单价结合CD40L的组合物和应用方法技术

本发明专利技术涉及单价结合ＣＤ４０Ｌ的抗体多肽。单价结合ＣＤ４０Ｌ的抗体多肽可以抑制ＣＤ４０Ｌ活性，同时避免使用能够二价或多价结合ＣＤ４０Ｌ的抗体时可能发生的潜在的不理想的作用。一方面，单价抗－ＣＤ４０Ｌ抗体多肽由单一免疫球蛋白可变结构域组成或者包括其，其特异性的结合并且拮抗ＣＤ４０Ｌ的活性，优选地基本上不激动ＣＤ４０和／或ＣＤ４０Ｌ活性。另一方面，所述单价抗－ＣＤ４０Ｌ抗体多肽是人抗体多肽。本发明专利技术还包括在个体中拮抗ＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌ相互作用的方法和治疗包括ＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌ相互作用的的疾病或紊乱的方法，所述方法包括给所述个体施用单价抗－ＣＤ４０Ｌ抗体多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
CD40是一种50kD的细胞表面糖蛋白分子，其在成熟和未成熟的B细胞、巨噬细胞、卵泡树突细胞、胸腺上皮细胞、正常的基底上皮细胞和一些肿瘤源性的细胞系的表面上表达。CD40分子是TNF受体家族的一员，并且具有重要的信号传导功能，其在许多细胞类型中引起各种下游作用。早期研究表明，在B细胞表面的CD40与抗体的交联导致B细胞的增殖和活化。在IL-4存在下与CD40交联的抗体诱导体外增殖和种类转换，通过LFA-1的B细胞聚集(Gordon等.，1988，J.Immunol.1401425)，和许多细胞内物质的丝氨酸/苏氨酸以及酪氨酸磷酸化(Gordon等.，1988，同前所述；Uckun等.，1991，J.Biol.Chem.26617478)。抗-CD40单克隆抗体还引发B细胞应答诸如PMA(Gordon等.，1987，Eur.J.Immunol.171535)和抗-CD20抗体(Clark & Ledbetter，1986，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.834494)的试剂而增殖。CD40的受体同源性和表明CD40在B细胞活化中的重要作用的抗体交联性研究促进了对天然配体的寻找。发现Jurkat T细胞系的突变体组成性地激活人B细胞分泌免疫球蛋白(Yellin等.，1991，J.Immunol.1473389-3395)。产生了一种叫作5c8的单克隆抗体，其特异性地与所述突变体系反应，但是不与亲本Jurkat细胞系反应。5c8抗体免疫沉淀一种30kD(更准确地，29.3kD，261个氨基酸)细胞表面多肽，并且发现其特异性地抑制突变细胞系的B细胞辅助功能。(Lederman等.，1992，J.Exp.Med.，1751091-1101；Lederman等.，1992，J.Immunol.1493817-3826；Lederman等.，1993，Curr.Opin.Immunol.5439.444；)。5c8抗体的30kD多肽配体叫作T-BAM，T-B-细胞活化分子。第二系的研究应用分子克隆技术鉴定特异性结合CD40分子的多肽。在CD40结合检测中鉴定了CD40特异配体的cDNA克隆，并且备选地叫作CD40配体(CD40L)、gp39、CD154或TRAP(Graf等.，1992，Eur.J.Immunol.223191-3194；Armitage等.，1992，Nature35780-82；和Aruffo等.，1993，Cell 72291-300)。后来，发现CD40L克隆具有同T-BAM相同的结构(Covey等.，1994，Mol.Immunol.31471-484)。在核酸和氨基酸水平上，人CD40L蛋白分别表现出与从小鼠EL4胸腺瘤细胞分离的相似蛋白有82.8％和77.4％的相同性。这些蛋白都是在休眠B细胞上表达的CD40细胞表面抗原的配体。CD40L还被描述为IMD3，一种参与超-IgM免疫缺陷综合征的蛋白。编码CD40L的人类基因定位在染色体Xq26.3-q27上。所述基因含有5个外显子。已经发现，集中在CD40L细胞外结构域有限区域的缺失、点突变和移码突变是一种罕见的X-连锁的免疫缺陷综合征(超-IgM免疫缺陷综合征，HIGM1)的基础，所述免疫缺陷综合征的特征在于周期性发生的细菌感染，非常低或不存在的IgG、IgA和IgE，和正常到增加的IgM和IgD血清水平。