具有抗骨质疏松作用的雌激素-生长激素释放肽缀合物制造技术

本发明专利技术涉及雌激素－生长激素释放肽缀合物及其制备方法，该方法包括采用逐步接肽法合成具有促生长激素分泌活性的寡肽；将获得的保护寡肽与雌二醇的１７位β羟基缀合，与１７－β－雌二醇的３位羟基缀合，与雌酮的３位羟基缀合。本发明专利技术进一步涉及本发明专利技术的化合物在制备治疗或预防骨质疏松的药物中的应用。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生长激素释放肽及其合成，雌激素-生长激素释放肽缀合物及其合成方法，以及这些缀合物及其药用盐作为抗骨质疏松药物的应用和含有这些缀合物及其药用盐的药物组合物。促生长激素释放肽是一类人工合成的小分子多肽，可以增强体内生长激素的分泌脉冲，间接或直接促进骨转换(Svensson J，Ohlson C.，etal.，Treatmentwith the oral growth hormone secretagogue MK-677 increases markers of boneformation and bone resorption in obese young males，J.Bone Miner Res，1998，113，1158)。糖皮质激素由于对其它激素所作用的受体和受体后信息传递物质具有调节作用而使其它激素，例如多肽激素增效。这种作用被定义为允许作用(Ingle KT，Endocrinology，1942，31，419)并被用于缀合激素设计，即用于多肽与甾体通过共价键连接的激素的设计(王超、彭师奇、张贤莆、邱学才，甾体一多肽缀合激素的合成及免疫抑制活性，1998，33，111；朱岩、邱学才、王超、彭师奇，氢化可的松可加强京都酚及类似物的针痛效应，药学学报，1993，28，166)。TyrGlyGlyPheAA (II)在式(I)和(II)中，AA为LeuOH，LeuOCH3，LeuNH2，MetOH，MetOCH3，MetNH2，GlyOH，GlyOCH3及GlyNH2。根据本专利技术的第二个方面，提供了通式(III)的雌二醇-17-β-O-AA-Phe-Gly-Gly-Tyr的缀合物，其中AA为LeuOH，LeuOCH3，LeuNH2，MetOH，MetOCH3，MetNH2，GlyOH，GlyOCH3及GlyNH2。根据本专利技术的第三个方面，提供了上述通式(III)的缀合物的合成方法，包括将逐步接肽得到的通式(II)保护中间体的羧端游离，偶联到雌二醇的17-β-羟基上，用HF或氢解法脱保护。根据本专利技术的第四个方面，提供了通式(IV)的雌二醇-17-β-O-丁二酰基-Tyr-Gly-Gly-Phe-AA的缀合物，其中AA为LeuOH，LeuOCH3，LeuNH2，MetOH，MetOCH3，MetNH2，GlyOH，GlyOCH3及GlyNH2。根据本专利技术的第五个方面，提供了通式(IV)的缀合物的合成方法，包括将逐步接肽得到的保护中间体的N端脱保护制备N端游离的保护寡肽中间体，将雌二醇的17-β-羟基与丁二酸酐反应制备丁二酸单酯中间体，将两种中间体偶联，必要时寡肽部分的羧端皂化，最后用HF或氢化法脱保护。根据本专利技术的第六个方面，提供了通式(V)的雌酮-3-氧亚甲羰基-Tyr-Gly-Gly-Phe-AA的缀合物，其中AA为LeuOH，LeuOCH3，LeuNH2，MetOH，MetOCH3，MetNH2，GlyOH，GlyOCH3及GlyNH2。根据本专利技术的第七个方面，提供了通式(V)缀合物的合成方法，包括按逐步接肽法制备的保护寡肽中间体N端脱保护制备N端游离的保护寡肽中间体，将雌酮与溴乙酸乙酯反应制备雌酮-3-氧甲基羧酸中间体，将两种中间体偶联，必要时寡肽部分的羧端皂化，最后用HF或氢化法脱保护。根据本专利技术的第八个方面，提供了通式(VI)的17-β-雌二醇-3-氧亚甲羰基-Tyr-Gly-Gly-Phe-AA缀合物，其中AA为LeuOH，LeuOCH3，LeuNH2，MetOH，MetOCH3，MetNH2，GlyOH，GlyOCH3及GlyNH2。根据本专利技术的第九个方面，提供了通式(VI)的缀合物的合成方法，包括按照本专利技术第七个方面的操作制备雌酮—保护寡肽中间体，必要时寡肽部分的羧端皂化，用硼氢化钠将酮基还原，最后用HF或氢化法脱保护。