通过抑制冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)治疗炎性疾病制造技术

技术编号:7351114 阅读:211 留言:0更新日期:2012-05-18 20:11
公开了含有CIRP抑制剂的药物组合物。还描述了治疗患有炎性症状的受试者的方法,该方法包括对所述受试者施用CIRP抑制剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请要求2009年4月13日提交的美国临时申请号61/212,584的优先权。上述申请的全部教导在此引入作为参考。政府资助本专利技术在国立卫生研究院(the National Institutes of Health)授予的第R01 HL 076179号项目款的政府支持下完成。政府拥有本发明的某些权利。专利技术背景炎症是血管组织对有害刺激(例如病原体、受损细胞或刺激物)的复杂生物响应。它是有机体为了去除有害刺激并启动组织康复过程的保护性努力。在不存在炎症的情况下,创伤和感染至多只能够更慢地愈合,而组织的进行性破坏会损害有机体的存活。然而,不加抑制的炎症也能够导致许多疾病。炎症可分为急性或慢性。急性炎症是身体对有害刺激的最初响应,其通过来自血液的血浆和白细胞向受伤组织的移动增加来发生。一系列生物化学事件促发了涉及局部血管系统、免疫系统和受伤组织中的多种细胞的炎性响应并使其成熟。延长的炎症,即慢性炎症,会导致发生炎症处的细胞类型进行性变化,其特征为在炎性过程中组织的破坏和愈合同时发生。虽然近期对于急性炎症患者的治疗已有进步(例如,脓毒症、外伤出血以及内脏缺血再灌注损伤),但是仍有大量病人死于并发的循环性休克和多器官衰竭。休克和多器官衰竭持续作为医疗和外科重症室中的死亡主因,具有难以接受的高致死率。虽然已经对多种疗法和药物进行了研究来预防循环性衰竭并降低死亡率,但还没>有一种是完全成功的。今天现代医学开始承认慢性炎症是导致慢性变性疾病的主要因素。促炎性细胞因子是我们免疫系统的一部分,其可以攻击并杀死具有氧化性化学物质的细胞。如果不进行治疗,炎症可能伤害组织和器官。例如,炎症导致关节炎患者软骨退化并对糖尿病患者的胰脏造成伤害;且其现在被认为在心血管疾病和癌症中发挥作用。目前为止,对于治疗人类的急性和慢性炎性症状只有非常有限的特定治疗方法。从而,对于具有最小副作用的有效治疗炎性症状的新方法存在很大的未满足的医疗需求。专利技术概述本专利技术基于以下发现:对于冷诱导RNA结合蛋白(Cold-Inducible RNA-Binding Protein,CIRP)进行抑制可以减弱炎性响应。更具体的,申请人发现对CIRP的抑制与不进行治疗的对照相比能降低出血性休克动物模型中的天冬氨酸转氨酶(AST)、肝髓过氧物酶(MPO)、乳酸盐、TNF、血清TNF和血清、肺和肝IL-6的水平(图7-8)。另外,对CIRP的抑制降低了出血导致的死亡率(图6)。基于该发现,公开了治疗炎性症状的药物组合物和方法。在一个实施方式中,本专利技术为药物组合物,其包含药学上可接受的载体或稀释剂和CIRP抑制剂。在另一个实施方式中,本专利技术为治疗患有炎性症状的受试者的方法,该方法包括对受试者施用有效量的CIRP抑制剂。在另一个实施方式中,本专利技术为分离的抗体,其特异性结合CIRP(″CIRP抗体″)或其抗原性片段,其中所述抗体或抗原性片段抑制CIRP的一种或多种生物活性。在另一个实施方式中,本专利技术为抑制CIRP活性的方法,该方法包括对有需求的受试者施用有效量的CIRP抑制剂。附图简述图1是人的CIRP氨基酸序列(SEQ ID NO 1)。图2显示了CIRP基因在出血动物模型中的肝、心脏和血液中的过表达与假手术(sham)(不出血)对照进行对比。图3是描述施用重组CIRP(rCIRP)后AST和ALT提高的两幅图。图4显示了施用rCIRP后血液、肝和肠中TNF和HMGB1的增加。图5显示了rCIRP促进和增加释放自巨噬细胞培养物中的细胞因子(TNF、IL-6、HMGB1)的时间进程和效果。图6描述了在出血动物模型中加入抗-CIRP抗体后与未治疗的对照对比存活率增加。图7是一系列描述在出血动物模型中施用抗-CIRP抗体组合物后与未治疗的对照对比血清AST、ALT和乳酸盐降低的图。图8包括了描述在出血动物模型中施用抗-CIRP抗体后与未治疗的对照进行对比抗-CIRP抗体降低血清、肺和肝IL-6的图。专利技术详述申请人惊讶地发现在炎性响应期间,CIRP表达被上调,并被释放至循环系统。申请人还发现一旦CIRP进入血液,其就会作为强效的促炎性介导物或细胞因子并导致组织损伤甚至死亡。本专利技术基于以下发现,即,与未治疗的对照相比,对CIRP的抑制会导致在脓毒症动物模型中的炎性介导物和标志物的水平降低,该炎性介导物和标志物包括但不限于:天冬氨酸转氨酶(AST)、肝髓过氧物酶(MPO)、乳酸盐、TNF、血清TNF和血清IL-6、肺IL-6和肝IL-6。