本发明专利技术公开了一种麦冬多糖ＭＤＧ－１硫酸化衍生物，具有式（Ⅰ）所示结构。该麦冬多糖ＭＤＧ－１硫酸化衍生物的抗心肌缺血活性有增强的趋势，取代度为０．０３－０．０８时药理活性最强。另外，本发明专利技术还公开了该麦冬多糖ＭＤＧ－１硫酸化衍生物的制备方法及其在制备抗心肌缺血药物中的应用。式（Ⅰ）中ｎ≈６，Ｒ＝Ｈ或－ＳＯ↓［３］Ｎａ，－ＳＯ↓［３］Ｎａ的取代度为０．０３－０．１。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及麦冬多糖MDG-1衍生物，尤其涉及麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物；另外，本专利技术还涉及麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物的制备方法及其用途。
技术介绍
养阴类中药具有生津润燥、滋阴养液等功效，以治疗阴虚证为主，它们的毒性一般较小，作用比较温和，以滋补作用为主，对提高人体免疫力，防病治病具有重要的意义。随着人们对多糖药理作用的认识，多糖的研究也愈来愈受到重视，具有养阴作用的中药常含有大量的多糖，它们的生理活性作用分别体现在免疫调节作用、抗肿瘤作用、降血糖、降血脂作用、抗氧化、抗衰老、心血管系统作用、保肝作用、抗病毒作用、抗疲劳、耐缺氧、抗纤维化、抗溃疡作用等各方面。在对麦冬中多糖、黄酮、皂苷、氨基酸等大类成分进行筛选中发现分子量在10 000以下的麦冬多糖可明显增加小鼠耐缺氧能力和心肌营养血流量，能显著增加豚鼠离体心脏冠脉流量，显著抑制犬冠扎引起的心电图ST段抬高及CK、CK-MB的增加，同时有减小缺血心室肌重占总心室肌重的比例的趋势。口服、腹腔注射均能对抗异丙肾上腺素引起的心肌细胞坏死。证实了相对分子质量在10000以下的麦冬多糖是抗心肌缺血作用的有效部位之一。中国专利技术专利CN1227013C(授权公告日2002年11月16日)首次公开了植物多糖在抗心肌缺血方面的作用。在上述基础上，我们应用超滤、纳滤技术对10 000分质量以下的麦冬多糖按分子量进行分级，以为指标进行有效部位的筛选，得到麦冬多糖MDG-1，经凝胶过滤法检定为单一对称峰形，证明为均一组分。经糖组分分析，红外吸收光谱、核磁共振光谱分析及甲基化反应确定MDG-1为β-D-果聚糖，以2→1连接的呋喃型果糖为主，平均每2.8个主链残基上有一个Fruf(2→6)Fruf(2→分支)。该多糖的还原端可能与α-D-Glc相连，其峰尖分子量为5000(中国专利技术专利CN1257918C，授权公告日2006年05月31日)。麦冬多糖MDG-1可以使缺血再灌的心脏收缩幅度和冠脉流量较快地恢复，并可抑制心率加快，还可降低缺血后血浆中乳酸脱氢酶的释放。说明MDG-1对缺血再灌的心肌细胞具有保护作用。其机制可能有以下几个方面①抑制心肌缺血造成的自由基生成增加和清除氧自由基，保护心肌细胞膜的作用.中成药，2004，26(10)832-837.]。②增加心肌营养血流量.中国实验方剂学杂志，2003，9(1)22-24.]，使缺血的心肌较快恢复供血。阐明了麦冬多糖MDG-1为麦冬抗心肌缺血的物质基础之一。多糖经硫酸酯化后富含SO42-，易与蛋白质的特定结构域结合，由此改变其构象并影响其功能。随着组成多糖的单糖排列顺序、分子量大小、硫酸酯化部位及硫酸酯化程度不同，可在抗病毒、抗凝血、抗肿瘤等方面发挥特殊作用。硫酸基团是抗病毒活性的一个先决条件，如葡聚糖本身不具有抗病毒活性，但硫酸葡聚糖则具有抗HIV活性。如香菇多糖硫酸化后形成香菇多糖硫酸酯，其抗H IV的活性增强。现有技术中尚无麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物、其制备方法及其用途的文献报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题之一是对麦冬多糖MDG-1进行结构改造，提出一种具有更高抗心肌缺血活性的麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物。本专利技术所要解决的技术问题之二是提出麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物的制备方法。本专利技术所要解决的技术问题之三是提出麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物的用途。本专利技术为解决上述技术问题之一而提出的麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物，具有式(I)所示结构 式(I)式(I)中n≈6，R＝H或-SO3Na，-SO3Na的取代度为0.03-0.1。