一种制备知母提取物的方法，其特征在于，该方法包括步骤： （ａ）用６－１４倍知母药材重量的水性溶剂回流提取，获得提取液，所述的水性溶剂是０－６０％重量的乙醇水溶液或水； （ｂ）过滤去除固体，浓缩滤液得到药液； （ｃ）调节乙醇浓度至７５％±１５％，放置１０－２４小时沉淀，分层，过滤获得滤液； （ｄ）从滤液中回收乙醇，并获得浓缩药液，向药液中加水稀释至２－５０倍药材重量，得稀释药液； （ｅ）将药液ｐＨ调至２－８； （ｆ）将所得药液过树脂吸附柱，所述树脂选自大孔树脂或阴离子交换树脂； （ｇ）用水洗涤柱； （ｈ）用ｐＨ１０－１４的碱性溶液洗脱，获得洗脱液； （ｉ）将洗脱液ｐＨ调至２－８，过滤获得液态知母提取物。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药有效部位的提取工艺领域，具体地涉及知母的总酚提取物的提取和制备方法。本专利技术还涉及含知母总酚提取物的组合物。
技术介绍
知母是百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloides)的根茎，味苦甘，性寒，入肺、胃、肾经，具有清热泻火，生津润燥等功效。是我国传统治疗糖尿病中药。已有报道表明，知母具有抗病原微生物、解热、抗血小板聚集、降血糖、磷酸酯酶抑制、抗炎和降低转胺酶的作用(知母的化学成分及药理作用研究进展，杨丽蓉等，国外医学中医中药分册2002年第24卷第4期，pp.207-210)。该文献主要综述了知母中皂甙的作用，并将降糖的主要部位归功于芒果苷及其糖苷。其它人也研究了知母的降血糖作用，将其归功于知母中的萜类、肽类、氨基酸、黄酮、聚糖、多糖、皂甙等(中草药，1996年第27卷第10期，pp.605-606，中国生化药物杂志，2003年第24卷第2期，pp.81-82)。还公开了用于提取知母皂甙的方法，用乙醇和大孔树脂回流洗涤(中国实验方剂学杂志，2001年2月，Vol.7，No.1，pp.9-11)。虽然对于知母中各种降糖作用的成分已有多种不同报道，但是究竟其中什么成分是主要的降糖部位并没有得到确认。也没有试验将多个提取部位与水煎液的降糖作用相比较，得到知母降糖主要有效部位的报道。对于提取知母总酚的方法和对其用途也没有研究报道。因此，本领域迫切开发基于知母中降血糖的有效部位的产品和工艺。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种制备知母总酚提取物的方法，其中通过水性溶剂回流提取，醇沉，柱层析，洗脱，过滤获得有效部位。该总酚提取物可有效降血糖。本专利技术的另一个目的是提供知母总酚提取物及含知母总酚提取物的组合物。在本专利技术的一个方面，提供了一种制备知母提取物的方法，其特征在于，该方法包括步骤(a)用6-14倍知母药材重量的水性溶剂回流提取，获得提取液，所述的水性溶剂是0-60％重量的乙醇水溶液或水；(b)过滤去除固体，浓缩滤液得到药液；(c)调节乙醇浓度至75％±15％，放置10-24小时沉淀，分层，过滤获得滤液；(d)从滤液中回收乙醇，并获得浓缩药液，向药液中加水稀释至2-50倍药材重量，得稀释药液；(e)将药液pH调至2-8；(f)将所得药液过树脂吸附柱，所述树脂选自大孔树脂和阴离子交换树脂；(g)用水洗涤柱；(h)用pH10-14的碱性溶液洗脱，获得洗脱液；(i)将洗脱液pH调至2-8，过滤获得液态知母提取物。在该方面的一个实施例中，步骤(a)中的水性溶剂的用量优选是药材重量的8-12倍，最优选是10倍；水性溶液优选是水。在本专利技术的另一个实施例中，该步骤(a)的回流提取分1-4次进行，每次回流提取1-5小时，然后合并提取液。在本专利技术的另一个实施例中，该方法还包括步骤(j)水浴蒸干溶液，然后在50-100℃烘干，获得固态的知母提取物。在本专利技术的另一个实施例中，该步骤(e)中优选将pH调至5±1，最优选是调至5。在本专利技术的另一个实施例中，该步骤(f)中的树脂选自中-弱极性大孔吸附树脂，例如或强碱性阴离子交换树脂，其用量为药材重量的0.5-5倍。在本专利技术的另一个实施例中，在该步骤(i)中，优选将pH调至5±1，最优选是5，且步骤(h)中碱性溶液为NaOH溶液、KOH、NaCO3、K2CO3溶液或其混合溶液，优选用0.5％NaOH溶液。本专利技术的第二个方面提供了一种知母提取物，其特征在于，该组合物中总酚提取物浓度为50％-95％重量。在本专利技术该方面的一个实施例中，该提取物是用本专利技术第一方面所述的方法制备的。在本专利技术的第三个方面，提供了一种降血糖的药物组合物，它含有1-99％本专利技术的知母提取物和1-99％药学上可接受的载体。