用于治疗和预防毒性及病原体介导的疾病的新的免疫粘附素制造技术

本发明专利技术通过例示抗炭疽病和常见感冒之类病原体的免疫粘附素，描述了对毒素和病原体有抵抗活性的免疫粘附素。事实上，可以采用免疫粘附素受体配体原理来对抗病原体、毒物或毒素，包括例如天然和合成的代谢毒物。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫粘附素，它们从植物中的制备以及它们在治疗和预防毒性(toxicity)与病原体介导的疾病(ailments)，如炭疽病和常见感冒中的用途。
技术介绍
常见感冒通常是相当轻的疾病。但是，严重的感冒并发症，如中耳炎、鼻窦炎和哮喘的恶化都是常见的。人鼻病毒(HRV)导致50％的成人感冒和25％的儿童感冒(Bella and Rossmann，J Struct Biol.12869-74，1999和Sperber and Hayden，Antimicrob Agents Chemother.32409-19，1988)。每年社会上的开支达数十亿元。这些小的无包膜RNA病毒是小核糖核酸病毒的一个亚型(Rueckert，Virology，pp.507-548，eds.Fields，et al.，Raven Press，Ltd.NeW York，1990)。对小核糖核酸病毒进行X-光衍射晶体分析，鉴定到了直径为300_(1_＝0.1nm)、二十面体对称的衣壳，该衣壳由各60个拷贝的病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3构成(Rossmann，Nature 317145-153，1985)。HRV上的表面凹陷或“峡谷(canyon)”认为是受体结合位点(Colonno，et al.，Proc Natl Acad Sci USA.855449-5443，1985；Rossmann，et al，Nature317145-153，1985)。在鉴定到的102个HRV血清亚型中，有91个(已知为主要的类型)以称作细胞间粘附分子(ICAM-1)(Greve，etal.，Cell 56839-847，1989；Staunton，et al.，Cell 56849-853，1989)的细胞表面糖蛋白作为受体。其结合位点位于第一个N-端结构域(Greve，etal.，J Virol.656015-6023，1991；Staunton，et al.，Cell 61243-254，1990)中。ICAM-1是具有5个细胞外结构域、1个疏水性跨膜结构域和一个短的细胞质结构域的膜蛋白。免疫和炎症应答中重要的许多细胞都表达ICAM-1，其他细胞也可诱导表达ICAM-1(Casasnovas，et al.，ProcNatl Acad Sci USA.954134-9，1998)。ICAM-1是白细胞整合素LFA-1和Mac-1的配体(Springer，Cell.76301-14，1994；Staunton et al.，Cell61243-254，1990)。在细胞表面上，跨膜结构域的缔合使ICAM-1主要以二聚体形式存在(Miller，et al.，J Exp Med.1821231-41，1995；Reilly，et al，J Immunol.155529-32，1995)。由5个细胞外结构域组成的重组可溶形式的ICAM-1(sICAM-1)能够在体外有效阻断鼻病毒对人细胞的感染(Greve，et al.，J Virol.656015-6023，1991；Marlin，et al.，Nature.34470-2，1990)。评价sICAM-1对各种实验室病毒株和野生分离物的活性，结果表明主要的HRV株都对sICAM-1敏感。不使用ICAM作为受体的次要病毒株不受sICAM-1的影响(Crump et al.，Antiviral Chem Chemother.4323-327，1993；Ohlin，et al.，Antimicrob Agents Chemother)。可溶性ICAM-1的体外抗病毒活性似乎由多种机制介导。这些机制包括和细胞表面ICAM-1竞争结合位点、干扰病毒侵入或脱衣壳以及通过成熟前释放病毒RNA、形成空的衣壳而直接灭活(Arruda et al.，Antimicrob Agents Chemother.361186-1191，1192；Greve et al.，J Virol.656015-6023，1991；Marlin et al.，Nature 34470-2，1990；Martin et al.，JVirol.673561-8，1993)。HRV的宿主范围仅限于灵长类动物。最近研究表明可溶性ICAM-1能够有效预防鼻病毒感染黑猩猩(Huguenel，et al.，Am J RespirCrit Care Med.1551206-10，1997)。虽然黑猩猩不表现出临床症状，但通过测定血清转化和病毒释放可以证实感染的发生。鼻内喷单剂量10mg的可溶性ICAM-1，和HRV同时施用或施用病毒10分钟后施用，能够有效预防HRV-16的感染，利用可溶性ICAM-1对人进行临床治疗，结果表明可溶性ICAM-1能够降低实验性HRV感冒的严重程度(Turner et al.，JAMA2811797-804，1999)。在该临床试验中，共有196个病人接受了各种制剂形式的可溶性ICAM-1或安慰剂。一些病人在接种HRV39之前7个小时开始接受可溶性ICAM-1或安慰剂，其他病人在病毒接种后12小时开始接受可溶性ICAM-1或安慰剂。药物以鼻内吸入溶液或粉末形式施用，持续7天，每天6个剂量(共4.4mg/天)。在该项研究中，通过病毒分离或血清转化进行测定，发现可溶性ICAM-1不能预防感染(安慰剂治疗组感染率92％，可溶性ICAM-1治疗组感染率85％)。但是，可溶性ICAM-1对疾病的所有指标有影响。总的症状评分降低了45％，患有临床感冒的病人比例降低了23％，鼻黏膜重量减轻了56％。粉末或溶液制剂施用组间、接种前或接种后施用组间没有显著差异。可溶性ICAM-1的治疗不具有任何副作用，也不经鼻黏膜吸收。并且，对抗-HRV型-特异性抗体的形成也没有抑制作用。如上文讨论，ICAM-1在细胞膜上是二聚体。在J Virol 673561-8中Martin等首次提出多聚可溶性ICAM和HRV的多价结合会导致更高的有效亲和性，又称作亲和力，进而促进病毒的脱衣壳。它们构成多价的ICAM-1/免疫球蛋白分子。和单价可溶性ICAM-1相比，多价的ICAM-1/免疫球蛋白分子能够更有效地中和HRV，从而提高治疗上的可用性。这些ICAM-1/免疫球蛋白分子包括和IgA1(IC1-2D/IgA)、IgM(IC1-2D/IgM)和IgG1(IC1-2D/IgG)重链铰链区和恒定区相融合的第1个和第2个ICAM-1氨基端结构域。另外，5个细胞外结构域和IgA1(IC1-5D/IgA)相融合。在HRV结合、感染性和构象分析中，将这些ICAM-1/免疫球蛋白分子和具有2个(sIC1-2D)和5个(sIC1-5D)结构域的可溶性ICAM-1相比较。ICAM-1/IgA免疫球蛋白(IC1-5/IgA)比可溶性ICAM-1有效200倍，ICAM-1/IgM免疫球蛋白(IC1-2D/IgM)和ICAM-1/IgG免疫球蛋白分子(IC1-2D/IgG)比可溶性ICAM-1有效25和10倍。这些分子能够非常有效地抑制鼻病毒和细胞的结合，破坏病毒衣壳的构象。ICAM-1/IgA免疫球蛋白分子在纳摩尔级的浓度范围内有效。将IC-1-2D/IgA和本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含嵌合毒素受体蛋白的免疫粘附素，所述的毒素受体蛋白包含：　　　　和免疫球蛋白重链的至少一部分相连的毒素受体蛋白；以及　　　　和所述嵌合毒素受体蛋白相缔合的Ｊ链和分泌组分。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：詹姆斯威廉拉里克，基思林恩威科夫，
申请(专利权)人：行星生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]