可用于辅助诊断系统性红斑狼疮的多肽、检测器件和检测试剂盒技术方案

本发明专利技术涉及可用于辅助诊断系统性红斑狼疮的多肽，检测器件和检测试剂盒。本发明专利技术的试剂盒包括检测器件，所述的检测器件包括固体载体和连接于该固体载体上的多肽。本发明专利技术的检测试剂器件和检测试剂盒可用于系统性斑狼疮的辅助诊断和筛查。

Polypeptides, detection devices, and detection kits useful for the auxiliary diagnosis of systemic lupus erythematosus

The present invention relates to polypeptides, detection devices, and assay kits useful for the auxiliary diagnosis of systemic lupus erythematosus. The kit comprises a detection device including a solid carrier and a polypeptide attached to the solid carrier. The detection reagent, the device and the detection kit of the invention can be used for the auxiliary diagnosis and screening of systemic lupus erythematosus.

【技术实现步骤摘要】
可用于辅助诊断系统性红斑狼疮的多肽、检测器件和检测试剂盒
本专利技术主要涉及免疫检测技术。具体而言，本专利技术涉及可用于辅助诊断系统性红斑狼疮的多肽组合物，检测器件和检测试剂盒。
技术介绍
系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)是一种以自身抗体产生和免疫复合物形成为特征的自身免疫性疾病，临床表现为全身症状及多系统多器官受累的症状，严重影响患者的寿命和生活质量。我国SLE的发病率为70.1/10万，并且有逐年上升的趋势。SLE的早期诊断、早期治疗是改善预后的关键。然而我国自身免疫性疾病诊断水平较低，并且诊断试剂主要依赖进口，造成诊断费用昂贵，增加了国家和患者的医疗成本，也不利于向基层医院普及。因此，建立稳定、快捷、适合推广的检测方法，是目前需要解决的问题。SLE临床诊断标准中包括自身抗体如抗核抗体((ANA)、抗双链DNA抗体(ds-DNA抗体)和抗Sm抗体检测，但由于特异性和灵敏度的不高，还不是理想的血清学检测指标。如果能够建立SLE特异的“白身抗体谱”检测方法，同时检测多种特异性抗体，提高检出率及准确性，将为SLE的诊断、分类、疗效观察和预后判断提供了可靠的依据，具有重要的临床意义。因此，寻找一种敏感性强、特异性高而义简便易行的血清学检测方法，对系统性红斑狼疮的早期诊断及治疗具有重要意义。大量自身抗体的出现是自身免疫性疾病的重要特征之一，但由于其发病机制尚不明确，难以直接利用自身抗原检测抗体。抗原表位(epitope)是抗原分子中识别、结合抗体的基础，因此是检测抗体的实际有效组分。以抗原表位肽或其模拟肽(mimotope)作为诊断工具有以下几个优势：1)可以提高诊断的灵敏度和特异性，避免了生物大分子易产生的非特异性结合(DerooSetal(2001)CombChemHighThroughputScreen4:75–115)；2)扩大疾病诊断的范围，对于研究较少或难以体外应用的自身抗原如核酸抗原、多糖抗原、脂类抗原，以模拟肽作为天然抗原的替代物进行诊断，也可以获得与天然抗原表位一致的结果(BruceG(1997)ProcNatlAcadSciUSA94：1955–1960；JinapingQetal(1999)Hyridoma18(1)：103–109)；3)多肽制备、应用的成本低、易于质控。因此，自身抗原表位肽或其模拟肽(MeloenRHetal(2000)JMolRecognit13:352-359)的获得是制备自身抗体的多肽检测试剂的基础。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种对系统性红斑狼疮的诊断有用的多肽、编码该多肽的核酸、包含该核酸的表达载体、导入了该表达载体的宿主细胞、抗该多肽的抗体、包含该多肽的检测器件、包含该多肽或该检测器件的检测试剂盒、以及该多肽在检测干燥综合征中的用途、该多肽在制备用于检测系统性红斑狼疮的试剂盒或检测器件中的用途。即，本专利技术包含下述技术方案：1.一种多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，即：ETFAGGVHPAIALREYRKKM。2.编码权利要求1所述的多肽的核酸。3.包含权利要求2所述的核酸的表达载体。4.导入了权利要求3所述的表达载体的宿主细胞。5.