The invention discloses a fermentation method for raising the total terpene fermentation yield of three species of the obliquus obliquus, which comprises the following steps: (1) preparation of seed fluid; (2) inoculating and fermenting. The culture medium and fermentation medium formula of seed were optimized, easy, low cost of raw materials, and adding 2.5~3.5g/L soybean oil before fermentation in the fermentation medium, the fermentation parameters were optimized. The method is simple, strong operability, short fermentation cycle, and at the same time significantly improve the mycelia yield and total yield of three terpene.
【技术实现步骤摘要】
一种提高桦褐孔菌总三萜发酵产量的发酵方法
本专利技术涉及一种利用液态深层发酵技术生产大型真菌活性代谢产物的方法,尤其是涉及一种提高桦褐孔菌总三萜发酵产量的发酵方法。
技术介绍
桦褐孔菌是一种生长在白桦树上的珍贵药用大型真菌,主要分布在俄罗斯北部,北欧、我国黑龙江、吉林等地。桦褐孔菌作为民间草药,在东欧、俄罗斯等国家有相当长的使用历史。现代医学研究表明,桦褐孔菌具有治疗各种消化系统癌症、提高免疫力、治疗糖尿病有较好的效果,同时其还具有抗衰老和抗病毒的作用。长期的动物实验及临床实验表明桦褐孔菌没有任何毒副作用。桦褐孔菌神奇的功效,无论从经济价值还是社会价值,都有必要去研究、开发。桦褐孔菌多糖和三萜是其重要的功效成分。三萜化合物具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、提高免疫力等生物活性,具有很高的药用开发前景。目前已发现的桦褐孔菌三萜化合物多达几十种,大多为四环三萜和五环三萜。而目前桦褐孔菌三萜主要是从野生菌核中分离的,但野生桦褐孔菌资源稀少,且价格昂贵。人工栽培技术目前尚处于研究阶段,且人工栽培子实体由于生长周期短,有效成分含量低,不足以满足其药用需求。因此,液态深层发酵方法成为了桦褐孔菌功效成分生产研究的热点。但目前的桦褐孔菌深层发酵研究主要集中在以菌丝体和多糖为目标产物进行发酵培养基及发酵工艺的优化。2011年公开的中国专利技术专利“一种桦褐孔菌深层发酵培养基及桦褐孔菌的深层发酵方法”(公开号为CN102115350A)中,通过优化发酵培养基及开发了两阶段发酵工艺,提高了菌丝体和胞内、胞外多糖的产量。2016年公开的中国专利技术专利“一种快速深层液态发酵生产桦褐孔菌菌 ...
【技术保护点】
一种提高桦褐孔菌总三萜发酵产量的发酵方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)种子液的制备在无菌条件下将桦褐孔菌从平板上刮下,接种到装有100 ml种子培养基的摇瓶中,于温度28~30℃,搅拌转速150~180rpm条件下培养3~5天,得到一级种子液;将一级种子液在无菌条件下倒入已灭菌装有玻璃珠的药瓶中,震荡摇匀,将桦褐孔菌菌丝体打散,以种子培养基体积为基准,将接种量为9~10%的一级种子液接入到装有1L种子培养基的摇瓶中,于温度28~30℃,搅拌转速150~180rpm条件下培养至少2天,得二级种子液;(2)接种发酵在发酵罐中装入发酵培养基并灭菌后,以发酵培养基体积为基准,将接种量为9~10%的二级种子液在无菌条件下接种到发酵罐中,同时在发酵培养基中加入2.5~3.5g/L的豆油,于温度28~30℃,搅拌转速150~180rpm,通气量为5~7L/min条件下连续发酵至少9天,停罐即完成整个发酵过程。
【技术特征摘要】
1.一种提高桦褐孔菌总三萜发酵产量的发酵方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)种子液的制备在无菌条件下将桦褐孔菌从平板上刮下,接种到装有100ml种子培养基的摇瓶中,于温度28~30℃,搅拌转速150~180rpm条件下培养3~5天,得到一级种子液;将一级种子液在无菌条件下倒入已灭菌装有玻璃珠的药瓶中,震荡摇匀,将桦褐孔菌菌丝体打散,以种子培养基体积为基准,将接种量为9~10%的一级种子液接入到装有1L种子培养基的摇瓶中,于温度28~30℃,搅拌转速150~180rpm条件下培养至少2天,得二级种子液;(2)接种发酵在发酵罐中装入发酵培养基并灭菌后,以发酵培养基体积为基准,将接种量为9~10%的二级种子液在无菌条件下接种到发酵罐中,同时在发酵培养基中加入2.5~3.5g/L的豆油,于温度28~30℃,搅拌转速150~180rpm,通气量为5~7L/min条件...
【专利技术属性】
技术研发人员:魏振华,陈妮,王开祥,李言郡,范秋领,侯保朝,
申请(专利权)人:杭州娃哈哈科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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