式(I)所示的麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物通过如下步骤制备而成在0℃至室温下，将麦冬多糖MDG-1悬浮于有机溶剂中，加入H2SO4和二环己基碳二亚胺作为硫酸化试剂，反应生成麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物，其中麦冬多糖MDG-1与硫酸的摩尔比为1∶2-8，麦冬多糖MDG-1与二环己基碳二亚胺的摩尔比为1∶8-16，反应后用碱溶液调pH至7-8，对透析液透析1-5天，冻干；式(I)所示的麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物还可通过如下步骤制备而成在0℃至室温下，将麦冬多糖MDG-1悬浮于有机溶剂中，加入氯磺酸-吡啶复合物作为硫酸化试剂，反应生成麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物，其中麦冬多糖MDG-1与氯磺酸-吡啶复合物的用量为1g麦冬多糖MDG-1使用2-5ml氯磺酸-吡啶复合物，反应后用碱溶液调pH至7-8，对透析液透析1-5天，冻干。本专利技术上述制备方法中，所述有机溶剂最好是二甲基亚砜、吡啶、二甲基甲酰胺或甲酰胺，所述碱溶液最好是Na2CO3或NaOH溶液，浓度最好为0.1-1M；所述透析液最好是蒸馏水或NaHCO3溶液。随后的实验将表明MDG-1经硫酸化修饰后，其药理活性有增强的趋势，这可能与硫酸化多糖具有细胞膜的保护作用有关。与离体实验结果相似，整体实验同样表明MDG-1经硫酸化后其抗心肌缺血的活性有增强的趋势，但其抗心肌缺血的活性不与硫酸根取代度呈现正相关性，当硫酸根取代度为0.03-0.08时，药理活性较强，具有明显增强的抗心肌缺血作用，可用于制备抗心肌缺血药物；而取代度为0.12-0.13时，麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物无显著的抗心肌缺血的作用。随后的实验将表明硫酸化MDG-1能非常显著地抑制乳酸脱氢酶的释放，说明其抗心肌缺血的作用机制可能与细胞膜的稳定作用有关。本专利技术用经典的硫酸化衍生物制备方法合成了硫酸化MDG-1，实验结果表明MDG-1经硫酸化后其抗心肌缺血的活性有增强的趋势，其取代度为0.03-0.08时药理活性最强。附图说明图1是麦冬多糖MDG-1的红外图谱；图2是麦冬多糖MDG-1硫酸化衍生物(MDG-1-S)的红外图谱；具体实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步描述。实施例1取麦冬多糖MDG-1400mg，悬浮于50ml二甲基亚砜(DMSO)中，室温搅拌30min，加入DCC(5.0946g)的二甲基甲酰胺(DMF)75ml，混合物迅速冷却至0℃，再加入的H2SO41.2099g的DMF 50ml，在25℃温度下反应30min，混合物倾入装有250g碎冰的烧杯中，用1M NaOH调pH至7-8，滤除不溶物，清液对流动水透析2天，对蒸馏水透析2天，袋内出现沉淀滤除，收集清液，冻干。经测定，MDG-1硫酸酯中硫酸根的取代度为0.03，具有显著抗心肌缺血活性。实施例2取麦冬多糖MDG-1500mg，悬浮于25ml甲酰胺(FA)中，室温搅拌30min，在冰盐浴中冷却至＜0℃，缓慢滴加氯磺酸-吡啶复合物2ml，室温搅拌6h时间，反应完毕，加1M NaOH调pH至7-8，对蒸馏水透析3天，冻干。经测定，MDG-1硫酸酯中硫酸根的取代度为0.1，具有显著抗心肌缺血活性。实施例3取麦冬多糖MDG-1500mg，悬浮于50ml二甲基亚砜(DMSO)中，室温搅拌30min，加入DCC 10.1891g的二甲基甲酰胺(DMF)75ml，混合物迅速冷却至0℃，再加入的H2SO41.2099g的DMF 50ml，在30℃温度下反应60min，混合物倾入装有250g碎冰的烧杯中，用1M NaOH调pH至7-8，滤除不溶物，清液对流动水透析2天，对蒸馏水透析2天，本文档来自技高网...
【技术保护点】
麦冬多糖ＭＤＧ－１硫酸化衍生物，具有式（Ⅰ）所示结构：＊＊＊式（Ⅰ）式（Ⅰ）中ｎ≈６，Ｒ＝Ｈ或－ＳＯ↓［３］Ｎａ，－ＳＯ↓［３］Ｎａ的取代度为０．０３－０．１。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：冯怡，徐德生，郑琴，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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