LMOD3在制备口腔鳞癌诊疗制剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了LMOD3在制备口腔鳞癌诊疗制剂中的应用，本发明专利技术公开了LMOD3基因、蛋白或其下调剂的用途，用于制备治疗口腔鳞癌的药物组合物。本发明专利技术还公开了LMOD3基因或其表达产物或特异性识别LMOD3基因或其表达产物的试剂在制备诊断口腔鳞癌的产品中的用途。

【技术实现步骤摘要】
LMOD3在制备口腔鳞癌诊疗制剂中的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及LMOD3在制备口腔鳞癌诊疗制剂中的应用。
技术介绍
口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma，OSCC)是由上皮组织恶变而来，是口腔颌面部常见的恶性肿瘤，占口腔恶性肿瘤的80％以上。目前为止，对口腔鳞状细胞癌的治疗仍然以手术治疗为主，并辅以放射治疗和化学药物治疗。尽管随着手术方式的不断改进以及辅助手段的加强，口腔鳞状细胞癌的治疗效果也逐渐改善，但是其五年生存率仍不足50％。随着恶性相关基因研究的不断深入，肿瘤的基因治疗已经成为研究恶性肿瘤治疗的新热点。基因治疗具有选择性强、损伤小、对原发灶及转移灶均有效的优点，已经成为手术、放疗和化疗之后的新的有希望的治疗手段。现阶段，基因治疗主要包括：基因修正、“自杀”基因的应用，反义性基因治疗以及RNA干扰(RNAinterference，RNAi)技术等。其中RNAi具有高效性、高稳定性、以及便利性等优点，因此在研究基因功能、抗病毒治疗以及抗肿瘤基因治疗等方面均得到广泛的应用。RNAi作为肿瘤基因治疗的新方法，可以抑制肿瘤细胞中一些基因以及生长因子的异常表达，从而抑制肿瘤细胞的增殖促进肿瘤细胞的凋亡，在肿瘤的基因治疗中具有重要的意义。RNAi是指具有同源性的双链NRA导致靶mNRA发生序列特异性降解的现象，是最近几年发现和发展起来的一门新兴的在转录水平上的基因阻断技术。它是真核生物中基因转录后沉默作用的重要机制之一。RNAi具有抑制作用强、稳定性高、细胞摄取相对容易等优点，在基因功能研究、抗病毒和抗肿瘤基因治疗方面均得到广泛应用。在肿瘤的发生发展过程中，多存在癌基因的过量表达，这种过量表达的癌基因可导致细胞增殖失控或凋亡受限，为肿瘤的基因治疗提供了特异的靶向分子。作为基因治疗的新工具，将RNAi应用于探寻癌症靶向相关基因，抑制肿瘤细胞中过量表达的一些因子，使与肿瘤发生发展相关的基因的表达降低从而抑制肿瘤细胞增殖和侵袭，能够大大提高肿瘤基因治疗的效果，是具有极好前景的肿瘤治疗方法。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种与口腔鳞状细胞癌发生发展相关的生物标志物，从而为口腔鳞癌的诊断和治疗提供一种分子手段。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了种LMOD3基因和/或其表达产物或特异性识别LMOD3基因和/或其表达产物试剂的用途，用于制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品。进一步，所述特异性识别LMOD3基因和/或其表达产物的试剂选自：特异性扩增LMOD3基因的引物；或特异性识别LMOD3基因的探针；或特异性结合LMOD3编码的蛋白的抗体或配体。进一步，所述特异性扩增LMOD3基因的引物对序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。本专利技术提供了一种诊断口腔鳞状细胞癌的产品，所述产品包括上面所述的试剂。进一步，所述产品包括芯片、试剂盒或制剂。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测LMOD3基因转录水平的针对LMOD3基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的LMOD3蛋白的特异性抗体；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测LMOD3基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括LMOD3蛋白的特异性抗体。进一步，所述试剂盒还包括使用说明书或标签、阳性对照物、阴性对照物、缓冲剂、助剂或溶剂；所述说明书或标签注明所述试剂盒用于检测口腔鳞癌。本专利技术提供了一种LMOD3基因或其表达产物的下调剂的用途，用于制备治疗口腔鳞状细胞癌的药物组合物。进一步，所述的LMOD3基因或其表达产物的下调剂选自：核酸抑制剂、蛋白抑制剂、蛋白水解酶、蛋白结合分子，其能够在基因或蛋白水平下调LMOD3基因或其编码的蛋白的表达或活性。进一步，所述LMOD3基因或其表达产物的下调剂为siRNA。本专利技术提供了一种预防、缓解或治疗口腔鳞状细胞癌的药物组合物，所述组合物含有：(1)如上所述的LMOD3基因或其表达产物的下调剂；和(2)药学上可接受的载体。