通过IL-13和IL-13受体链的拮抗作用治疗纤维化制造技术

本文提供了使用ＩＬ－１３拮抗剂，包括ＩＬ－１３受体无限制的可溶形式来治疗或抑制组织纤维化形成的方法。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是1997年提交的序列号No.08/841,751申请的部分继续申请，序列号No.08/841,751申请是1996年提交的序列号No.08/609,572申请的分案申请。本专利技术的领域本专利技术涉及通过IL-13与其受体和受体组份相互作用的拮抗作用治疗和抑制纤维化。本专利技术的背景多种调节分子，如细胞因子，包括白细胞介素-13(IL-13)已被确定。IL-13的多种蛋白质形式以及IL-13活性的DNA编码多种形式在McKenzie等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA903735(1993)；Minty等人，自然362248(1993)；以及Aversa等人WO94/04680中作了描述。因此，“IL-13”包括具有这些文献中所描述的序列和/或活性的蛋白质，不论其是通过遗传工程重组技术制备的；或从自然地或通过用其他因子诱导产生因子的细胞源提纯的；或通过化学方法合成的；或通过前述技术的组合获得的。IL-13是一种涉及产生几种生物活性的细胞因子，活性包括诱导IgG4和IgE转换，包括在人类未成熟B细胞(Punnonen等人，免疫学期刊1521094(1994))；诱导正常人类B细胞中种系IgE重链(∈)转录和CD23表达(Punnonen等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA903730(1993))；以及在存在CD40L或抗-CD40mAb的情况下诱导B细胞增殖(Cock等人，免疫学期刊5657(1993))。尽管IL-13的多种活性与IL-4的活性相同，与IL-4不同的是，IL-13对活化T细胞或T细胞克隆体没有生长促进作用(Zurawski等人，EMBO J 122663(1993))。同大多数细胞因子一样，IL-13通过在靶细胞表面上与IL-13受体(“IL-13R”)相互作用表现出某些生物活性。IL-13R和IL-4受体(“IL-4R”)具有共同的组分，其是受体活化作用所需的；然而，IL-13不与用130kD IL-4R转染过的细胞结合(Zurawski等人，如上述)。因此，IL-13R必须含有至少一条其他的配体结合链。细胞因子受体通常包含两条或三条链。对IL-13的一条配体结合链的克隆目前已有报道(Hilton等人，Proc.Natl.Acad.Sci.93497-501)。因此需要确定并克隆IL-13R的任何其他IL-13结合链的序列，以便为多种用途制备IL-13R蛋白质，包括制备治疗试剂及筛查IL-13结合受体的抑制剂和受体信号。本专利技术的概述依据本专利技术，公开了编码白细胞介素-13受体IL-13结合链的多核苷酸，没有限制地包括从鼠科动物和人类受体获得的多核苷酸。在某些实施方案中，本专利技术提供了包含从下列组中选取的核苷酸序列的分离多核苷酸(a)从核苷酸256到核苷酸1404的SEQ ID NO1的核苷酸序列；(b)从核苷酸103到核苷酸1242的SEQ ID NO3的核苷酸序列；(c)由于遗传密码的简并从(a)和(b)中限定的核苷酸序列的序列中变化出来的核苷酸序列；(d)在严格条件下能与(a)和(b)中限定的核苷酸杂交的核苷酸序列；(e)编码(a)和(b)中限定序列的同源物种的核苷酸序列；和(f)(a)和(b)中限定核苷酸序列的等位基因变体。较好地，核苷酸序列编码具有人类IL-13受体生物活性的蛋白质。核苷酸序列可以可操作地与表达控制序列结合。在较好的实施方案中，多核苷酸包括从核苷酸256到核苷酸1404的SEQID NO1的核苷酸序列；从核苷酸319到核苷酸1257的SEQ IDNO1的核苷酸序列；从核苷酸1324到核苷酸1404的SEQ IDNO1的核苷酸序列；从核苷酸103到核苷酸1242的SEQ IDNO3的核苷酸序列；从核苷酸178到核苷酸1125的SEQ IDNO3的核苷酸序列；从核苷酸1189到核苷酸1242的SEQ IDNO3的核苷酸序列。本专利技术还提供了包含编码含有从下列组中选取的氨基酸序列的肽或蛋白质的核苷酸序列的分离多核苷酸(a)氨基酸序列SEQ ID NO2；(b)从氨基酸22到334的氨基酸序列SEQ ID NO2；(c)从氨基酸357到383的氨基酸序列SEQ ID NO2；(d)氨基酸序列SEQ ID NO4；(e)从氨基酸26到341的氨基酸序列SEQ ID NO4；(f)从氨基酸363到380的氨基酸序列SEQ ID NO4；和(g)具有IL-13受体结合链生物活性的(a)和(f)的片段。