木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂及其制备方法和应用，所述可湿性粉剂包括木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌丝匀浆与食品级羟基淀粉醚的质量比为2:1；所述可湿性粉剂还包括糊精、木质素磺酸钠、分散剂NNO、甲基纤维素、羧甲基纤维素、壳聚糖。本发明专利技术的可湿性粉剂具有配制方便，包衣容易，高效低毒，对环境相对安全，对番茄灰霉病具有良好的防效。

Trichoderma and brassinolide wettable powder and preparation method and application thereof

The invention discloses a trichoderma and brassinolide wettable powder and preparation method and application thereof, wherein the wettable powder including Trichoderma spore mycelial homogenate, brassinolide, food grade hydroxyl starch ether obtained by mixing powder, wherein, the quality of the powder of Trichoderma spore and mycelial homogenate food grade hydroxyl starch ether is 2:1; the WP also includes dextrin, sodium lignosulfonate, dispersant NNO, methyl cellulose, carboxymethyl cellulose, chitosan. The wettable powder of the invention has the advantages of convenient preparation, easy coating, high efficiency, low toxicity, relatively safe environment and good control effect on Tomato Gray mold.

【技术实现步骤摘要】
木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂及其制备方法和应用，特别是涉及一种生防型木霉菌可湿性粉剂制备方法及其在番茄灰霉病防治中的应用。
技术介绍
木霉菌(Trichoderma)作为生物防治中极为重要的生防真菌，由于具有多种拮抗机制，对镰刀菌、灰霉病菌、立枯丝核菌等多种病原真菌均有很好的抑制效果，不仅如此，木霉菌可以系统诱导植物的防御反应，从而提高植物的抗病能力。然而，木霉菌在应用中存在两个问题需要解决：木霉菌有时会产生一些抑制性物质抑制种子萌发，因此利用植物源激素的促生功能可解决这一难题。另一方面，在木霉菌生物制剂中，多是利用其活孢子对植物进行生物防控。木霉菌孢子制剂中大部分应用的是分生孢子。但分生孢子受环境条件影响较大，寿命较短，生活力弱，不易长期保存。厚垣孢子虽然细胞壁厚，对环境要求不高，寿命较长，但产生条件相对严格，不易获得。除此之外，孢子制剂在货架期方面仍然存在诸多不足。如何提高木霉菌孢子制剂的货架期也是近年来研究的主要问题。天然芸苔素内酯，也称油菜素内酯(Brassinolide,简写为BRs)，是一类甾醇类植物激素，是目前国际上公认的活性最佳、最广谱的一类植物生长激素。我国中科院上海植物生理研究所利用芸苔素内酯对小麦、玉米、西瓜、黄瓜、烤烟、葡萄、水稻等作物进行增产试验。结果表明，浓度为0.01～0.1ppm的芸苔素内酯类激素，可使小麦增产10％，玉米增产9.8％～18.4％，西瓜增产20％。芸苔素内酯不但对多种农作物有促生和增产的作用，在植物抗病抗逆性方面也同样起到不可或缺的作用。农作物经常遭受恶劣干旱气候的威胁，这种高温干旱天气会使植物细胞膜结构受到损害、削弱光合作用能力、使其生长受到抑制。BRs可通过改善植物的渗透调节、提高植物体内多种保护酶如过氧化物酶(POD)、超氧化物气化酶(SOD)等酶的活性来增强植物的抗逆能力。但芸苔素内酯单独使用几乎无抑制病菌的功能，因此通过与生防木霉菌混配可能提高其防病效果，弥补这一不足。目前，利用木霉菌进行生物防治的效果已经获得国内外肯定，木霉菌与其他化学农药复配也已经有很广泛的研究。但这些复配制剂在应用时仍存在诸多问题：一、木霉菌复配制剂的防效仍不及化学杀菌剂的防治效果，多种化学杀菌剂对木霉菌本身的生长具有抑制作用，间接影响木霉菌的生防效果。田间应用时，木霉菌的稳定性较差，活性物质易受环境影响。二、木霉菌与化学农药的复配仍对环境有一定污染，并没有达到生物防治无污染的目的。三、国内市场上所生产的木霉菌可湿性粉剂在溶于水后仍残留部分沉淀，悬浮率较低。
技术实现思路
针对生防木霉菌和芸苔素内酯各自不足和互补优势，本专利技术提供了一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂及其制备方法和应用，有效用于番茄灰霉病的防治。本专利技术是从大量的木霉菌资源中筛选获得的拮抗木霉菌株，对番茄灰霉病具有很好的抑制作用。同时，将天然芸苔素内酯与木霉菌联用，发挥各自优势作用的同时，对番茄灰霉病的防治具有协同增效作用。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：第一方面，本专利技术提供了一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂，包括木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌丝匀浆与食品级羟基淀粉醚的质量比为2:1；所述可湿性粉剂还包括糊精、木质素磺酸钠、分散剂NNO、甲基纤维素、羧甲基纤维素、壳聚糖，上述各组分的质量分别为所述木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末质量的8.0-10.0％、4.0-6.0％、4.0-6.0％、9.5-11.0％、4.0-6.0％、3％。优选地，所述芸苔素内酯的加入量为：每500g木霉菌孢子菌丝匀浆中加入800mL0.1％芸苔素内酯稀释10倍液。优选地，所述可湿性粉剂中，木霉菌的浓度为7.5-8.0×108个/g。优选地，所述木霉菌为深绿木霉菌CGMCCNo.6479(该菌株见中国专利技术专利文献CN103484377A中的记载)。优选地，所述木霉菌孢子菌丝匀浆的制备方法如下：以0.5％的接种量将一级菌种接种于优化后的木霉菌液体发酵培养基中，发酵培养7天后，30Hz高速离心机离心5min，即得木霉菌孢子菌丝匀浆。优选地，所述一级菌种是通过将木霉菌菌饼以3-5片/三角瓶的接种量于PD培养基中、180r/min、28℃条件下培养4d获得。优选地，所述优化后的木霉菌液体发酵培养基组成包括：玉米粉5.0g，葡萄糖2.0g，大豆蛋白胨2.0g，K2HPO41.0g，FeSO40.01g，MgSO40.5g，KCl0.5g；培养基的装液量为100mL/250mL。优选地，所述发酵培养的条件为：温度28.33℃，PH＝6.28，转速183.72r/min。第二方面，本专利技术提供了一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂的制备方法，所述方法包括以下步骤：将木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末与糊精、木质素磺酸钠、分散剂NNO、甲基纤维素、羧甲基纤维素、壳聚糖按比例混合均匀后，进行干燥，即得所述可湿性粉剂。第三方面，本专利技术提供了一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂作为生防制剂在防治番茄灰霉病中的应用。第四方面，本专利技术提供了一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂在防治番茄灰霉病中的使用方法，所述使用方法具体为：将所述可湿性粉剂溶解在水中形成混合溶液，叶面喷施即可；所述混合溶液中可湿性粉剂的浓度为2g/L。本专利技术经过木霉菌初筛，复筛纯化后保存于冻存管中。在上述优化培养基中进行液体发酵使其产生木霉菌孢子发酵液，将含有大量孢子的发酵液装入30Hz高速离心机中离心5min，与芸苔素内酯、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚、糊精、木质素磺酸钠、分散剂NNO、甲基纤维素、羧甲基纤维素、壳聚糖；按照最佳配比混合制成木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂，将所述可湿性粉剂(10g/5L)溶解在水中，在温室与田间叶面喷施。与对照相比，防治番茄灰霉病效果显著，平均达70％以上。本专利技术的可湿性粉剂具有配制方便，包衣容易，高效低毒，对环境相对安全，对番茄灰霉病具有良好的防效。与现有技术相比，本专利技术具有如下的有益效果：1、该木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂中不仅含有大量木霉菌孢子和菌丝体，同时还有芸苔素内酯天然植物激素。研究表明，木霉菌孢子发酵液有抑制多种病原菌的功能。而本专利技术采用的深绿木霉菌CGMCCNo.6479，经过反复试验得出，其对番茄灰霉病的防治具有明显的效果。芸苔素内酯，作为一种新型植物生长调节剂，可在植物的各个阶段起到调控作用。不但可以促进细胞的伸长和分裂，促进光合作用，提高作物抗高温、抗干旱等抗逆性；幼苗期促进根的伸长、营养期促进茎叶的生长、生殖期促进果实成熟。芸苔素内酯能够有利于植物过氧化氢CAT、超氧化物酶SOD、过氧化物酶POD活性的提高，增强细胞自我保护功能。2、该木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂是由专门针对番茄灰霉病具有很好防治效果的深绿木霉菌及天然植物生长调节剂芸苔素内酯优化组配而成，功能上优势互补；二者不仅在防治灰霉病的机制上具有协同增效作用，同时对植物的生长指标有显著的促进作用，对种子的萌发及发芽势具有显著促进作用。3、该木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂的载体选用的是可溶于水且对木霉菌及芸苔本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂，其特征在于，包括木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌丝匀浆与食品级羟基淀粉醚的质量比为2:1；所述可湿性粉剂还包括糊精、木质素磺酸钠、分散剂NNO、甲基纤维素、羧甲基纤维素、壳聚糖，上述各组分的质量分别为所述木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末质量的8.0‑10.0％、4.0‑6.0％、4.0‑6.0％、9.5‑11.0％、4.0‑6.0％、3％。

