曲安奈德PLGA缓释微球注射剂、其制备方法及其在制备治疗骨关节炎疼痛药物中的应用技术

本发明专利技术提供了一种曲安奈德PLGA缓释微球注射剂、其制备方法及其在制备治疗骨关节炎疼痛药物中的应用，所述制剂包含曲安奈德、PLGA共聚物和玻尿酸，其中，PLGA与曲安奈德的重量比为100:(5～25)；PLGA与玻尿酸的重量比为100:(5～15)。本发明专利技术的载药缓释微球具有较好的稳定性。采用PLGA微球包载曲安奈德，不仅可以缓慢释放药物，同时可以增加药物稳定性，减少药物水解。反相疏水高效液相法检测结果显示，体外释放于水溶液的速释曲安奈德有明显的降解吸收峰，而包载在微球内的曲安奈德结构较完整，无明显降解产物吸收峰出现。玻尿酸同时起到协同增效作用，因为玻尿酸改善膝关节粘度，进一步减小曲安奈德的清除率，延长作用时间。

Triamcinolone acetonide PLGA sustained-release microsphere injection, preparation method thereof and application thereof in preparing medicine for treating osteoarthritis pain

The invention provides a Cu Ann Ned PLGA microspheres and its preparation method and its application in treatment of osteoarthritis pain drugs, the formulation includes Cu Ann Ned, PLGA copolymer and hyaluronic acid, wherein the weight ratio of PLGA and Cu Ann Ned 100: (5 ~ 25); the weight ratio of PLGA and hyaluronic acid 100: (5 ~ 15). The drug loaded sustained-release microsphere of the invention has better stability. Using PLGA microspheres loaded with Cu Ann Ned can not only slow the release of drugs, but also increase the stability of drugs and reduce the hydrolysis of drugs. The detection results of reversed-phase HPLC method showed that the in vitro release in aqueous solution of the quick release of triamcinolone acetonide has obvious degradation absorption peak, and the package structure contained in the triamcinolone acetonide microspheres were intact, no obvious degradation absorption peak. Hyaluronic acid at the same time play a synergistic effect, because hyaluronic acid to improve the knee joint viscosity, and further reduce the clearance of Cu Ann Ned, prolong the time.