需要说明的是，在说明书中，Boc代表叔丁氧羰基，Bzl代表苄基，Phe代表苯丙氨酸，Gly代表甘氨酸，Tyr代表酪氨酸，Leu代表亮氨酸，Met代表蛋氨酸，Me代表甲基，Bu代表丁基，Et代表乙基，DCC代表N，N-二环己基碳二亚胺。以下是本专利技术的生长激素释放肽的合成路线BocTyr(Cl2Bzl)GlyGlyPheOH+AA→BocTyr(Cl2Bzl)GlyGlyPheAA或HF其中AA如上所定义。通式(III)的缀合物的合成路线如下 通式(IV)的缀合物的合成路线为 本专利技术通式(V)和(VI)的合成路线如下 在上述合成路线图中，其中AA如上所定义。本专利技术的通式(I)-(VI)的化合物能够形成药学可接受的盐，例如与各种酸，如盐酸和酸性氨基酸，或各种碱，如氢氧化钠和碱性氨基酸形成盐。本专利技术通式(1)-(VI)的化合物还能够以药用组合物的形式使用，该组合物另外含有药学可接受的载体以及其它成分，如着色剂、甜味剂等。载体可以是通常用于制药领域的那些。本专利技术化合物在组合物中的含量例如可以是0.001-10wt％。本专利技术的化合物可以制成固体制剂，如片剂、胶囊、颗粒制剂等，还可制成液体制剂，如口服液等，也可制成注射剂。本专利技术使用已过性成熟期体重为20g左右的雄性昆明种小鼠建立骨质疏松模型，评价了本专利技术的化合物对骨质疏松的预防和治疗作用，结果表明本专利技术的化合物可明显预防和治疗小鼠骨质疏松症。为了解释本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1 HCl·MetOCH3的制备在冰盐浴冷却和搅拌下往20ml甲醇中滴加1.17ml(20.1mmol)氯化亚砜，同时产生大量氯化氢气体。往所得的溶液分次加入1.00g(6.7mmol)Met。反应混合物在冰盐浴下搅拌1小时，然后升温至室温。搅拌60小时后TLC显示原料点消失，减压浓缩除去甲醇，残留物反复用无水乙醚研磨，得到标题化合物1.23g(85％)，为无色固体，mp128～131℃。实施例2 MetNH2的制备1.00g(5.02mmol)HCl·MetOCH3先用2ml甲醇溶解，然后与15mlNH3/CH3OH饱和溶液混合。反应混合物于室温下密闭搅拌30天，期间经常补加NH3/CH3OH饱和溶液。TLC显示原料点消失，减压浓缩，残留物用无水乙醚研磨，得到标题化合物0.71g(95.5％)，为无色固体，mp141～146℃。实施例3 HCl·LeuOCH3的制备1.00g(7.69mmol)Leu用20ml氯化氢/甲醇(6mol/L)溶解，得到的溶液室温搅拌72小时，TLC显示原料点消失。反应混合物减压浓缩，残留物用无水乙醚反复研磨，得到标题化合物1.25g(90％)，为无色固体，mp127～128℃。实施例4 LeuNH2的制备按照实施例2的操作，由1.00g(6.90mmol)LeuOCH3，制得0.76g(85％)标题化合物，为无色固体，mp118～122℃。实施例5 HCl·GlyOCH3的制备按照实施例3的操作，由1.00g(13.33mmol)Gly制得1.09g(93％)标题化合物，为无色固体，mp148～151℃。实施例6 GlyNH2的制备按照实施例2的操作，由1.00g(11.24mmol)GlyOCH本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式（Ⅰ）的ＢｏｃＴｙｒ（Ｃｌ↓［２］Ｂｚｌ）ＧｌｙＧｌｙＰｈｅＡＡ保护寡肽和通式（Ⅱ）的Ｔｙｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－ＡＡ寡肽，其中ＡＡ为ＬｅｕＯＨ，ＬｅｕＯＣＨ↓［３］，ＬｅｕＮＨ↓［２］，ＭｅｔＯＨ，ＭｅｔＯＣＨ↓［３］，ＭｅｔＮＨ↓［２］，ＧｌｙＯＨ，ＧｌｙＯＣＨ↓［３］或ＧｌｙＮＨ↓［２］。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，王超，赵明，崔巍娜，
申请(专利权)人：彭博，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]