【技术特征摘要】
1.一种木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂，其特征在于，包括木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌丝匀浆与食品级羟基淀粉醚的质量比为2:1；所述可湿性粉剂还包括糊精、木质素磺酸钠、分散剂NNO、甲基纤维素、羧甲基纤维素、壳聚糖，上述各组分的质量分别为所述木霉菌孢子菌丝匀浆、芸苔素内酯、食品级羟基淀粉醚混合得到的粉末质量的8.0-10.0％、4.0-6.0％、4.0-6.0％、9.5-11.0％、4.0-6.0％、3％。2.根据权利要求1所述的木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂，其特征在于，所述芸苔素内酯的加入量为：每500g木霉菌孢子菌丝匀浆中加入800mL质量分数为0.01％芸苔素内酯。3.根据权利要求1所述的木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂，其特征在于，所述木霉菌为深绿木霉菌CGMCCNo.6479。4.根据权利要求1所述的木霉菌·芸苔素内酯可湿性粉剂，其特征在于，所述木霉菌孢子菌丝匀浆的制备方法如下：先将木霉菌菌饼以3-5片/三角瓶的接种量于PD培养基中、180r/min、28℃条件下培养4-5d获得一级菌种；再以0.5％的接种量将一级菌种接种于优化后的木霉菌液体发酵培养基中，发酵培养7天后，30Hz高速离心机离心5m...

【专利技术属性】
技术研发人员：张婧迪，陈捷，林润泽，刘志诚，王猛，孙佳楠，贺安乐，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海,31