其他较好的实施方案编码从氨基酸1到331的SEQ ID NO2氨基酸序列和从氨基酸26到331的SEQ ID NO2氨基酸序列。还提供了用多核苷酸转染过的宿主细胞，较好地是哺乳动物细胞。在其他实施方案中，本专利技术提供了制备IL-13bc蛋白质的方法。方法包括(a)在适当的培养介质中培养本专利技术的宿主细胞的培养物；(b)从培养物中提纯人类IL-13bc蛋白质。本专利技术还提供了包含从下列组中选取的氨基酸序列的分离IL-13bc蛋白质(a)氨基酸序列SEQ ID NO2；(b)从氨基酸22到氨基酸334的氨基酸序列SEQ ID NO2；(c)从氨基酸357到氨基酸383的氨基酸序列SEQ ID NO2；(d)氨基酸序列SEQ ID NO4；(e)从氨基酸26到氨基酸341的氨基酸序列SEQ ID NO4；(f)从氨基酸363到氨基酸380的氨基酸序列SEQ ID NO4；和(g)具有IL-13受体结合链生物活性的(a)和(f)的片段。较好地，蛋白质包括氨基酸序列SEQ ID NO2；从氨基酸22到氨基酸334的氨基酸序列SEQ ID NO2；氨基酸序列SEQID NO4；从氨基酸26到氨基酸341的氨基酸序列SEQ ID NO4。在其他较好的实施方案中，限定的氨基酸序列是部分融合蛋白质(带有不是从IL-13bc衍生的其他氨基酸序列)。较好的融合蛋白质包括抗体片段，如Fc片段。特别推荐的较好实施方案包括从氨基酸1到331的氨基酸序列SEQ ID NO2和从氨基酸26到331的氨基酸序列SEQ ID NO2。本专利技术还提供了包含本专利技术的蛋白质和药物可接受的载体的药物组合物。本专利技术进一步提供了包含特异地与本专利技术的蛋白质反应的抗体的组合物。本专利技术还提供了鉴别抑制IL-13与IL-13bc或IL-13受体结合的抑制剂的方法。这些方法包括(a)将IL-13bc蛋白质或其片段与IL-13或起片段结合，所述的结合形成第一结合混合物；(b)测定第一结合混合物中蛋白质与IL-13或片段之间的结合量；(c)将化合物与蛋白质和IL-13或片段结合形成第二结合混合物；(d)测定第二结合混合物中的结合量；(e)将第二结合混合物中的结合量与第一结合混合物中的结合量比较；其中，当第二结合混合物的结合量下降时，化合物能抑制IL-13与IL-13bc蛋白质或IL-13受体的结合。本专利技术还提供了通过这些方法鉴别的IL-13R的抑制剂和含有抑制剂药物组合物。本专利技术还公开了在哺乳动物受试体内抑制IL-13与IL-13bc蛋白质或IL-13受体结合的方法，其包括服用治疗上有效量的含有IL-13bc蛋白质，IL-13bc或IL-13R抑制剂或IL-13bc蛋白质的抗体的组合物。本专利技术还提供了增本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗哺乳动物受试体组织纤维化的方法，所述方法包括服用治疗上有效量的含有蛋白质和药物可接受的载体的药物组合物，其中所述蛋白质包括从下列组中选取的氨基酸序列：（ａ）氨基酸序列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２；（ｂ）从氨基酸２２到３３４的氨基酸 序列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２；（ｃ）从氨基酸３５７到３８３的氨基酸序列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２；（ｄ）氨基酸序列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４；（ｅ）从氨基酸２６到３４１的氨基酸序列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４；（ｆ）从氨基酸３６３到３８０的 氨基酸序列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４；和（ｇ）具有ＩＬ－１３受体结合链生物活性的（ａ）和（ｆ）的片段。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：托马斯A韦恩，蒙妮卡G切艾拉蒙蒂，玛丽柯林斯，戴布拉唐纳德森，洛里菲茨，泰姆林恩尼本，马修J怀特尔斯，克莱夫伍德，
申请(专利权)人：遗传学研究所公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]