一种磷酸泰地唑胺有关物质分析方法技术

本发明专利技术涉及一种磷酸泰地唑胺的有关物质分析方法，在原料药生产过程中需对产品的含量与有关物质进行及时、有效、准确的分析与测定。本发明专利技术所建立的分析方法，简单易行，灵敏、准确、精密度高，对磷酸泰地唑胺工艺杂质具有较高的检出效能，能够在大生产中应用，更为有效的控制产品质量。

【技术实现步骤摘要】
一种磷酸泰地唑胺有关物质分析方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种磷酸泰地唑胺的有关物质检测方法。
技术介绍
磷酸泰地唑胺，结构式如下：其为美国Cubist公司(现已被默沙东收购)开发的急性细菌性皮肤病和皮肤结构感染治疗药物，为噁唑烷酮类抗菌药。该药物于2014年6月通过FDA审批，在美国上市，商品名SIVEXTRO，为200mg规格片剂及冻干粉针。给药方式为每日口服或静脉注射(1小时)200mg，持续6天。用于治疗急性细菌性皮肤病和皮肤结构感染的恶唑烷酮类抗生素药物。磷酸泰地唑胺是一种前药，在体内可被磷酸酶迅速转化为具有生物活性的泰地唑胺。用于由金黄色葡萄球菌,(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌)，化脓性链球菌，链球菌，咽峡炎链球菌组(包括咽峡炎链球菌，中间链球菌，和星座链球菌)，和粪肠球菌等引起的ABSSSI。该药物目前获得FDA批准时间较短，尚未获得进口批准，但是已经批准进口药物的临床申请，并且正在国内进行临床试验。磷酸泰地唑胺在制备过程中由于合成路线长，有关中间体多，造成成品中含有多种可能的杂质(也称为有关物质)，如：对其中的杂质进行检测是制剂终产物的必然要求，为此本专利技术对检测方法进行了研究，找到一种一次性检测多种磷酸泰地唑胺有关物质分析方法，研究结果表明，本专利技术建立的有关物质分析方法对磷酸泰地唑胺工艺及降解杂质的检出效能高，可以有效控制磷酸泰地唑胺原料药中各个杂质，有助于提高产品质量。
技术实现思路
本专利技术提供一种磷酸泰地唑胺的有关物质检测方法，在原料药生产过程中需对产品的含量与有关物质进行及时、有效、准确的分析与测定。目前尚无原料药、制剂分析方法及标准，需要自己摸索建立，专利技术人通过摸索梯度洗脱条件、更换色谱柱、摸索流动相PH、缓冲盐种类的选择、缓冲盐浓度的选择确定了磷酸泰地唑胺原料药中有关物质的分析方法。本专利技术所建立的分析方法，简单易行，灵敏、准确、精密度高，对磷酸泰地唑胺工艺杂质具有较高的检出效能，能够在大生产中应用，更为有效的控制产品质量。本专利技术提供一种针对磷酸泰地唑胺的有关物质检测方法，所述方法包括以下步骤：步骤1，供试品溶液的制备：取磷酸泰地唑胺配制成供试品溶液；步骤2，对照品溶液制备：将供试品，有关物质，配制成对照品溶液；步骤3，有关物质的含量计算：分别将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，使用峰面积法计算得到供试品溶液中有关物质含量。其中，所述分析方法的液相色谱条件如下：色谱柱：ThermoHypersilgold，规格4.6×250mm，5μm；流动相A：0.015mol/L磷酸氢二钾，以磷酸调pH值为6.5；流动相B：乙腈；检测波长：300nm；流速：1.0ml/min柱温：30℃梯度洗脱程序如下表所示：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)0901059010306040406040419010509010有关物质结构如下：优选的，本专利技术的检测方法，步骤如下：步骤1，供试品溶液制备：方法如下：取磷酸泰地唑胺12.5mg，加流动相A溶解并稀释至25ml，作为供试品溶液。步骤2，对照品溶液的制备：方法如下：取待测样品，粗品工艺杂质,粗品甲基异位杂质，粗品无氟工艺杂质,中间体杂质，终产物工艺杂质，各约12.5mg，分别置25ml量瓶中，加流动性A溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液储备液，量取上述各储备液1ml分别置100ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度作为对照品溶液。