本专利技术提供了一种筛选预防、缓解或治疗口腔鳞状细胞癌的潜在物质的方法，所述方法包括：(1)用候选物质处理表达或含有LMOD3基因或其编码的蛋白的体系；和(2)检测所述体系中LMOD3基因或其编码的蛋白的表达或活性。其中，若所述候选物质可降低LMOD3基因或其编码的蛋白的表达或活性(优选显著降低，如低20％以上，较佳的低50％以上；更佳的低80％以上)，则表明该物质为预防、缓解或治疗口腔鳞状细胞癌的潜在物质。进一步，所述的候选物质包括(但不限于)：针对LMOD3基因或其表达产物或其上游或下游基因或蛋白设计的干扰分子、核酸抑制物、结合分子(如抗体或配体)、小分子化合物等。本专利技术提供了LMOD3基因在制备治疗口腔鳞状细胞癌的药物组合物中的应用。本专利技术还提供了一种抑制细胞增殖的方法，所述方法是将LMOD3基因或其表达产物的下调剂在体外导入到肿瘤细胞中。进一步，所述下调剂包括将针对LMOD3基因的siRNA、shRNA、反义寡核苷酸或功能缺失型基因。本专利技术的优点和有益效果：本专利技术首次发现了差异性表达的LMOD3与口腔鳞状细胞癌的发生发展相关，提示检测LMOD3基因表达水平可成为口腔鳞状细胞癌早期诊断的辅助诊断指标。本专利技术首次发现了下调LMOD3基因表达水平可以抑制抑制癌细胞的增殖，降低癌细胞的侵袭率，从而为口腔鳞癌的干预提供了新途径。附图说明图1显示利用QPCR检测LMOD3基因在口腔鳞状细胞癌组织中的表达情况；图2显示利用QPCR检测LMOD3基因在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达情况；图3显示利用QPCR检测siRNA对LMOD3基因表达的影响；图4显示MTT法检测LMOD3对口腔鳞状细胞癌细胞增殖活性的影响；图5显示利用transwell小室检测LMOD3基因对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭的影响。具体的实施方式本专利技术经过深入的研究，首次发现了口腔鳞癌组织中LMOD3基因的表达显著高于正常粘膜组织，并且实验证明了LMOD3在口腔鳞癌细胞中也呈现高表达，下调LMOD3的表达水平可以抑制口腔鳞癌细胞的增殖和侵袭，提示LMOD3可作为诊断和治疗的靶标应用于临床。LMOD3蛋白是一种平滑肌蛋白，该蛋白包含三个肌动蛋白结合域、一个原肌球蛋白结合域、一个富含亮氨酸重复结构域和一个WH2结构域。该蛋白在平滑肌成核反应中起催化作用，在骨骼肌肌节细肌丝的组织中也起着重要的作用。该蛋白的突变会引起杆状体肌症。可用于本专利技术的LMOD3多核苷酸或蛋白(多肽)序列包括各种来源和物种的LMOD3，并且包括野生型、突变型的LMOD3，或其活性片段。在本专利技术的一些实施方案中，所述LMOD3来源于人类，一种代表性的人LMOD3的编码序列或氨基酸序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。本专利技术中，术语“生物标志物”是其在组织或细胞中的表达水平与正常或健康细胞或组织的表达水平相比发生改变的任何基因或蛋白。本专利技术可以利用本领域内已知的任何方法测定基因表达。本领域技术人员应当理解，测定基因表达的手段不是本专利技术的重要方面本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种LMOD3基因和/或其表达产物或特异性识别LMOD3基因和/或其表达产物试剂的用途，其特征在于，用于制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品。

【技术特征摘要】
1.一种LMOD3基因和/或其表达产物或特异性识别LMOD3基因和/或其表达产物试剂的用途，其特征在于，用于制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述特异性识别LMOD3基因和/或其表达产物的试剂选自：特异性扩增LMOD3基因的引物；或特异性识别LMOD3基因的探针；或特异性结合LMOD3编码的蛋白的抗体或配体。3.一种诊断口腔鳞状细胞癌的产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1或2所述的试剂。4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述产品包括芯片、试剂盒或制剂。5.一种LMOD3基因或其表达产物的下调剂的用途，其特征在于，用于制备治疗口腔鳞状细胞癌的药物组合物。6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的LMOD3基因或其表达产物的下调剂选自：核酸抑制剂、蛋白抑制剂、蛋白水解酶、蛋白结合分子，其能...

【专利技术属性】
技术研发人员：石小峰，肖枫，杜海威，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11