一种脾多肽提取物、其制备方法及其用途技术

本发明专利技术公开了一种从除人以外的哺乳动物脾脏组织中提取制备的脾多肽提取物，将哺乳动物组织经去脂肪、匀浆、调酸、冻融破碎、调节ｐＨ值沉淀、加热、离心过滤、超滤等步骤制得脾多肽提取物；该药为免疫调节药，能够提高和改善机体免疫功能，可用于原发性和继发性细胞免疫缺陷病（如湿疹、血小板减少、多次感染综合症等）、呼吸道及肺部感染、习惯性感冒、慢性乙型肝炎、流行性腮腺炎、复发性口疮等疾病治疗，可在治疗放化疗引起的白细胞减少症，白血病、再生性障碍贫血、淋巴瘤及其他恶性肿瘤、改善肿瘤患者恶变质、改善术后或重症患者身体虚弱时辅助使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种脾多肽提取物、其制备方法及其用途，具体地说，涉及一种由从除人以外的哺乳动物脾脏组织中经提取分离制备的脾多肽提取物、其制备方法及用途。
技术介绍
众所周知，哺乳动物体内有不少人体所需的各种营养成分及活性成分，进而有不少针对从哺乳动物的心脏、肝脏及肌肉组织中提取活性多肽的报道。而脾脏是哺乳动物的外周免疫器官，也是动物体内代谢最为旺盛的器官之一，由于其中含有丰富的细胞基本营养成分及细胞因子，特别是促进细胞代谢的活性成分如多肽类物质和核酸以及免疫调节因子-寡核苷肽等，因而受到研究者的广泛关注。国外对脾提取物的研究工作较早，目前已有用于化妆品的商品，如crydermine及增强免疫功能的保健品，如spleen P.M.G、IM-Encap、Gold-speen 500等。申请号03133572.1，专利技术名称为复合生物活性胶囊及其制备方法，公开了一种复合生物活性胶囊，选用新生牛为初生十四小时之内的小牛，取其脑、胸腺、肝、脾；选用怀孕二个月左右的绵羊，取其胚胎及胎盘，采用现代生物工程技术，从其中提取脑蛋白水解物、胸腺肽、转移因子、胎盘肽、促肝细胞生成素等有效成份进行科学配伍。该专利技术采用多种原料分别提取的生物活性成份，可根据不同对象按不同配料比例复合成胶囊或片剂。本专利技术复合生物活性胶囊，能调解人体生理机能，提高免疫力，延缓衰老，提高记忆力，抗疲劳，美容养颜，又能治疗和预防肝、脾、肾及心脏血管疾病的发生。《肉类工业》2002年2期的“猪脾多肽的制备工艺研究”公开了猪脾脏的制备工艺，工艺流程为脾脏--＞去脂肪--＞匀浆--＞脱脂--＞酶解--＞终止反应--＞过滤--＞吸附脱色--＞凝胶层析--＞真空干燥--＞成品。具体工艺为取一定量的新鲜猪脾脏，去掉大块的外表脂肪、表皮及皮下筋膜，加1∶1的10℃蒸溜水，用组织捣碎机匀浆，按4∶1的比例加正己烷或乙醚在常温下密闭抽提2h脱脂，分离得到脱脂的脾脏匀浆；将400ml脾匀浆液，置于恒温水浴锅中，调节温度至(50±2)℃，以Ca(OH)2乳液调节溶液至酶最适pH值，加入30g酶，反应一段时间后，以1∶1HCl调pH至中性，同时升温至80℃保持15min，使酶钝化中止反应，沙布过滤，滤液加5％的活性炭吸附脱色，抽滤，过G-15萄聚糖凝胶柱，收集范围的溶液，50℃真空浓缩干燥，得脾脏多肽成品。该工艺采用的是酶解法，通过酶解脾脏中蛋白质来获得多肽，所得多肽成分组成易变动且并非原来天然存在的多肽。目前，困扰人类健康的疾病多是由于机体免疫机能下降造成的，所以应不断研究和开发一些能提高人体免疫能力的药物；以提高和改善机体免疫功能，激活和增强机体非特异性免疫功能，提高人体的抗疾病能力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种脾多肽提取物，该产品为含有从除人以外的哺乳动物脾脏组织中提取制备的脾多肽提取物。本专利技术的另一目的在于提供脾多肽提取物的制备方法。本专利技术的再一目的是提供脾多肽提取物药物在制备治疗原发性和继发性细胞免疫缺陷病(如湿疹、血小板减少、多次感染综合症等)、呼吸道及肺部感染、习惯性感冒、慢性乙型肝炎、流行性腮腺炎、复发性口疮等疾病治疗药物方面的用途。本专利技术的再一目的是提供脾多肽提取物药物在制备治疗放化疗引起的白细胞减少症，白血病、再生性障碍贫血、淋巴瘤及其他恶性肿瘤、改善肿瘤患者恶变质、改善术后或重症患者身体虚弱时辅助使用。本专利技术所述的脾多肽提取物，为从除人以外的哺乳动物脾脏组织中提取而成的活性小分子多肽，分子量小于10000道尔顿。