发现有因果关系的突变由成簇的缺失组成，所述缺失由具有外显子跳跃的剪接-供体突变、具有使用隐藏的剪接位点的剪接-受体突变、和产生新的剪接位点的缺失/插入事件而引起。CD40L在活化的而不是休眠的CD4+T细胞上表达，并且发现其在体液免疫应答中起着特别重要的作用，其与B细胞增殖、抗体和细胞因子产生、和细胞生存能力有关。在体内，CD40L的缺失或突变在小鼠和在人体中引起严重的免疫缺陷，其特征在于细胞介导的免疫性中的血内丙种球蛋白过少和T细胞不足(Chess，C.，2001，在Therapeutic Immunology，第二版，Austen，K.F.，Burakoff，S.，Rosen，F.和Strom，T.，eds.，BlackwellSciences，第441-456页)。感染了HIV1的人CD4+T细胞，不表达CD40L，所述HIV1引起严重的细胞免疫性功能紊乱，但是自相矛盾地导致B细胞的强烈的多克隆活化。已表明，通过活化的T细胞进行CD40L的基因和细胞表面表达在患有通常可变的免疫缺陷症(common variableimmunodeficiency，CVI)的患者亚群中受到了抑制。因此，通过CD40的低效率信号传导可以负责，至少部分地负责这些患者中B细胞分化的失败。例如，CD40L结合CD40的功能性结果包括，a)从由Fas或IgM交联诱导的细胞程序性死亡挽救B细胞，b)诱导共-刺激因子分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)，其在活化的T细胞表面与CD28和CD152(CTLA-4)相互作用；c)增加其它细胞表面活化分子的表达，包括CD23、CD54、CD95和淋巴毒素-a；和d)诱导免疫球蛋白种类转换(参见，Chess，如前所述，和本文所引用的参考文献25，44和47-60)。与CD40结合的CD40L还增加了树突细胞的抗原递呈功能，诱导维持高水平的II类MHC抗原和附属分子包括CD58(LFA-3)的增量调控。在外周血单核细胞中，CD40L诱导细胞因子的产生和杀肿瘤活性。CD40L还共刺激活化的T细胞的增殖，并且所述共刺激伴随着IFN-γ、TNF-α和IL2的产生。CD40L在小鼠T辅助细胞和CD4+T细胞上的表达受到IFN-γ的抑制，并且在2型T辅助细胞上受到TGF-β的抑制。CD40L通过培养的Hodgkin和Reed-Sternberg细胞而增量调控CD54的表达。增加的CD54表面表达伴随着表面结合的CD54的增加的脱落(shedding)。还表明CD40L在诱导耐受性中是重要的——受到CD40L增量调控的CD80和CD86与CD28相互作用以提供T细胞的基本的共刺激，其与T细胞受体的活化相呼应，这导致T细胞的完全活化。在不存在CD28的CD80和CD86-引发的活化时，无反应力或耐受性作为抗原引发的结果而发生(Linsley&Ledbetter，1993，Ann.Rev.Immunol.11191-212；Jenkins等.，1993，Curr Opin.Immunol.5361-367；和Boussiotis等.，1996，Immunol.Rev.1535-26)。CD40L/CD40途径已经参与CD4+T细胞对CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTSs)的体内致敏(priming)。注意到，在活化的CD4+T细胞表面上表达的CD40L与在树突细胞上表达的CD40相互作用，诱导树突细胞表达更多的MHC，并且通过CD40的信号可以取代在引发CD8+CTL应答中对于CD4+T辅助细胞的需要。CD40L的阻断抑制CTL引发，这强调了CD40L/CD40相互作用在由辅助T细胞引发CTL中的重要作用(Ridge等.，1998，Nature 39347本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在个体中拮抗ＣＤ４０或ＣＤ４０Ｌ活性的方法，所述方法包括给所述个体施用单价结合ＣＤ４０Ｌ（ｇｐ３９）的抗体多肽，其中所述多肽拮抗ＣＤ４０或ＣＤ４０Ｌ或者两者的活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：史蒂芬格兰特，刘海群，凯文莫尔德，
申请(专利权)人：多曼蒂斯有限公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]