步骤3，有关物质的含量计算：方法如下：取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高约为满量程的10％-20％，精密量取供试品溶液与对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。各杂质相对保留时间如下所示。以各杂质与对照溶液主峰的峰面积，按百分之一自身对照法计算，任一未知杂质不得超过0.1％；总有关物质不得过1.0％。应用上述检测方法，检测含有各个杂质的系统适用性杂质对照品，得本方法系统适用性色谱图，如附图1所示。本专利技术检测方法是经过筛选获得的，筛选过程如下：①流动相pH的选择称取适量磷酸氢二铵，用水配制成0.015M的溶液，用磷酸分别调节为pH6.5、pH5.5、pH5.0、pH4.5、pH4.0的磷酸氢二铵水溶液，再依次量取乙腈适量，与上述各溶液分别配制成不同pH的流动相。称取中试粗品1604271适量，用各不同PH的缓冲盐流动相依次制成浓度为0.5mg/ml的样品溶液，依次在各流动相下进样，考察主峰的色谱纯度、保留时间、理论塔板数及分离度，详细数据如下表所示。表1流动相为不同PH的检测结果结果表明，当流动相pH值增加至6.5时，泰地唑胺峰的理论塔板数明显增加，说明检出杂质更为灵敏。②缓冲盐的选择分别称取适量磷酸氢二铵、磷酸二氢钾及磷酸氢二钠，用水配制成0.015M的溶液，用磷酸调节为pH6.5，依次配制成比例为乙腈：缓冲盐溶液(流动相比例同上)的流动相。称取中试粗品适量，用各流动相依次制成浓度为0.5mg/ml的样品溶液，依次在各流动相下进样，考察主峰的色谱纯度、保留时间、理论塔板数、杂质个数及分离情况。详细数据如下表所示。表2流动相为不同缓冲盐的检测结果结果表明，采用磷酸氢二钠为缓冲盐时，分离度不合格，以磷酸氢二钾为缓冲盐时，主峰与杂质分离度最好。故以磷酸氢二钾做为缓冲盐配制流动相。③缓冲盐浓度的选择称取适量磷酸氢二钾，用水分别配制成浓度为0.01M、0.015M、0.02M的溶液，用磷酸分别调节pH至6.5，依次配制成比例为乙腈：缓冲盐溶液(流动相比例同上)的流动相。称取中试粗品1604271适量，用各流动相依次制成浓度为0.5mg/ml的样品溶液，依次在各流动相下进样，考察主峰的色谱纯度、保留时间、理论塔板数、杂质个数及分离情况，详细数据如下表所示。表3不同浓度缓冲盐为流动相的检测结果缓冲盐浓度色谱纯度保留时间理论塔板数杂质个数分离度0.01M99.50％17.3942764743.730.015M99.67％17.4522967963.870.020M99.46％17.5303308860.47结果表明，当缓冲盐浓度为0.015M时，以此配制的流动相检测结果理论塔板数明显增加，分离度最好，检出杂质个数较多。故选择浓度为0.015M的磷酸氢二钾溶液作为流动相的水相。④检测波长的选择分别称取中间体、各杂质及泰地唑胺适量，各用流动相(0.015M磷酸氢二钾溶液，pH6.5：乙腈＝70:30)配制成适当的溶液，在200nm～400nm范围内进行全波长扫描，中间体、各杂质及泰地唑胺均在300nm有较强紫外吸收，在确定的检测条件下，采用PDA检测器，对专属性试验项下的酸、碱、光、热、氧降解样品进行检测，各破坏试验下的降解杂质均在300nm波长有较强吸收，强制降解条件为：(1)酸破坏样品溶液：称取样品约12.5mg，精密称定，加入0.1molHCL1ml，于90°烘箱中加热2h，取出，晾凉，加入等浓度NaOH中和，用稀释剂(15mm磷酸氢二钾，PH6.5)溶解并稀释至25ml，摇匀，作为酸破坏样品溶液；(2)碱坏样品溶液：称取样品约12.5mg，精密称定，加入0.1molNaOH1ml，于室温下放置30min，加入等浓度H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种磷酸泰地唑胺的有关物质检测方法，所述方法包括以下步骤：步骤1，供试品溶液的制备：取磷酸泰地唑胺配制成供试品溶液；步骤2，对照品溶液制备：将供试品，有关物质，配制成对照品溶液；步骤3，有关物质的含量计算：分别将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品溶液中有关物质含量。其中，所述分析方法的液相色谱条件如下：色谱柱：Thermo Hypersil gold，规格4.6×250mm，5μm；流动相A：0.015mol/L磷酸氢二钾，以磷酸调pH值6.0‑7.0；流动相B：乙腈；检测波长：300nm；流速：0.8‑1.2ml/min柱温：25℃‑35℃梯度洗脱程序如下表所示：

