打印的体外三维组织模型可用于研究肿瘤细胞的生长机理、代谢综合症中糖的代谢和新药的研发等。目前的细胞打印方法主要包括喷墨打印技术、微挤出成型技术以及激光辅助打印技术等。这些方法在细胞活性、多细胞打印等方面均取得了较大的进展,但主要挑战在于无法以较低的成本制造出与细胞及细胞外基质尺度相近的微观结构环境,从而精确调控细胞的分化生长与组织再生。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一,本专利技术的目的在于提供一种高精度高速度连续3D打印方法,能够在基板上快速、并按要求打印各种精细的细 ...
【技术保护点】
一种高精度高速度连续3D打印方法,其特征在于,包括以下步骤:1)根据想要打印的细胞图案或三维细胞凝胶结构在计算机上编制出控制平台移动的程序,然后在20μm~200μm之间选择要打印的图案的线宽,从而确定平台移动的速度:1mm/s~500mm/s;2)配置用于3D打印的细胞/生长因子/生物材料的混合溶液,将配置好的混合溶液在孔径为10μm的过滤网中往复过滤,所使用的生物材料包括光交联的明胶或聚乙二醇、可钙离子交联的海藻酸钠、可温度交联的胶原蛋白或聚乙烯醇,或者这些材料相互混合后的复合材料,其质量浓度介于0.5%~10%之间;所使用的细胞包括肝细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、或具有多向分化功能的干细胞,细胞在混合溶液中的浓度为1×10
【技术特征摘要】
1.一种高精度高速度连续3D打印方法,其特征在于,包括以下步骤:1)根据想要打印的细胞图案或三维细胞凝胶结构在计算机上编制出控制平台移动的程序,然后在20μm~200μm之间选择要打印的图案的线宽,从而确定平台移动的速度:1mm/s~500mm/s;2)配置用于3D打印的细胞/生长因子/生物材料的混合溶液,将配置好的混合溶液在孔径为10μm的过滤网中往复过滤,所使用的生物材料包括光交联的明胶或聚乙二醇、可钙离子交联的海藻酸钠、可温度交联的胶原蛋白或聚乙烯醇,或者这些材料相互混合后的复合材料,其质量浓度介于0.5%~10%之间;所使用的细胞包括肝细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、或具有多向分化功能的干细胞,细胞在混合溶液中的浓度为1×105~5×107个/ml;所使用的生长因子包括血管内皮细胞生长因子、成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子、骨形态发生蛋白、或这些生长因子的混合物,生长因子在混合溶液中的浓度为0.05~1μg/ml;3)将配置好的细胞/生长因子/生物材料的混合溶液吸入装有金属喷头的注射器内,金属喷头的内孔径为100~1000μm,通过精密注射泵控制注射器使混合溶液的打印流量为20~1000μl/h,将金属喷头与直流高压电源的正极相接,将接收板固定金属喷头下方的移动平台上,并接地,其中接收板采用厚度为0.1~1mm的导电材料,导电材料包括导电玻璃、金属板、硅片,调整接收板与金属喷头的距离为1~5mm;4)打开高压直流电源开关,调整电压幅值介于0.5~20KV,从而在金属喷头与接收板之间形成稳定的高压静电场,混合溶液在高电场的作用下形成材料射流,启动移动平台的运动程序,从而使材料射流在接收板上形成预先设计的图案或结构,并根据生物材料的交联方式通过光照、改变温度、钙离子处理方式使材料射流快速原位形成细胞/水凝胶;5)待第一层图案或结构制造完成后,通过采用不同的细胞与材料混合溶液,重复步骤4)的过程,实现三维复杂细胞/水凝胶复合结构的打印;上述步骤均在无菌环境下进行。2.根据权利要求1所述的一种高精度高速度连续3D打印方法,其特征在于,包括以下步骤:1)根据想要打印的细胞图案或三维细胞凝胶结构在计算机上编制出控制平台移动的程序,选择40μm作为需要打印的图案的线宽,从而确定平台移动的速度为60mm/s;2)配置用于3D打印的细胞/生长因子/生物材料的混合溶液,所使用的生物材料为海藻酸钠与PVA,其质量浓度分别为0.5%和6%;所使用的细胞为成纤维细胞,细胞在混合溶液中的浓度为2×106个/ml,生长因子在混合溶液中的浓度为1μg/ml;3)将配置好的细胞/生长因子/生物材料的混合溶液吸入装有金属喷头的注射器内,金属喷头的内孔径为500μm,通过精密注射泵控制注射器使混合溶液的打印流量为60μl/h,将金属喷头与直流高压电源的正极相接,将接收板固定金属喷头下方的移动平台上,并接地,其中接收板采用方阻为4Ω、厚度为0.7mm的ITO导电玻璃,调整接收板与金属喷头的距离为1.75mm;4)打开高压直流电源开关,调整电压幅值为1.9KV,从而在金属喷头与接收板之间形成稳定的高压静电场,混合溶液在高电场的作用下形成材料射流,启动移动平台的运动程序,从而使材料射流在接收板上形成预先设计的图案或结构,并根据生物材...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴操,朱平平,鲍文辕,
申请(专利权)人:南京先临三维科技有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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