一种检测器件，其包括：固体载体，以及连接于该固体载体上的权利要求1所述的多肽。6.根据权利要求5所述的检测器件，其中，所述固体载体是iPDMS薄膜。7.一种检测试剂盒，其包括权利要求1所述的多肽、或者权利要求5或6所述的检测器件。8.抗权利要求1所述的多肽的抗体。9.权利要求1所述的多肽在制备用于检测系统性红斑狼疮的试剂盒或检测器件中的用途。附图说明图1iPDMS薄膜的制作过程进行说明的示意图。图2说明多肽微阵列点样模式的示意图。图3是显示对健康正常人或非系统性红斑狼疮病人血清进行检测的结果的照片。图4是显示对系统性红斑狼疮病人血清进行检测的结果的照片。具体实施方式本专利技术的多肽在另一个方面中，本专利技术提供对系统性红斑狼疮的早期筛查和临床辅助诊断有用的多肽，由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列构成，即：ETFAGGVHPAIALREYRKKM。如实施例所示，本专利技术的多肽对系统性红斑狼疮病人的血清呈阳性反应，而对健康正常人或非系统性红斑狼疮病人血清呈阴性反应。因此，本专利技术的多肽作为系统性红斑狼疮的早期筛查和临床辅助诊断工具是有用的。本专利技术的多肽可以用于制造可用于系统性红斑狼疮的早期筛查和临床辅助诊断的检测器件(例如下述的本专利技术的检测器件)或检测试剂盒(例如下述的本专利技术的检测试剂盒)。本专利技术的多肽可以适宜采用(1)化学合成方法、或(2)酶反应合成方法等公知方法来获得，但不限于此，其中化学合成更为简便。在化学合成本专利技术的多肽情况下，通过使用肽合成仪合成或者半合成该多肽来进行。作为化学合成方法，可以列举出例如肽固相合成法等。这样合成的肽可以采用常规手段例如离子交换色谱、反相高效液体色谱、亲和色谱等进行纯化。这样的肽固相合成方法以及其后的肽纯化都是本
公知的。此外，在通过酶反应生产本专利技术的多肽的情况下，可以采用例如国际公开小册子WO2004/011653号所述的方法。即，可以这样来生产：将一方的氨基酸或二肽的羧基末端被酯化或酰胺化而得到的氨基酸或二肽、与氨基酸处于游离状态的氨基酸(例如羧基保护的氨基酸)在肽合成酶的存在下进行反应，生成的二肽或三肽。作为肽合成酶，可以列举出：具有生成肽的能力的微生物的培养物、由该培养物分离的微生物菌体、或该微生物的菌体处理物、或该微生物来源的肽合成酶。而且，除了上述的酶方法、化学合成方法以外，还可以采用例如基因工程方法来生产本专利技术的多肽。本专利技术的多肽的氨基酸序列可以采用常规的方法进行分析和确认，例如可以利用质谱、色谱等方法来进行分析和确认。本专利技术的检测器件在另一方面中，本专利技术还提供一种检测器件(本专利技术的检测器件)，其包括固体载体、以及连接于该固体载体上的本专利技术的蛋白质或本专利技术的多肽。所述检测器件对于系统性红斑狼疮的早期筛查和临床辅助诊断是有用的。在本专利技术中，对固体载体没有特殊限制，只要是作为固体或不溶性材料(例如是可以通过过滤、沉淀、磁性分离等从反应混合物中分离的材料)的载体即可。构成固体载体的材料包括但不限于：硅胶(聚二甲基硅氧烷，PDMS)、纤维素、特氟隆TM、硝基纤维素、琼脂糖、葡聚糖、壳聚糖、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚酰胺、聚丙烯、尼龙、聚偏二氟乙烯、胶乳、二氧化硅、玻璃、玻璃纤维、金、铂、银、铜、铁、不锈钢、铁氧体、硅晶片、聚乙烯、聚乙烯亚胺、聚乳酸、树脂、多糖类、蛋白(白蛋白等)、碳或它们的组合等。固体载体的形状包括但不要限于：珠子、磁珠、薄膜、微细管、滤膜、板、微量板、碳纳米管、传感器芯片等。正如本
公知的那样，薄膜或板等平坦的固体载体上可以设置凹坑、沟槽、滤膜底部等。在本专利技术中，磁珠可以具有约25nm-约1mm范围的球体直径。在优选的实施方式中，磁珠具有约50nm-约10μm范围的直径。磁珠的尺寸可以根据特定的用途来进行选择。在本专利技术中，由Sepharose等高交联球形琼脂糖制成的珠子具有约24μm-约165μm范围的直径。优选地，高交联球形琼脂糖珠具有约24μm-约44μm范围的直径。高交联球形琼脂糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，即：ETFAGGVHPAIALREYRKKM。

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，即：ETFAGGVHPAIALREYRKKM。2.编码权利要求1所述的多肽的核酸。3.包含权利要求2所述的核酸的表达载体。4.导入了权利要求3所述的表达载体的宿主细胞。5.一种检测器件，其包括：固体载体，以及连接于该固体载体上的权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：马宏伟，卢煜东，李静芝，
申请(专利权)人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所，
类型：发明
国别省市：江苏,32