【技术特征摘要】
1.一种磷酸泰地唑胺的有关物质检测方法，所述方法包括以下步骤：步骤1，供试品溶液的制备：取磷酸泰地唑胺配制成供试品溶液；步骤2，对照品溶液制备：将供试品，有关物质，配制成对照品溶液；步骤3，有关物质的含量计算：分别将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品溶液中有关物质含量。其中，所述分析方法的液相色谱条件如下：色谱柱：ThermoHypersilgold，规格4.6×250mm，5μm；流动相A：0.015mol/L磷酸氢二钾，以磷酸调pH值6.0-7.0；流动相B：乙腈；检测波长：300nm；流速：0.8-1.2ml/min柱温：25℃-35℃梯度洗脱程序如下表所示：2.如权利要求1所述的有关物质检测方法，其特征在于，所述磷酸特地唑胺有关物质如下：3.如权利要求1所述的有关物质检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1，供试品溶液制备：方法如下：取磷酸泰地唑胺12.5mg，加流动相A溶解并稀释至25ml，作为供试品溶液；步骤2，对照品溶液的制备：方法如下：取待测样品，粗品工艺杂质,粗品甲基异位杂质，粗品无氟工艺杂质,中间体杂质，终产物工艺杂质，各约12.5mg，分别置25ml量瓶中，加流动性A溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液储备液，量取上述各储备液1ml分别置100ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度作为对照品溶液；步骤3，有关物质的含量计算：方法如下：取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高约为满量程的10％-20％，精密量取供试品溶液与对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；各杂质相对保留时间如下所示。以各杂质与对照溶液主峰的峰面积，按百分之一自身对照法计算，任一未知杂质不得超过0.1％；总有关物质不得过1.0％。4.如权利要求1-3所述任一种有关物质检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1，供试品溶液制备：方法如下：取磷酸泰地唑胺12.5mg，加流动相A溶解并稀释至25ml，作为供试品溶液；步骤2，对照品溶液的制备：方法如下：取待测样品，粗品工艺杂质,粗品甲基异位杂质，粗品无氟工艺杂质,中间体杂质，终产物工艺杂质，各约12.5mg，分别置25ml量瓶中，加流动性A溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液储备液，量取上述各储备液1ml分别置100ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度作为对照品溶液；步骤3，有关物质的含量计算：方法如下：取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高约为满量程的10％-20％，精密量取供试品溶液与对照品溶液各10μl，分别注入...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷守娜，贾薇，王桂霞，苗玉梅，李宝齐，郭嘉林，孔凯，董凯，
申请(专利权)人：天津红日药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12