其中，优选的分子量小于8000道尔顿，最优选的分子量小于6000道尔顿。本专利技术所述的哺乳动物可为猪、狗、牛、羊、鹿、马或兔等。从猪、狗、牛、羊、鹿、马或兔等新鲜健康脾脏组织中均可提取本专利技术所述的活性多肽。从生产成本、生产工艺、产品质量稳定性、临床疗效等因素考虑，上述哺乳动物脑组织优选小牛脾脏组织作为脾多肽提取物的生产原料。本专利技术所述的脾多肽提取物通过去脂肪、匀浆、调酸、冻融破碎、调节pH值沉淀、加热、离心过滤、超滤等步骤制得脾多肽提取物，其分子量可通过选用截留分子量为10000或10000以下不同截留分子量的超滤膜来控制。本专利技术所述的脾多肽提取物的制备方法，包括如下步骤A)取经过预处理的哺乳动物脾脏，加水匀浆，调节pH值，反复冻融；B)经1-3次离心、过滤、调节pH值，得清液；C)冷冻融化后再过滤，得脾多肽提取物。其中，所述的预处理是将新鲜的健康脾脏的杂质、脂肪、表皮及皮下筋膜预先处理掉。匀浆后调pH值至3.0～5.0，冻融次数为1～9次，通过反复冻融使细胞破碎，使细胞内活性多肽充分释放。离心条件为3000～4000转/分，离心时间为15～30分钟，过滤可纸浆过滤或本领域技术人员常用的过滤手段，以起到预过滤、预处理的作用。离心过滤后，调pH值为6.0～7.5。为了达到更好的离心效果，在一次离心过滤后，还可进行一次加热冷却，再离心过滤。具体地说，本专利技术所述的脾多肽提取物的制备方法，包括如下步骤A)取新鲜健康脾脏，剔除杂质及脂肪组织，加0.5～2.5倍脾脏重量的注射用水，匀浆，调节pH值3.0～5.0，反复冻融1～9次；B)最后一次融化后的匀浆液离心，离心条件为3000～4000转/分，离心时间为15～30分钟，过滤，上清液调节pH值6.0～7.5，加热冷却后离心，离心条件为3000～4000转/分，离心时间为15～30分钟，过滤，得清液； C)冷冻后融化，过滤，清液用超滤膜超滤1～2次，超滤液为脾多肽提取物。所述的冻融为在-15℃以下冷冻，冻实后在10～40℃下融化。B)步骤中，离心过滤后，加热至50℃～90℃，加热时间为15～30分钟；冷却至10～40℃。更为优选的，本专利技术所述的脾多肽提取物的制备方法，包括如下步骤A)取新鲜健康脾脏，剔除杂质及脂肪组织，加1～2倍脾脏重量注射用水，匀浆，调节pH值3.8～4.2，在-15℃以下冷冻，冻实后在10～40℃下融化，重复冻融2～4次；B)最后一次融化后的匀浆液离心，离心条件为3500～4000转/分，离心时间为15～20分钟，过滤，上清液调节pH值6.5～7.0，加热65℃～80℃，加热时间为15～20分钟，冷却后离心，离心条件为3500～4000转/分，离心时间为15～20分钟，过滤，得清液；C)-15℃以下冷冻，冻实后在10～40℃下融化，过滤，清液用截留分子量10000以下超滤膜超滤1～2次，得超滤液，即为脾多肽提取物。对清液进行超滤时，可采用截留分子量为5000～10000的超滤膜或5000以下的超滤膜超滤，为脾多肽提取物中的活性多肽分子量的控制步骤。比如，使用截留分子量1000、3000、5000、6000、8000或10000的超滤膜，优选使用截留分子量为5000的超滤膜超滤。使用的超滤膜为市售产品，其生产商应为行业认可的生产单位，使用的滤膜型号与尺寸可根据具体的生产量、选用的超滤器尺寸来确定。当然，为了进一步获取所需分子量段的脾多肽提取物，可以用不同的超滤膜进行截取，取超滤液或截留液，这样即可获得分子量为1000-10000，1000-8000，1000-6000，1000-5000或3000-8000等等所需的脾多肽提取物。为使本专利技术生产工艺、产品质量稳定，匀浆后采取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脾多肽提取物，其特征在于，为从除人以外的哺乳动物脾脏组织中提取而成的活性小分子多肽，分子量小于１００００道尔顿。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：王建辉，
申请(专利权)人：菲尔斯杜克制药通化有限公司，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]