高山冰缘植物组织培养与冷诱导分泌蛋白生产的方法技术

一种高山冰缘植物组织培养与冷诱导分泌蛋白生产的方法，包括下述步骤：　　　　（１）采样、拟定候选标准，筛选可生产冷诱导分泌蛋白的高山冰缘植物；　　　　（２）取高山冰缘植物叶片进行组织培养，利用ＧＡ３急速预处理的方法进行脱分化、扩繁、悬浮培养及再分化；　　　　（３）进行高山冰缘植物组织培养变异评价；　　　　（４）利用可控低温、光周期的悬浮摇动培养实施冷诱导；　　　　（５）检测培养液中蛋白的产生；　　　　（６）冷诱导蛋白的分离。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白质工程技术，尤其属于一种。
技术介绍
植物分泌蛋白是指植物细胞分泌到质外体的蛋白，可以在液体摇培时分泌到培养液。一般植物的分泌蛋白包括信号多肽或抗冻蛋白。例如钙调素是一种信号多肽，经国内外10多年的研究已证实钙调素不仅普遍存在于植物细胞外，而且在胞外位点具有促进悬浮培养细胞及其原生质体的增殖和促进二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因的光不依赖性表达等多种重要生物学功能；关于抗冻蛋白及其基因的研究也已有40多年的历史，但实验材料大多集中于鱼类和昆虫，自从1992年Griffith等从冬黑麦质外体中发现可经冷诱导表达的抗冻蛋白以来，黑麦草、胡萝卜的抗冻蛋白相继被发现，并且都是冷诱导表达，都存在与质外体中，属于分泌性蛋白，并且其抗冻活性优于鱼类或昆虫。所以植物冷诱导产生分泌蛋白很有可能具有抗冻功能。由于抗冻蛋白分布的不普遍性，很难从特定的几种植物中找到，并且传统的质外体提取技术难掌握，大大限制了冷诱导分泌的抗冻蛋白的分离。高山冰缘植物是很好的植物抗冻种质库，通过组织培养获得其扩繁的组织材料进而分离内源的抗冻蛋白及其编码基因，这在细胞生物学、遗传学、植物生理学、分子生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：安黎哲，王建辉，
申请(专利权)人：安黎哲，
类型：发明
国别省市：