【技术实现步骤摘要】
曲安奈德PLGA缓释微球注射剂、其制备方法及其在制备治疗骨关节炎疼痛药物中的应用
本专利技术涉及一种用于骨关节炎疼痛治疗的缓释注射制剂，具体而言，本专利技术是制备一种载曲安奈德的缓释制剂，通过关节腔内注射缓慢释放药物曲安奈德，同时缓释微球中复合了玻尿酸，更增加了制剂疗效，从而达到长效控制骨关节炎疼痛的效果，并且减少注射频率，增加患者依从性，制备工艺操作简单，缓释注射剂毒副作用低，是极具临床应用的新制剂。
技术介绍
炎症中的介导因子可以激活或者敏感化痛觉感受神经(痛觉感受器)，而在正常关节中痛觉感受器仅响应于超出关节正常工作范围内的重度压力和极度运动。在合适的浓度下糖皮质激素可以降低或消除炎症以及炎症引起的疼痛。曲安奈德注射液用于关节腔内注射，可作用于骨关节炎引起的痛觉过敏，恢复痛觉感受器到正常条件下的反应阈值。目前临床使用的曲安奈德速释混悬注射剂，在骨关节炎患者的膝关节平均滞留时间为3.8天，疗效可持续约两周，所以关节腔注射频率较高。因此，改进曲安奈德的注射制剂，降低给药频率，延长骨关节炎镇痛效果，具有重要意义。传统速释曲安奈德注射剂在治疗骨关节炎疼痛中需要频繁关节腔内注射给药，对患者造成极大负担，单词给药药效持续时间约两周。近年来随着生物高分子聚合物材料在医药学领域的广泛应用，脂质体、微球、凝胶和胶束等药物缓控释新制剂不断涌现，逐渐成为新药物制剂的研究热点之一。将曲安奈德制备成具有缓释作用的给药系统，使药物在关节和周关节组织局部缓慢、持续释放，维持局部较高的药物浓度，同时显著降低关节腔注射频率，延长镇痛效果。本专利技术采用聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)包载糖皮质激素曲安奈德，制备一种缓释制剂，并在PLGA微球中添加玻尿酸颗粒，从而进一步提高骨关节炎镇痛效果。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种治疗骨关节炎疼痛的载曲安奈德的PLGA缓释微球，该微球以PLGA包载曲安奈德，同时包裹玻尿酸颗粒，可以在关节炎症部位缓慢释放曲安奈德，而玻尿酸是一种粘性多糖，可以进一步补充关节炎部位的粘弹性，从而缓解炎症疼痛的效果。本专利技术采用的技术方案：一种曲安奈德PLGA缓释微球注射剂，所述制剂包含曲安奈德、PLGA共聚物和玻尿酸。所述的载曲安奈德的PLGA缓释微球(下文中简称载药缓释微球)是将PLGA与曲安奈德通过多重乳化法制成的载药微球。具体说：是将PLGA与曲安奈德以及玻尿酸通过多重乳化法制成的载药微球，所述的载药微球中的PLGA共聚物分子量为20000-50000Da，共聚物乳酸(lacticacid，LA)/羟基乙酸(glycolicacid，GA)的摩尔比为(75-85)∶(15～25)。PLGA与曲安奈德的重量比为100:(5～25)，PLGA与玻尿酸重量比例为100:(5～15)，在有机溶剂和聚乙烯醇溶液中采用水包油包固体(solid-in-oil-in-water)乳化制备而成。得到的微球粒径均一，在20～80微米之间，药物包封率在80～95％之间，稳定性好。其中水相分散介质采用浓度为1～6％的聚乙烯醇。所述的曲安奈德PLGA缓释微球注射剂的制备方法，所述的方法包括以下步骤：1)将曲安奈德和PLGA共聚物溶于有机溶剂中作为油相，乳化剂溶于水中作为水相；2)将玻尿酸溶液采用冷冻相分离法制成玻璃化颗粒；3)将玻璃化玻尿酸颗粒加到曲安奈德PLGA油相形成油包固体乳，即solid-in-oil；4)将以上油包固体乳和聚乙烯醇水相用高压均质机制成水包油包固体多重乳剂；5)去除溶剂，在蒸馏水中硬化，洗涤三次然后冷冻干燥制成微球。所述的油相和水相的体积比例为1:5～100；进一步的，所述的油相和水相的体积比例为1:50。所述的有机溶剂为二氯甲烷：所述的乳化剂为1～6％w/w的聚乙烯醇(型号PVA1788)。乳化采用电动均质机(匀浆)，也或可采用超声乳化或电动搅拌等方法。经过优选后发现PLGA的分子量为20000Da，LA/GA＝75/25(以摩尔比计)的PLGA为基质材料，PLGA与曲安奈德的重量比为100:15，PLGA与玻尿酸的重量比为100:10，二氯甲烷为有机相，3％PVA为水相，1000转/分钟电动搅拌3min，然后加入蒸馏水磁力搅拌5hr进行固化，洗涤3次然后冷冻干燥。