在本专利技术的第四个方面，提供了本专利技术的知母提取物用于制备降血糖的药物的用途。具体实施例方式本专利技术经过研究发现，知母中的酚类物质是其主要的降血糖有效成分，在此基础上开发了有效提取知母总酚提取物的方法，从而完成了本专利技术。知母是常规的中药材，可将其切成饮片或研磨成粗粉使用。该药材可从各知母产地或中药商店购得，例如安徽毫州药材市场、苏州天灵中药饮片厂等。或可使用其它形式，例如洗净切成条或粉碎成粗颗粒形式。本专利技术的知母提取方法采用水性溶剂作为提取试剂，与常规的乙醇粗浸取上清液不同，与其它的氯仿提取法也不同，而且其有效成分在种类上有本质的差异。步骤(c)中使用的是常规的乙醇沉淀步骤，分层后用常规的滤纸等过滤得到滤液，其中醇浓度大约为60-90％；本专利技术中步骤(d)中的回收乙醇步骤，使得药液去除乙醇，从而能吸附在大孔树脂上有效分离所需的组分。回收是通过常规方法进行的，例如蒸馏等。本专利技术的柱层析使用各种常规的大孔树脂吸附柱，可采用各种医药级大孔吸附树脂。常用的大孔树脂为中-弱极性。代表性的树脂例子包括D101，AB-8，LSA-10，LSA-7，XDA-1。优选树脂购自西安蓝深LSA-10。在使用前可先用水平衡。上样，洗涤，洗脱速度不受限制，但优选每公斤树脂洗脱速度在10-300ml/分钟之间，最优选是60ml/min。本专利技术(i)中所使用的过滤装置可以是各种常规过滤装置。例如滤纸真空吸滤，多孔树脂，超滤膜，分子筛，填充柱等。本专利技术组合物中总酚提取物含量为50％以上(如50-95％，较佳地为60-90％)，有效部位得率为0.5％以上(基于药材总重量)(即得率为提取物与药材投入的百分比，得率0.5％即1公斤知母药材得到5克总酚提取物)。经紫外分光光度法或比色法检测，提取物中有效部位的含量在50％以上。同时，由于操作步骤简单，没有制备TLC，电泳等昂贵步骤，可用于大批量工业生产。本专利技术获得的有效部位主要是总酚提取物，具有降血糖、降低链脲菌素或肾上腺素所致高血糖等作用。本专利技术获得的主要部位毒性低，可以高剂量使用而无副作用。由于本专利技术所获得的提取物是酚提取物，因此可以简单的用分光光度计，通过紫外分光光度法或比色法在660nm的波长下检测其有效部位的浓度。本专利技术的知母提取物可直接使用，或与药物学上可接受的载体和添加剂一起，制成药物组合物。例如添加甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂，制备口服给药的片剂、锭剂、水或油悬液、可分散性粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂。片剂含有与适用于制造片剂的无毒的可接受的赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂及崩解剂，例如褐藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶或阿拉伯胶；和润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可无糖衣或用已知技术包衣，来延迟在胃肠道内的解体和吸收，从而在较长时间内提供持续作用。例如，可施用延时物质，如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。口服使用的制剂还可制成硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性固态稀释剂，如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或制成软明胶胶囊，其中活性成分和水或油性介质，例如花生油、液态石蜡或橄榄油混合。本专利技术的药物组合物中有效成分的含量范围是5-20mg/kg/天，可由有经验的医师根据临床需要确定给药途径和剂量。本专利技术的药物组合物还可含有其他降血糖成分，例如目前可得的常规降糖药等或其它中药制剂。本专利技术的药物组合物可以用各种途径施用，例如口服、注射、透皮吸收，优选是口服。专利技术效果使本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽华，徐强，茅彩萍，
申请(专利权)人：广州中一药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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