这些降低反映并在某些情况下解释了在炎性疾病和病症的治疗中靶向CIRP的有益效果。此外,这些降低显示了CIRP抑制剂和拮抗剂在治疗这些疾病和病症中的治疗益处。CIRP是一种因温和冷应激(32℃)在培养的细胞中诱导出的哺乳动物蛋白质,优选为人蛋白质。CIRP包括一个N末端RNA结合域和一个C末端甘氨酸富集域。人CIRP氨基酸序列见图1,SEQ ID NO:1(参见Nishiyama等人,The Journal of Cell Biology,Volume 137,1997)。“哺乳动物CIRP”包括具有与天然存在或内源性的相应哺乳动物CIRP相同的氨基酸序列的蛋白(如重组蛋白、合成蛋白(即用合成有机化学产生的蛋白))。该术语还涵盖了CIRP的多态性变异体或等位变异体和其他同种型(如选择性剪接或其他细胞学方法所产生的)以及前述的修饰或未修饰形式(如脂化、糖基化和非糖基化)。这类蛋白可从例如天然产生的哺乳动物CIRP的来源进行回收和分离。CIRP在冷诱导细胞增殖抑制方面发挥不可或缺的作用。在此定义的“CIRP抑制剂”是一种结合CIRP并抑制(例如,减少、阻止、降低、中和)CIRP一种或多种生物活性的试剂(例如,分子、天然或合成核酸或核酸类似物、反义分子、小干扰RNA(siRNA)、蛋白质、肽、抗体、抗原性片段、化合物等等);或一种抑制CIRP基因和/或蛋白质表达或CIRP生物活性释放的试剂。术语“CIRP的生物活性”表示CIRP受体结合、CIRP信号传导、CIRP介导的促炎性细胞因子的释放、CIRP介导的炎症和/或CIRP介导的其它活性。术语″拮抗剂″可以与术语″抑制剂″可互换使用。CIRP抑制剂可以是抗体,其结合并抑制(例如,减少、阻止或中和)CIRP的一种或多种生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.04.13 US 61/212,5841.一种药物组合物,包含:i)药学上可接受的载体或稀释剂;
和ii)CIRP抑制剂。
2.权利要求1的药物组合物,其中所述CIRP抑制剂是特异性
结合CIRP或其抗原性片段的抗体,其中所述抗体或抗原性片段抑制
CIRP的一种或多种生物活性。
3.权利要求2的药物组合物,其中所述CIRP抗体是多克隆抗
体,或其抗原性片段。
4.权利要求2的药物组合物,其中所述CIRP抗体是单克隆抗
体,或其抗原性片段。
5.权利要求2的药物组合物,其中所述CIRP抗体是嵌合抗体、
人源化抗体或人抗体,或其抗原性片段。
6.权利要求2的药物组合物,其中所述CIRP抗体是单链抗体,
或其抗原性片段。
7.权利要求1的药物组合物,其中所述CIRP抑制剂是降低
CIRP的表达的CIRP反义分子。
8.权利要求1的药物组合物,其中所述CIRP抑制剂具有低于
1000道尔顿的分子量。
9.一种治疗患有炎性症状的受试者的方法,该方法包括对受
试者施用有效量的CIRP抑制剂。
10.权利要求9的方法,其中所述CIRP抑制剂是特异性结合
CIRP或其抗原性片段的抗体,其中所述抗体或抗原性片段抑制CIRP
的一种或多种生物活性。
11.权利要求10的方法,其中所述CIRP抗体是多克隆抗体,
或其抗原性片段。
12.权利要求10的方法,其中所述CIRP抗体是单克隆抗体,
或其抗原性片段。
13.权利要求10的方法,其中所述CIRP抗体是嵌合抗体、人
抗体、或人源化抗体,或其抗原性片段。
14.权利要求10的方法,其中所述CIRP抗体是单链抗体。
15.权利要求9的方法,其中所述CIRP抑制剂是阻止CIRP的
表达的CIRP反义分子。
16.权利要求9的方法,其中所述CIRP抑制剂具有低于1000
道尔顿的分子量。
17.权利要求9的方法,其中所述炎性症状是急性炎症发作。
18.权利要求9的方法,其中所述炎性症状选自阑尾炎、消化
性溃疡、胃溃疡和十二指肠溃疡、腹膜炎、胰腺炎、克罗恩氏病、
溃疡性结肠炎、肠梗阻、会厌炎、弛缓不能、胆管炎、胆囊炎、肝
炎、惠普耳氏病、哮喘、变态反应、过敏性休克、免疫复合疾病、
器官缺血-再灌注损伤、器官坏死、花粉热、脓毒症、败血病-感染性
休克、败血病、内毒素性休克、恶病质、高热、嗜曙红细胞肉芽肿、
肉芽肿病、结节病、脓毒性流产、附睾炎、阴道炎、前列腺炎、尿
道炎、支气管炎、气肿、鼻炎、肺炎、矽肺病、肺泡炎、细支气管
炎、咽炎、胸膜炎、窦炎、流行性感冒、呼吸道合胞体病毒感染、
疱疹感染、HIV感染、乙型肝炎病毒感染、丙型肝炎病毒感染、弥
漫性菌血症、登革热、念珠茵病、疟疾、丝虫病、阿米巴病、包虫
囊肿、血管炎、脉管炎、心内膜炎、动脉炎、动脉硬化症、血栓性
静脉炎、心包炎、心肌炎、局部缺血、结节性动脉周围炎、风湿热、
乳糜泄、成人呼吸窘迫综合征、慢性阻...

【专利技术属性】
技术研发人员:王平
申请(专利权)人:范因斯坦医学研究院
类型:发明
国别省市:

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