所制备的微球平均粒径为43.9微米，大小较均匀一致，表面光滑、无粘连，包封率达94.6％，载药率约为14.2％，可持续稳定释放药物达3个月，缓释效果佳，且动物实验表明：在大鼠链球菌细胞壁肽聚糖关节炎模型中，本缓释微球与市场上速释曲安奈德注射剂相比可显著延长镇痛效果。本专利技术具有如下技术效果：本专利技术的载药缓释微球具有较好的稳定性。采用PLGA微球包载曲安奈德，不仅可以缓慢释放药物，同时可以增加药物稳定性，减少药物水解。反相疏水高效液相法检测结果显示，体外释放于水溶液的速释曲安奈德有明显的降解吸收峰，而包载在微球内的曲安奈德结构较完整，无明显降解产物吸收峰出现。玻尿酸同时起到协同增效作用，因为玻尿酸改善膝关节粘度，进一步减小曲安奈德的清除率，延长作用时间。本专利技术的载药缓释微球注射剂适用于骨关节炎疼痛的治疗，可以调整给药次数，比如每三个月一次关节腔内注射，达到在骨关节炎患者的关节和周关节组织内长效镇痛效果。本专利技术的载药缓释微球注射剂在大鼠链球菌细胞壁肽聚糖关节炎模型中，与市场上速释曲安奈德注射剂相比可显著延长镇痛效果。通过病理组织学检查，缓释微球治疗组大鼠膝关节组织结构正常，而速释曲安奈德注射剂组大鼠膝关节显示出炎症，骨吸收和软骨损失，仅稍优于空白对照组。本专利技术可显著减少注射次数从而减轻患者负担，增加治疗依从性，并延长镇痛时间，是一种极具临床应用前景的新剂型。附图说明图1为本专利技术的载药缓释微球的扫描电镜图。图2为本专利技术的载药缓释微球体外释放曲线。图3为本专利技术的载药缓释微球载在大鼠SCW炎症模型中的体内镇痛效果(电子Von-Frey痛觉仪检测)。具体实施方式下面结合附图对本专利技术进行详细说明：实施例11.载药缓释微球的制备采用溶剂挥发法制备载曲安奈德的复合PLGA缓释微球。步骤如下：精密称取PLGA50mg，溶于1ml二氯甲烷，加入曲安奈德7.5mg，以及玻尿酸冷冻诱导相分层玻璃化颗粒(含玻尿酸5mg)，涡旋振荡充分溶解，为有机相。用1ml注射器吸取有机相，缓缓注入50ml3％PVA水溶液中，1000rpm电动搅拌3分钟，继续磁力搅拌5小时。固化好的载药微球经0.22μm微孔滤膜抽滤，用500ml蒸馏水反复洗涤，收集载药微球，真空冷冻干燥即得载曲安奈德复合PLGA微球。实验证明：当PLGA与曲安奈德的投料比为50mg/7.5mg时，所获得的载药缓释微球具有最佳的包封率和载药率，分别为94.6％与14.2％。上述的PLGA基质材料的分子量为20000Da，LA/GA＝75/25(以摩尔比计)，此材料可以是市售产品或采用通用的开环聚合法合成制成。2.载药微球表面形态观察及粒径测定取适量载药缓释微球冻干粉，均匀分散在双面碳胶带上，离子镀膜仪溅金后，扫描电镜观察，微球大小较均匀，表面光滑，分散良好，无粘连(图1)。测量400个载药微球的粒径，平均粒径为43.9μm。3.载药微球包封率和载药率的测定采用UPLC色谱法检测。色谱条件如下：流动相为乙腈/水＝40/60或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种曲安奈德PLGA缓释微球注射剂，其特征在于：所述制剂包含曲安奈德、PLGA共聚物和玻尿酸，其中，PLGA与曲安奈德的重量比为100:(5～25)；PLGA与玻尿酸的重量比为100:(5～15)。

【技术特征摘要】
1.一种曲安奈德PLGA缓释微球注射剂，其特征在于：所述制剂包含曲安奈德、PLGA共聚物和玻尿酸，其中，PLGA与曲安奈德的重量比为100:(5～25)；PLGA与玻尿酸的重量比为100:(5～15)。2.根据权利要求1所述的曲安奈德PLGA缓释微球注射剂，其特征在于：所述的载药微球中的PLGA共聚物分子量为20000-50000Da，共聚物乳酸(lacticacid，LA)/羟基乙酸(glycolicacid，GA)的摩尔比为(75-85)∶(15～25)。3.根据权利要求1所述的曲安奈德PLGA缓释微球注射剂，其特征在于，所述的载药微球中的PLGA共聚物分子量为20000Da；所述的LA/GA的摩尔比为75/25；所述的PLGA与曲安奈德的重量比为100:15；所述的PLGA与玻尿酸的重量比为100:10。4.根据权利要求1所述的曲安奈德PLGA缓释微球注射剂，其特征在于：所述的载药微球粒径均一，在20～80微米之间，药物包封率在80～9...

【专利技术属性】
技术研发人员：何智健，谢卫锋，吴鹏程，李浩源，
申请(专利权)人：江苏富泽药业有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32